我国与WHO血液制品去除/灭活病毒技术方法与验证指导原则的比较研究

目的:比较我国现行《血液制品病毒去除/灭活验证指导原则》[国药监注(2002)160号]与世界卫生组织(WHO)《血液制品病毒去除/灭活验证指南》,旨在推动我国血液制品病毒风险控制与管理水平的提高及血液制品的合理应用。方法:从去除/灭活病毒方法的选择、常用去除/灭活病毒方法评价、特定的去除/灭活病毒方法验证、生产工艺去除/灭活病毒能力、去除/灭活病毒方法再验证、临床试验、输血用病毒灭活血浆和正在开发的新型病毒灭活方法等几个方面进行比较,对血浆及其制品生产工艺中病毒灭活/去除的相关方法及其验证进行研究。结果与结论:我国现行《血液制品病毒去除/灭活验证指导原则》与WHO《血液制品病毒去除/灭活验证指南》总体要求基本一致,对我国血液制品去除/灭活病毒技术方法与验证工作仍具有适用性和指导性。

浅谈疫苗批签发资料审核关键点

目的:践行疫苗全生命周期最严格监管和质量控制,总结批签发资料审核的重点和关键点,为疫苗批签发资料审核工作和省级药品检验机构疫苗批签发能力巩固和提升提供借鉴。方法:围绕《生物制品批签发管理办法》中资料审核相关法规的内容,结合多年积累的疫苗批签发资料审核经验,对批签发资料审核过程中的重点和关键点进行总结、分析和研究。从批签发实施和能力提升角度,对资料审核的实施依据、资料审核的重点、关键点和资料审核常见问题举例等方面深入阐述。结果和结论:批签发资料审核过程中应将工艺参数、质量标准、检验结果和趋势分析等信息作为审核重点和关键点。资料审核能够发现和解决疫苗生产和检验过程中出现的问题,可作为疫苗上市前生产验证和质量控制的手段。本文可为其他生物制品资料审核提供参考。

不同的流行性乙型脑炎疫苗在小鼠体内的免疫原性比较

比较乙型脑炎活疫苗与灭活疫苗在小白鼠的免疫原性。结果表明以腹腔攻击法测定，活疫苗免疫1钟后7天和14天的保护率无下降，而灭活疫苗免疫2针后14天的保护率较7天下降30％～50％。以脑内攻击法测定，活疫苗免疫1外或2针的保护率为70％～90％。而灭活疫苗免疫2针的保护率仅为10％～33％。活疫苗免疫后动物中和抗体水平虽然很低（1：5），但仍有很强的保护力。提示活疫苗免疫的保护力除体液免疫外可能还存在细胞免疫。

疫苗研制中电子天平的科学管理与合理应用

目的:在疫苗研制过程中电子天平是质量称重的首选仪器,通过对其进行科学的管理和正确的使用,以保证准确地进行质量量值传递。方法:通过对电子天平采购、验证、维护保养及记录等法规方面的介绍,探讨和研究电子天平的科学管理与合理应用。结果:规范电子天平的管理和使用,确保在疫苗研制过程中提供的检测结果准确可靠。结论:电子天平称量数据的准确度关系到疫苗研制结果的准确性。因此,科学的管理和正确的使用电子天平可以减少误差,为出具严谨、科学的检测数据提供硬件保障。

流行性乙型脑炎减毒活疫苗生产毒种(SA14-14-2株)及其疫苗的表型和E基因稳定性研究

目的 对乙脑减毒活疫苗SA14 14 2株生产毒种及其疫苗病毒滴度、脑内毒力和E区核苷酸序列进行回顾性测定。方法 应用乳金黄地鼠肾传代细胞 (BHK 2 1)结晶紫蚀斑法进行病毒滴度的测定 ,小鼠脑内法检测疫苗脑内毒力。应用RT PCR方法扩增SA14 14 2生产毒种和疫苗E区的核苷酸 ,经凝胶层析纯化的PCR产物直接用于测序或克隆到pGEM T载体中 ,经酶切和PCR鉴定后进行测序。结果 疫苗在 - 2 0℃保存长达 10多年 ,疫苗病毒滴度下降不超过 0 5lg;脑内毒力未见毒力回升。病毒蚀斑形态仍保持较SA14野毒株形态小的特性 ;以不同批次疫苗和生产毒种提取的病毒RNA作为模板进行RT PCR扩增 ,扩增的基因片段与预期大小一致 ;E区基因序列与野毒株差异的 8个氨基酸没有一个发生回复突变。结论 SA14 14

流行性乙型脑炎减毒活疫苗对国内外不同野毒株的免疫性

目的 研究乙型脑炎减毒活疫苗对国内外不同野毒株的免疫原性。方法 用小鼠保护力试验和空斑减少中和试验检测该疫苗对国内外不同野毒株攻击的保护作用及其免疫血清的中和能力。结果 小鼠免疫 1针后均能抵抗国内 11株和国外 11株乙脑病毒的攻击 ,保护率均可达 90 %以上 ;人体免疫血清对台湾 1株和国外 9株病毒均有明显的中和作用。结论 SA14 142株乙脑活疫苗具有广谱的免疫原性。

乙型脑炎减毒活疫苗批签发管理与质量评价

目的比较乙型脑炎减毒活疫苗实施批签发前后的质量变化,评价疫苗的质量控制。方法通过对市场抽检疫苗样品和批签发送检的疫苗样品质控关键项目测定结果及制造和检定记录摘要审核,对疫苗的质量和改进趋势进行分析、归纳和总结。结果3个企业生产的乙脑活疫苗在1990～2004年期间,尤其是生产初期,疫苗病毒滴度≥5.7lgpfu.mL-1的批次合格率为58.6%～100%;疫苗热稳定性试验合格批次占15%～100%;其中A企业2001～2004年,疫苗热稳试验100%合格。从2005年实施批签发后,3个企业生产的乙脑活疫苗病毒滴度均为100%合格。2006和2008年国家市场监督抽验的疫苗病毒滴度结果合格率达97.4%。结论乙脑活疫苗实施批签发后的病毒滴度合格率达100%,较实施前有明显提高。国家市场监督抽验的疫苗测定结果显示,乙脑活疫苗的质量稳定,病毒滴度合格率为97.4%。通过疫苗批签发可以准确、具体的了解企业生产和质量管理情况,督促企业规范生产、完善工艺、加强质量管理。

冻干乙脑减毒活疫苗保护剂的筛选

目的 筛选冻干乙脑活疫苗的保护剂。方法 通过优化组合筛选出A、C、D、E、F 5种保护剂配方 ,其中A为现行生产配方作为对照与其他配方进行比较。结果 使用A保护剂的疫苗在 37℃放置 7d和 2 1d ,病毒滴度分别下降 0 .98和 1.6 6LogPFU/ml;使用D、E保护剂的疫苗热稳定性最好 ,在 37℃放置 7d滴度分别下降 0 .19和 0 .0 7LogPFU/ml,2 1d分别下降 0 .42和 0 .39logPFU/ml。结论 D。

流行性乙型脑炎特异性IgM、IgG诊断试剂盒的研制和应用

应用乙脑病毒感染BHK21细胞制备抗原，建立检测乙脑特异性IgM、IgG的诊断试剂盒，以ELISA捕捉法检测了107份临床疑似乙脑的患者血清，IgM阳性率为61．7％。该法比血抑法简便、敏感，不需要双份血清，可用于临床早期诊断。应用抗体夹心法检测了21份患者血清，IgG阳性率为61．9％，与ELISA捕捉法检测的符合率达100％。抗体夹心法与ELISA捕捉法可联合用于回顾性临床诊断和大规模流行病学调查。

国内外3种乙脑疫苗在小鼠体内的保护力试验比较

比较乙型脑炎（ＪＥ）ＳＡ１４１４２减毒活疫苗、地鼠肾细胞灭活疫苗（ＨＫＶ）和鼠脑纯化疫苗（ＭＢＶ）在小鼠体内的免疫保护效果。采用免疫后以Ｐ３株和中山株（Ｎａｋ）腹腔或脑内攻击的方法。结果表明乙脑ＳＡ１４１４２减毒活疫苗免疫１次对２株乙脑病毒的腹腔攻击均有１００％保护，对脑内攻击亦有较好的保护（４０％～８０％），而２种灭活疫苗仅对腹腔有一定的保护（４０％～８０％），对脑内几乎无保护。３种疫苗均可诱生中和抗体（ＮＡ），活疫苗与ＭＢＶ的抗体水平无明显差异，但保护力活疫苗明显高于ＭＢＶ。ＭＢＶ虽较ＨＫＶ诱生的中和抗体高，但保护力却不比ＨＫＶ高。因此结果表明中和抗体与保护力并无绝对的相关关系，活疫苗具有诱生体液和细胞免疫的全面免疫。

乙型脑炎灭活疫苗效力参考品的制备及稳定性

目的 制备乙型脑炎灭活疫苗国家效力参考品。方法 按《中国生物制品规程》要求制备乙型脑炎灭活疫苗原液 ,经超滤处理后加入冻干保护剂 ,制成冻干参考品并进行检测标定。结果 经检测 ,效力参考品外观、水分、无菌试验、效力试验均合格 ,稳定性好 ,且T值可保持在较高水平。

抗体捕捉ELISA法检测流行性乙型脑炎特异IgM抗体

用乙型脑炎病毒感染ＢＨＫ（２１）细胞制备ＥＬＩＳＡ抗原．建立了检测乙脑特异性ＩｇＭ抗体的抗体捕捉ＥＬＩＳＡ法，检测８４份临床医似乙脑病人血清，阳性检出率为６０．７％，可用于早期的临床诊断．该方法简便、敏感，不需要双份血清．优于血抑法．

应用蚀斑法和细胞病变法检测乙型脑炎减毒活疫苗病毒的比较

应用蚀斑法（ＰＦＵ）和细胞病变法（ＣＰＥ）检测乙型脑炎减毒活疫苗的病毒滴度，比较结果：①两种方法同时对同一批乙脑活疫苗进行１０次测定，ＣＰＥ滴定结果比ＰＦＵ滴定高１０Ｌｏｇ值，标准差Ｓ＝０１９６，变异系数ＣＶ％＝１９２％；②对不同批乙脑活疫苗检测，仍以ＣＰＥ法高于ＰＦＵ，差值Ｘ＝１２０，标准差Ｓ＝０３１，变异系数ＣＶ％＝２５６％；③ＰＦＵ法对同一批疫苗滴定３０次，乙脑活疫苗参考品滴定１８次，变异系数仅为１４８％和１２７％。结果表明，虽然ＣＰＥ法用于滴定乙脑活疫苗的滴度高于ＰＦＵ法，但蚀斑法系统误差小，重复性好，结果客观可靠，可避免ＣＰＥ法中由于细胞退化和工作人员主观判定造成的系统误差。

实验用仪器设备的期间核查工作探讨

保持实验用仪器设备的准确性和可信性状态,是出具严谨、科学和准确检验报告的前提保障。本文阐述了实验用仪器设备期间核查的目的、意义、方法、结果判定和分析。依据国际、国家法规的相关要求,总结出实验仪器设备期间核查的正确选择和计划的制订、实施等一般要求,为规范开展实验用仪器设备的期间核查工作提供参考。

乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴度参考品(200010)的建立和标定

乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴度的检测是疫苗活性和效力的直接数据佐证 ,是一项关键的指标。为了控制病毒检测系统的误差 ,建立了乙型脑炎病毒滴度参考品 (批号 2 0 0 0 10 )。该批参考品的制备工艺同乙脑活疫苗的生产工艺。参考品病毒滴定采用金黄色地鼠传代细胞 (BHK— 2 1)蚀斑滴定法。该批乙脑减毒活疫苗病毒滴度参考品病毒滴度平均值 7 0lgPFU·ml-1,试验检测范围 (± 2S) :6 7～ 7 3lgPFU·ml-1。

Sindbis病毒蚀斑方法的建立及其在血液制品病毒灭活实验中的应用

实验建立了Ｓｉｎｄｂｉｓ病毒在ＢＨＫ－２１细胞内蚀斑形成的方法，Ｓｉｎｄｂｉｓ病毒接种于ＢＨＫ－２１细胞内，３天半染色，结果显示蚀斑清晰可见，直径为２－４ｍｍ，病毒滴度已达高峰期，同时将此方法用于血液制品病毒灭活实验中，结果表明该方法准确、客观，Ｓｉｎｄｂｉｓ病毒在Ｓ／Ｄ低ｐＨ孵放法等灭活病毒实验中作为有脂质包膜类病毒的指示病毒具有相对稳定性。

弹性柱销安全联轴器的设计与应用

结合工程实例对弹性柱销安全联轴器的安全性及参数的选取作了详细的阐述 ,指出其在低转速、高转矩的传动设备中使用 ,可取得很好的效果。

提纯流行性乙型脑炎疫苗不同免疫剂量的反应

作者应用不同抗原含量的提纯乙型脑炎疫苗,在8～10岁小学儿童中进行了反应观察。第1针接种后未发现明显的局部反应,全身反应以接种5μg 疫苗者最低,但均较常规苗为高。第2针接种后,局部及全身反应与常规疫苗没有显著差异。作者结合免疫效果观察结果认为,接种5μg 提纯苗反应轻微并能产生高滴度抗体,可进一步扩大使用。

麻疹乙脑二联活疫苗猴体神经毒力试验

目的 观察麻疹乙脑二联活疫苗对猴体的安全性。方法 应用麻疹乙脑二联活疫苗注射恒河猴 脑内和脊髓，以麻疹和乙脑单价苗作对照，进行临床体征和组织病理学观察以及抗体测定。结果 全部试验猴临 床体征无异常反应，组织病理学检查联苗组大脑皮质和中脑黑质、颈髓仅见轻微炎症反应，病变均＜５％，未见神经 细胞坏死现象。麻疹抗体应答较好，乙脑抗体有轻微的升高。结论 麻疹乙脑二联活疫苗的神经毒力与两种单价 苗比较未见增强。