尤因肉瘤中NKX2.2的表达及其诊断意义

目的探讨NKX2.2在尤因肉瘤(Ewing’s sarcoma,ES)中的表达及与其它小圆细胞肿瘤的鉴别诊断价值。方法采用免疫组化En Vision两步法检测49例ES组织和43例其它小圆细胞恶性肿瘤中NKX2.2、CD99及FLI1的表达,分析NKX2.2并联合其它指标在ES诊断中的敏感性和特异性。结果 NKX2.2在ES中的阳性率为71.43%(35/49),在其它小圆细胞肿瘤中阳性率为9.30%(4/43);NKX2.2在ES中表达的敏感性和特异性分别为71.43%和90.70%。CD99在ES中表达的敏感性和特异性分别为100%和23.26%,FLI1在ES中表达的敏感性和特异性分别为87.76%和30.23%。联合检测NKX2.2与CD99及FLI1对ES诊断的敏感性和特异性分别为65.31%和100%。结论 NKX2.2蛋白是ES诊断和鉴别诊断中有用的标志物,联合检测三者有助于ES与其它小圆细胞肿瘤的鉴别。

尤文肉瘤临床病理学及分子遗传学研究进展

尤文肉瘤是一种好发于儿童及青少年,具有不同程度神经外胚层分化的小圆细胞恶性肿瘤,近年来发病率呈上升趋势,其预后与发病部位、大小、病变范围、手术切缘等多种因素有关。虽然化放疗联合手术治疗使尤文肉瘤患者的生存状况得到了较大改善,但复发和转移患者的预后仍较差,5年生存率不足30%。尤文肉瘤中的特异性染色体易位已成为重要的辅助诊断指标,除EWS和ETS家族基因融合外,还存在FUS-ETS基因融合。近年来又发现一些少见的融合亚型,包括EWS与锌指蛋白家族成员等非ETS基因的融合,如EWSR1-PATZ1、EWSR1-POU5F1、EWSR1-SP3和EWSR1-NFATc2等,这些融合基因不但在尤文肉瘤诊断和鉴别诊断中发挥重要作用,也为阐明尤文肉瘤发生、发展的机制和靶向治疗提供了线索。

分化抑制因子基因沉默的人尤文肉瘤细胞系的建立

目的 应用短发夹RNA（shRNA）技术,构建分化抑制因子（Id2）基因稳定干扰的人尤文肉瘤细胞系,为进一步研究Id2在尤文肉瘤细胞生长、分化中的作用提供有用模型.方法 体外合成3条Id2序列特异性shRNA,构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-Id2真核表达载体,通过脂质体转染尤文肉瘤RD-ES细胞,采用Western blot方法检测Id2蛋白表达水平,采用细胞计数法检测shRNA转染后对细胞生长的影响,采用流式细胞术检测转染前后细胞周期的变化.结果 Western blot结果显示,稳定转染shRNA-Id2-543及shRNA-Id2-593的RD-ES细胞中Id2表达水平降低,与对照组相比分别下降54％及57％;转染组细胞的生长速度明显减慢,与对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;细胞周期S期细胞比例分别为（36.60±1.53）％及（44.89±2.46）％,高于对照组的（29.73±2.03）％,差异有统计学意义（P＜0.05）,G2期比例无明显变化甚至降低.结论 成功建立Id2基因沉默的人尤文肉瘤RD-ES稳定转染细胞系.Id2表达下调可抑制尤文肉瘤细胞增殖,细胞周期阻滞于S期.Id2可能在尤文肉瘤细胞生长增殖中扮演重要角色.

尤文肉瘤组织LKB1和p53及Ki-67表达临床意义

目的LKB1作为新的候选抑癌基因,其在尤文肉瘤中的表达及与细胞增殖的相关性鲜见报道。本研究主要探讨LKB1、p53和Ki-67在尤文肉瘤组织中表达情况及其与临床病理指标的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测2000-01-01-2015-06-12北京大学第三医院病理科收治的45例尤文肉瘤组织中LKB1、p53和细胞增殖指数(Ki-67)表达及其相关性,探讨其与临床病理指标的关系。结果尤文肉瘤组织中LKB1的阳性率为53.3%(24/45),强阳性表达率为13.3%(6/45)。突变型p53表达的阳性率为24.4%(11/45)。Ki-67相对高表达32例(71.1%),相对低表达13例(28.9%),LKB1表达与Ki-67呈负相关性,r_s=-0.301,P=0.044。野生型p53病例中,LKB1表达相对较高(55.9%)。LKB1及p53表达与患者年龄、性别及发病部位无统计学意义的关联性;Ki-67表达与患者年龄呈负关联性(χ^2=8.365,P=0.015),而与性别和发病部位无明显关联性。所有患者随访截至2015-10-28,获得随访27例,其中死亡17例,无瘤生存10例。结论LKB1在尤文肉瘤组织中主要呈缺失或低表达状态,其表达与Ki-67相关,提示LKB1参与了尤文肉瘤细胞生长增殖的调控,这种相关性有待扩大样本进一步研究。