ELISA法检测HBsAg影响结果的重要因素的分析

目的确定温育温度、时间和条件对定性酶联免疫吸附试验(ELISA)测定结果的影响,为临床检验提供最佳方案。方法温育温度分别设为37℃组和室温组。37℃组温育时间分别为45分钟、60分钟、75分钟、90分钟和120分钟。其中室温组温育中又分别采用振荡和静置两种条件,温育时间分别为45分钟、1小时、2小时和4小时。检测阴性血清和0.2、0.5、1、2、5 ng/ml HBsAg系列定值血清,观察这些条件下标本测定S/CO比值的差异。结果在同一温育温度下,所有被检血清的S/CO比值均随着测定温育时间的延长而增大,浓度越低表现越为明显,以0.2 ng/ml的样本,温育2小时的S/CO比值与温育1小时相比,均有明显的增加,0.2 ng/ml的样本由按CUT-OFF值判断为阴性而转为阳性。对照组阴性血清的S/CO比值在温育各时间则变化不大。室温组在振动状态下反应较之静止状态下的反应,S/CO比值均有明显增加。结论温育条件对ELISA测定结果有很大影响,尤其是弱阳性标本,由于温育条件不当会造成假阴性,增加传染机率。

慢性乙型肝炎患者IL-6及TNF-α的水平与外周血T-淋巴细胞亚群检测临床诊断价值及其意义

目的研究IL-6、TNE-α及T淋巴细胞亚群在慢性肝病中的作用及其临床诊断价值。方法应用ELISA方法检测111例慢性乙型肝炎,肝炎后肝硬化患者血清中IL-6、及TNF-α的含量及流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群的变化。结果慢乙肝轻度、慢乙肝中、重度及乙肝后肝硬化患者血清中IL-6值明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.05),与TBIL及ALT的血清含量呈正相关(P<0.01,P<0.01);慢乙肝轻度、慢乙肝中、重度及肝炎后肝硬化患者血清TNF-α值明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01),与TBIL及ALT含量呈正相关(P<0.01,P<0.01);对其中50例慢乙肝检测T-淋巴细胞亚群:CD4下降(P<0.05),CD8升高(P<0.05),CD4/CD8比值下降(P<0.05)。结论血清IL-6及TNE-α可作为反映肝内炎症活动性的指标。慢性乙型肝炎T-淋巴细胞亚群分化异常,CD4下降,CD8升高可作为病情观察的指标。

巨细胞病毒感染对孕妇及胎儿影响的研究

目的探讨孕妇巨细胞病毒感染对胎儿的影响。方法采用ELISA和PCR法,对280例孕妇的血清同时进行检测,ELISA检测HCMV-IgM、PCR法检测HCMV-DNA。结果1·HCMV-IgM阳性17例,阳性率为6·07%。PCR法检测血清HCMV-DNA,阳性44例,阳性率为15·71%。ELISA法和PCR法检测同时阳性为6例,280例孕妇HCMV感染阳性共计55例,阳性率为19·64%。2·对55例HCMV感染(+)孕妇和27例感染(-)孕妇的胎儿脐血应用ELISA和PCR法检测,观察孕妇的妊娠结果,追踪HCMV感染孕妇的婴儿近期发育情况。55例HCMV感染(+)孕妇的胎儿脐血HCMV-IgM和HCMV-DNA阳性14例,阳性率即为宫内传播率,为25·45%。27例感染(-)孕妇的胎儿脐血HCMV-IgM,HCMV-DNA均阴性。对HCMV感染阳性及阴性的母儿HCMV感染情况相关观察,有显著性差异。3·14例先天感染儿中畸胎2例,1例为小头畸形,另1例唇裂。4·随访HCMV感染(+)孕妇的婴儿31例中,3例感染儿发育异常,异常率为9·67%,27例无先天感染儿随访中未见异常,先天感染儿发育异常显著高于无先天感染儿(P<0·005)。结论HCMV感染在本地区的感染较严重,对计划生育中的优生优育影响较大,本文结果为提高预防HCMV感染有积极的指导价值。

老年肝病患者血FII:CA的检测及临床意义

目的评价凝血酶原活性(FII:CA)对老年肝病患者肝功能的影响。方法应用巨齿蛇毒显色底物法检测老年肝病患者FII:CA93例及≥60岁健康老人和≤45岁健康青壮年各30例,并比较分析。结果正常老人与青壮年的FII:CA差异有显著性,老年肝病患者FII:CA明显低于健康老年人的FII:CA。结论老年肝病患者应及时检测FII:CA。

中国东北地区HTLV-1的前病毒DNA测定及其意义

目的了解我国东北的HTLV-1的流行情况及病毒特征。方法从2002年起在东北地区共采取了941份标本,用免疫荧光法进行了血清抗体的检测,经PCR扩增及Southern杂交鉴定。结果发现3例HTLV-1阳性感染病人,阳性率0.3%,没有发现HTLV-2阳性感染病人;在37例淋巴细胞白血病患者中检出2例,检出率5.4%。并对其中1例阳性感染病人的外周血单个核细胞(PBMCs)中的前病毒DNA的env基因的gp21、gp46两个碱基对核甘酸序列进行了PCR扩增,并将其克隆到T-Vector上进行DNA的核甘酸序列测定,与日本原型(ATX)病毒DNA链的相应区域的线性比较显示了很高的同源性(98.9%-100.%),没有发现碱基的插入、删除和其他显著性的变化。结论东北地区为HTLV-1的非流行区,于淋巴细胞白血病病人检出率(5.4%)较高,说明东北地区的淋巴细胞白血病与HTLV-1感染有一定的关系。

肝细胞生长因子协同作用的研究

目的；探讨乳猪肝源性与肠源性ＨＧＦ活性物质联合应用在促进肝细胞再生方面的作用。：应用「＾３Ｈ」－ＨｄＲ掺入法观察ＨＧＦ对各实验组体外原代肝细胞培养及小鼠活体肝细胞刺激作用。结果；乳猪小肠粘膜存在ＨＧＦ活性而且与肝源性ＨＧＦ有明显的协同作用，同时证明这种协同作用并非胰蛋白酶所致。结论：乳猪肝源性与肠源性ＨＧＦ活性物质在刺激肝细胞再生方面具有协同作用，可作为ＨＧＦ制备过程中综合利用乳猪原材料的依据。

老年肝病患者血FII:CA的检测及临床意义

目的：评价凝血酶原活性对老年肝病患者肝功能的影响。方法：应用巨齿蛇毒显色底物法检测老年肝病患者ＦⅡ：ＣＡ９３例。结果：正常老人与青壮年的ＦⅡ：ＣＡ有显著差异，老年肝病患者ＦⅡ：ＣＡ明显低于健康老年人的ＦⅡ：ＣＡ。结论：老年肝病患者应及时检测ＦⅡ：ＣＡ。

RFLP法检测PBMCs和血浆中HCV基因型的相关性与慢性化的关系

目的检测HCV感染者血浆和外周血单个核细胞(PBMCs)中HCV基因型的相关性,同时研究不同型的HCV与丙型肝炎复发及慢性化的关系。方法应用特异性限制性片段长度多态分析(RFLP)—酶切分型法进行基因分型。结果82例血浆HCVRNA阳性的病例中1b(Ⅱ)型为37例(45.1%),2a(Ⅲ)型为34例(41.5%),1b/2a(Ⅱ/Ⅲ)型为11例(13.4%)。PBMCs中HCVRNA阳性的为54例(65.85%),其中1b型为38例,2a型为12例,1b/2a型为4例。结论HCV感染人体后,不但在血浆中可以检测到HCVRNA,而且也可以在PBMCs中检测到HCVRNA。同时HCV1b型比2a型更易感染PBMCs,HCV1b型感染者易出现慢性持续性感染,以至于发展为肝硬化。

RFLP法检测PBMCS和血浆中HCV基因型的相关性与慢性化的关系

目的检测HCV感染者血浆和PBMCS中HCV基因型的相关性,同时研究不同型的HCV与丙型肝炎复发及慢性化的关系。方法应用特异性限制性片段长度多态分析(RFLP)—酶切分型法。结果在82例血浆HCVRNA阳性的病例中Ⅱ型为37例,Ⅲ型为34例,Ⅱ/Ⅲ型为11例。在PBMCs中HCVRNA阳性54例,其中Ⅱ型为38例,Ⅲ型为12例,Ⅱ/Ⅲ型为4例。结论人HCV感染后,不但在血浆中可以检测到HCVRNA,也可以在PBMCS中检测到HCVRNA。同时HCVⅡ型比Ⅲ型更易感染PBMCs,并且HCVⅡ型感染者易出现慢性持续性感染,以至于发展为肝硬化。

PBMCs和血浆中HCV基因型的临床意义

目的检测HCV感染者血浆和PBMCs中HCV基因型的相关性,同时研究不同型的HCV与丙型肝炎病情的关系。方法应用特异性限制性片段长度多态分析(PFLP)—酶切分型法。结果在82例血浆HCVRNA阳性的病例中Ⅱ型为37例,Ⅲ型为34例,Ⅱ/Ⅲ型为11例。在PBMCs中HCVRNA为阳性的为54例,其中Ⅱ型为38例,Ⅲ型为12例,Ⅱ/Ⅲ型为4例。结论HCV感染人体后,不但在血浆中可以检测到HCVRNA,而且也可以在PBMCs中检测到HCVRNA。同时HCVⅡ型比Ⅲ型更易感染PBMCs,并且HCVⅡ型感染者易出现慢性持续性感染,以至于发展为肝硬化。