2020年河南省病媒生物监测

目的了解2020年河南省病媒生物种群构成、密度及季节消长规律,为病媒生物防控提供科学依据。方法鼠类监测采用夹夜法,蚊虫监测采用诱蚊灯法,蝇类采用诱蝇笼法,蟑螂采用粘捕法。结果2020年河南省鼠类捕获率为0.57%,小家鼠为优势种,居民区、重点行业和农村自然村捕获率分别为0.53%、0.52%和0.66%。蚊类平均密度为9.20只/(灯·夜),淡色库蚊为河南省优势种,其中牲畜棚的蚊密度最高,为18.49只/(灯·夜)。蝇类平均密度为8.39只/笼,家蝇为河南省优势种群,农贸市场蝇密度最高,为10.43只/笼。蟑螂平均密度为0.12只/张,德国小蠊为优势种。鼠类和蟑螂全年均有活动,鼠类季节消长呈单峰分布,在9月达峰值0.91%;蟑螂季节消长呈双峰分布,在3月、9月为高峰,分别为0.24、0.15只/张。蚊、蝇季节消长均呈单峰分布。蚊虫在8月达峰值,为15.05只/(灯·夜);蝇类在6月达峰值,为22.40只/笼。结论掌握了2020年河南省病媒生物种群构成、密度及季节消长规律,为河南省病媒生物防控提供了科学依据。

谷氨酸合酶在灵芝中生物学功能的研究

[目的]通过对谷氨酸合酶(glutamate synthase,GOGAT)的基因序列进行预测和分析,构建谷氨酸合酶基因的沉默转化子,验证谷氨酸合酶在灵芝吸收、利用氮源、生长及次级代谢中的作用。[方法]利用真菌中已报道的谷氨酸合酶基因,在灵芝基因组库中分析比对得到灵芝中可能的谷氨酸合酶基因。通过构建进化树和结构域分析及酶活性测定,确定灵芝谷氨酸合酶序列。随后利用RNA干扰技术,将灵芝的GOGAT基因进行沉默,研究GOGAT对灵芝生长及次级代谢的影响。[结果]获得灵芝谷氨酸合酶序列,该酶具有保守的谷氨酸合酶结构域,并且在进化上高度保守。在4种氮源(谷氨酰胺、铵盐、脯氨酸和硝酸盐)条件下检测谷氨酸合酶活性和基因转录水平,野生菌株中的GOGAT比酶活和转录水平在不同氮源条件下没有显著变化。通过RNA干扰方法,获得沉默效率分别为(77.0±1.9)%和(77.5±2.0)%的GOGAT沉默菌株2株。平板试验表明,将GOGAT沉默后,灵芝菌丝的生长受到一定程度的抑制。在硝酸盐培养条件下,相比于野生菌株,GOGAT沉默菌株基本停止生长;而在脯氨酸存在条件下,2株沉默菌株的生长直径分别降低(16.0±1.9)%和(21.0±1.3)%。进一步检测灵芝三萜含量发现,当使用铵盐或脯氨酸作为唯一氮源培养时,相比于对照菌株,GOGAT沉默菌株中的灵芝三萜含量分别降低(32.1±4.5)%和(11.0±1.1)%;而以谷氨酰胺和硝酸盐培养时,各菌株中的灵芝三萜含量没有显著变化。[结论]本研究获得了灵芝中合成谷氨酸的重要酶基因GOGAT,发现其对灵芝的生长及次级代谢十分重要。

河南省2019-2022年媒介伊蚊监测:幼蚊种群特征及登革热风险分析

目的了解河南省登革热媒介伊蚊的种群密度和季节消长,为登革热风险评估、监测预警及控制提供科学依据。方法2019-2022年每年5-10月的伊蚊活动季节,采用布雷图指数(BI)法在河南省14个监测县(区)进行媒介伊蚊监测。使用Excel 2010软件汇总监测结果,判定风险等级,计算季节指数。使用SPSS 25.0软件,采用t检验和方差分析比较不同年度、不同地区BI的差异。结果2019-2022年媒介伊蚊BI分别为15.31、14.27、11.34和12.32,7、8月为蚊密度高峰。4年累计330次监测中有85次(25.76%)的监测结果达到区域流行风险、70次(21.21%)达到暴发风险、77次(23.33%)达到传播风险、98次(29.70%)无传播风险,河南省南部达到区域流行风险的比例高于黄河以北和黄河沿线。2020-2022年各监测点的监测结果与2019年相比,差异均无统计学意义(均P>0.05),不同区域之间监测结果差异亦均无统计学意义(均P>0.05)。结论河南省媒介伊蚊密度偏高,伊蚊活动高峰季节大多数监测点具备潜在登革热传播条件,预计未来输入性登革热病例会有较大增加,需要密切关注国内国际登革热疫情变化,做好应急处置准备。

河南省南阳市登革热媒介白纹伊蚊生态学监测

目的 了解河南省南阳市媒介白纹伊蚊孳生地分布、密度、季节消长规律,为白纹伊蚊传播疾病风险评估、预测、预警及控制提供科学依据。方法 本研究于2020年5—11月和2021年4月进行,采用布雷图指数(breteau index,BI)、容器指数(container index, CI)和诱蚊诱卵器(Mosq-ovitrap index, MOI)法,对白纹伊蚊幼虫密度进行监测,采用双层叠帐法调查白纹伊蚊成蚊密度。应用SPSS 25.0软件进行数据统计分析。结果 白纹伊蚊幼虫平均BI值为7.05、CI值为25.54、MOI值为1.08,成蚊平均帐诱指数为5.37只/(顶·时)。白纹伊蚊4—11月活动,活动高峰为7—8月。闲置容器是白纹伊蚊的主要孳生场所,占总数的68.09%,其中废旧轮胎的CI值最高,为41.98。结论 南阳市媒介伊蚊孳生地分布广泛,平均密度指数超过阈值水平,登革热潜传播风险显著。优先进行环境治理,清理居民区特别是农村居民区的孳生地,对于控制媒介伊蚊密度和降低媒介伊蚊传播疾病的风险至关重要。

河南省家蝇种群对拟除虫菊酯类杀虫剂敏感性测定和击倒抗性基因突变研究

目的建立河南省家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感基线,分析部分野生家蝇种群的击倒抗性基因多态性。方法家蝇敏感品系为实验室饲养多年的家蝇种群,未接触过杀虫剂;野生种群为2019-2021年间采集自开封、安阳、南阳、驻马店和鹤壁市等地的野外家蝇。采用微量点滴法检测雌成蝇对氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯的半数致死剂量(LD50)。采用等位基因特异性PCR(AS-PCR)技术检测各家蝇种群击倒抗性基因的基因型及其突变率,并检验击倒抗性基因突变率与LD50的相关性。采用DNA测序方法验证AS-PCR的结果。结果氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯对家蝇敏感品系的LD50分别为0.1510、0.0772和0.1666µg/♀,对开封种群的LD50分别为0.3216、0.1306和2.2354µg/♀,对安阳种群的LD50分别为0.8677、0.4592和1.5916µg/♀,对南阳种群的LD50分别为5.1737、1.0372和0.4161µg/♀,对驻马店种群的LD50分别为0.6341、0.1082和0.2624µg/♀,对鹤壁种群的LD50分别为2.7450、1.1029和2.5560µg/♀。家蝇敏感品系仅检测到1种基因型,即敏感纯合子,野生种群共检测到5种基因型,分别为敏感纯合子(L/L)、敏感/1014F杂合子(L/F)、敏感/1014H杂合子(L/H)、1014F/1014H杂合子(F/H)和1014H纯合子(H/H)。野生种群的突变率分别为14.84%、17.97%、13.28%、10.16%和20.31%。相关性检验显示家蝇种群对高效氯氰菊酯的抗性与L1014H突变相关。对130个家蝇样本的5种基因型进行测序,AS-PCR检测结果的准确率为79.23%。结论建立了河南省家蝇敏感基线,可作为河南省家蝇抗药性监测的参考值。AS-PCR技术能够用于家蝇抗药性基因的日常监测。

大型洪涝灾害后卫生消毒的应对措施与问题探讨

卫生消毒是预防洪涝灾害等突发公共卫生事件后传染病暴发流行的重要手段。1998年长江沿岸特大洪涝灾害和2012年特大暴雨引发的华北城市内涝等灾害发生后,各级政府都通过采取有效的卫生消毒防疫措施确保了“大灾之后无大疫”^([1-2])。本文通过梳理2021年河南省疾控系统在洪涝灾害中的卫生消毒应对措施,探讨了区域性大型洪涝灾后消毒应对措施中存在的问题及解决办法,以期为近期京津冀地区和东北地区洪涝灾害后疫情防控提供经验借鉴,提高基层卫生消毒应急处置能力。

河南省信阳地区家畜寄生蜱感染巴贝虫的分子流行病学调查

目的了解河南省信阳地区家畜寄生蜱感染巴贝虫的情况。方法2022年6—8月在河南省信阳市光山县和商城县采集家畜动物体表寄生蜱,采用形态学和PCR扩增蜱虫16S rDNA鉴定蜱虫种类。提取蜱虫基因组DNA,采用巢式PCR扩增巴贝虫18S rRNA基因。目的条带经测序后,进行BLAST比对分析,采用邻接法构建系统进化树,采用MEGA7.0软件进行同源性分析。结果共采集335只蜱,形态学和PCR扩增鉴定结果显示,长角血蜱49只、微小扇头蜱208只、褐黄血蜱1只、具环扇头蜱34只、刻点血蜱43只。PCR扩增结果显示,335份蜱虫样品中有2份样品扩增出巴贝虫400 bp大小的目的条带,蜱虫巴贝虫总阳性率为0.6%。BLAST比对分析结果显示,1份样品扩增出的18S rRNA序列与GenBank中来自美国(MK609547)、泰国(MG199181)、中国(KU204794)的田鼠巴贝虫序列相似性均达99.26%;另1份样品扩增出的18S rRNA序列与GenBank中来自美国(MH620203)、印度(MN161136)和中国(KP666166)的吉氏巴贝虫序列相似性均达100%。系统进化树分析结果显示,田鼠巴贝虫阳性样品与来自俄罗斯(KX987864)、中国(KU204794)、泰国(MG199179)等地的田鼠巴贝虫聚在同一分支上,同源性较高;吉氏巴贝虫阳性样品与来自中国(FJ769386)、美国(MH620203)和印度(KF606884)等地的吉氏巴贝虫聚在同一分支上,同源性较高。结论河南省信阳地区家畜寄生蜱存在田鼠巴贝虫和吉氏巴贝虫感染,可能对人和家畜有一定的致病风险。

2022年河南省病媒生物生态学监测分析

目的掌握2022年河南省主要病媒生物的种群构成、密度及季节消长等生态学规律,为河南省病媒生物防控提供科学依据。方法鼠类监测采用夹夜法、笼夜法和粘鼠板法,全年单月监测;蚊虫监测采用诱蚊灯法,5-10月监测;蝇类采用诱蝇笼法,4-10月监测;蜚蠊采用粘捕法,全年单月监测。使用Excel 2010软件收集、整理数据。结果2022年河南省鼠类监测累计回收有效夹114124夹/笼/板,捕获鼠类651只鼠,鼠类捕获率为0.57%,小家鼠为优势种,全年鼠密度波动不大,城镇居民区、重点行业和农村自然村捕获率分别为0.46%、0.55%和0.69%;累计布放诱蚊灯3390灯次,捕获雌蚊26585只,雌蚊总密度为7.84只/(灯·夜),淡色库蚊为优势种,蚊密度高峰期在6-8月,其中养殖场的蚊密度最高,为21.72只/(灯·夜);累计布放1803笼次诱蝇笼,捕蝇8475只,蝇类平均密度为4.70只/笼,优势蝇种为家蝇和麻蝇,蝇密度高峰为7月,其中农贸市场蝇密度最高,为5.52只/笼;累计回收有效粘蟑纸23075张,共捕获2038只蜚蠊,蜚蠊平均密度为0.09只/张,德国小蠊为优势种,农贸市场蜚蠊密度最高,为0.24只/张,蜚蠊密度高峰为9月。结论河南省农村自然村的鼠类、养殖场的蚊虫、农贸市场的蝇类和蜚蠊为病媒生物重点孳生及防制对象,应结合病媒生物季节消长,抓住关键时期开展综合防治,控制病媒生物性传染病的发生。

2021年河南省疾控机构病媒生物控制工作能力调查

目的了解河南省各级疾控机构病媒生物控制工作现状,为开展病媒生物工作提供依据和建议。方法2021年3月通过调查问卷收集全省疾控机构病媒科室设置、人员情况、实验室、工作经费等信息并进行统计分析。结果共调查全省173家疾控机构,87家设置有病媒专业部门,专业部门设置率50.29%。从事病媒专业人员604人,学历以大专及以下为主,占68.71%;职称以初级及其他为主,占77.82%,高级占5.13%;工作年限以10年以下为主,占68.87%。市、县级疾控配置病媒专业平均为5.17人、3.26人。设置各类病媒实验室的机构占28.32%,配发工作经费的机构占41.04%。结论河南省疾控机构病媒生物控制工作能力现状不理想,应从部门设置、人力、经费、实验室等方面提高病媒生物控制工作能力。

2021年河南省白纹伊蚊对杀虫剂抗药性监测

目的了解河南省登革热传播媒介白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为杀虫剂的选择和合理使用提供科学依据。方法选取许昌、洛阳、开封、焦作及濮阳等5个市,在城区不同方位采集白纹伊蚊幼虫,采用浸渍法和成蚊接触桶法测定白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平。结果白纹伊蚊幼虫对高效氯氰菊酯的抗性倍数为20.00~199.22,其中濮阳呈中抗水平,其它监测点均呈高抗水平;对溴氰菊酯的抗性倍数为320.00~525.00,均呈高抗水平;对双硫磷的抗性倍数为7.91~12.09,其中,焦作呈中抗水平,其它监测点均呈抵抗水平;对残杀威抗性倍数为0.24~3.32,其中,洛阳呈抵抗水平,其它监测点均呈敏感水平。白纹伊蚊成蚊暴露于马拉硫磷、残杀威、高效氯氰菊酯和溴氰菊酯后,24 h的死亡率分别为86.95%~98.67%、78.57%~88.06%、62.12%~88.06%和74.65%~89.04%。在濮阳监测点白纹伊蚊成蚊对马拉硫磷敏感,其它监测点白纹伊蚊成蚊均对四种杀虫剂呈现不同程度抗药性。结论白纹伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂已产生不同程度抗性,对氨基甲酸酯类和有机磷类杀虫剂呈现敏感或可疑抗性。

河南省2020年蝇类监测结果分析

目的了解河南省2020年人居及周边环境蝇类常见种类、密度及季节消长,为科学防控提供依据。方法2020年4-10月选择居民区、餐饮外环境、绿化带、农贸市场4类生境,采用笼诱法进行蝇类监测,获取的数据进行描述性分析。结果 2020年河南省蝇类总密度为8.39只/笼,优势蝇种为家蝇、厩腐蝇和麻蝇,分别占41.49%、19.26%和11.00%;不同生境中农贸市场蝇类密度最高,达10.43只/笼;蝇类总密度季节消长呈单峰分布,6月达高峰,优势蝇种家蝇、厩腐蝇、麻蝇的消长趋势与蝇类总密度趋势相似。结论根据河南省人居及周边环境蝇类构成及季节消长,建议各监测点区(县)根据监测结果采取合理的防控措施,减少蝇类骚扰和蝇传疾病的发生。

灵芝转录因子AreA的生物学功能

AreA作为丝状真菌氮代谢中的关键转录因子,在真菌响应外界氮源、生长发育、次级代谢及抗逆过程中发挥了重要作用。本研究通过生物信息学比对分析,获得了灵芝AreA的全长序列,研究了AreA对菌丝生长、抵御细胞壁胁迫以及次级代谢的影响,AreA编码蛋白的C末端含有保守的GATA型锌指结构域,与其他担子菌中AreA的亲缘关系较近。通过qRT-PCR分析发现,外界氮源浓度的变化能够影响AreA的转录水平。在低氮源浓度条件下,AreA的转录水平显著高于氮源丰富的条件。利用前期构建的AreA沉默转化子研究发现,沉默AreA后菌株生长速率显著低于野生菌株,约下降70%;且AreA沉默菌株菌丝比野生菌株蓬松。细胞壁的组成成分检测发现,AreA沉默菌株的葡聚糖和几丁质含量比野生菌株(WT)和转入空载沉默质粒的菌株(CK)分别下降约65%和40%–60%。随后检测了对细胞壁胁迫的耐受性,结果发现AreA沉默转化子对刚果红和SDS极为敏感,几乎不能生长。在AreA沉默菌株中,灵芝三萜的含量相比于对照菌株下降了约23%。研究结果表明灵芝AreA能够响应环境中的氮源浓度,并且在灵芝的生长发育、次级代谢以及抵御细胞壁胁迫中发挥了重要作用。