2010—2011年河南省部分地区H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行病学调查

为了解河南省H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行情况。从河南省15个地市发病鸡场采集病鸡组织样品309份,采用鸡胚尿囊腔传代接种法分离病毒,并利用血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)和RT-PCR试验对分离毒株进行鉴定。结果表明:3类病毒的总检出率为26.54%,其中NDV、IBV和AIV(H9)的检出率分别为11.00%、3.88%和11.65%。2010年10月NDV和IBV检出率均最高,分别为30.00%、15.00%,2011年1月AIV(H9)检出率最高,为43.24%。2类病毒混合感染的检出率达3.24%。表明2010年7月—2011年4月H9亚型禽流感、新城疫以及鸡传染性支气管炎在河南省部分地区普遍流行,且存在一定程度的混合感染。为有效预防和控制河南省3种主要疫病提供了科学依据。

鸡α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ基因的克隆和真核表达载体的构建

试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3GALⅠ基因的完整ORF区,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,进行PCR、限制性酶切和DNA序列分析鉴定。结果表明,ST3GALⅠ基因全长1029bp,测序结果同GenBank数据库收录的序列一致,无任何密码子缺失与突变,插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上的目的基因大小方向均正确。本研究成功构建了pcDNA3.1(+)-ST3GALⅠ真核表达载体,为下一步的真核表达及对ST3GALⅠ基因的功能研究奠定了基础。

一种宽频率调谐范围的前馈型VCO设计

为满足SerDes(SERializer/DESerializer)接收端相位插值型时钟数据恢复电路(CDR)对正交多相时钟的要求,采用22 nm CMOS工艺,设计了一种具有宽频率调谐范围,可产生12相时钟的前馈型环形压控振荡器(VCO)。电路包括频率调节电路和前馈型VCO电路两个部分。频率调节电路采用粗细调结构增大了振荡器调谐范围,实现了频率的精确调节;前馈型VCO通过辅助前馈通路形成5级环形振荡器,提高了振荡频率,产生的12相正交时钟也提高了插值线性度。仿真验证结果表明:所设计的VCO输出频率范围为2.21~11.23 GHz,8 GHz频率下振荡器的相位噪声为-93.1 dBc/Hz@1 MHz,-114.05 dBc/Hz@10MHz,功耗为5.18 mW。

新城疫病毒HN09-69株P基因的克隆、序列分析及表达

【目的】对新城疫病毒(NDV)HN09-69株P基因进行克隆、序列分析和表达鉴定,为研究P和V蛋白的功能,及NDV新流行毒株的免疫预防提供理论依据。【方法】以HN09-69株NDV为研究对象,根据GenBank上发布的相关P基因参考序列设计引物,进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定分析,将P基因的核苷酸序列与相关参考株的P基因序列进行比对分析并构建进化树。将P基因克隆到原核表达载体PET28a(+)中,得到重组质粒rPET28a(+)-P,将重组表达质粒转化到BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE电泳和Western blotting检测表达情况。【结果】扩增出了HN09-69株P基因的ORF,序列长度为1 188bp。NDV HN09-69株核苷酸与弱毒株La Sota、clone-30同源性分别为82.5%和82.4%,与强毒株F48E8同源性为84.9%,与鸭源,鹅源NDV核苷酸同源性分别为97.9%～98.4%和96.0%～98.0%。SDS-PAGE电泳和Western blotting检测结果表明,重组P蛋白分子质量约为54ku,符合预期结果,在大肠杆菌中主要以可溶性的形式表达。【结论】NDV HN09-69株与SDWF-02和SD-09鸭源强毒分离株同源性高,亲缘关系近。重组P蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。

传染性法氏囊病病毒 PY05 株的分离鉴定

为了分离到鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)病毒,从河南省濮阳地区某疑似感染鸡法氏囊病病毒的鸡场采集病料,用SPF鸡胚对病毒进行分离培养,通过琼脂扩散试验和RT-PCR扩增VP4片段对其进行鉴定。结果显示该毒株能引起鸡胚规律性死亡,且出现CAM增厚、鸡胚出血等明显病变;待检抗原、标准阳性血清之间出现阳性沉淀线;琼脂电泳得到大小约为1200bp片段,与预期结果相符。结果证明该分离株为IBDV地方株,并命名为PY05株。

抗感败毒口服液对靶动物鸡的安全性试验

为了评价抗感败毒口服液对靶动物鸡的安全性,试验选取80只雏鸡,随机分为4组,每组20只。设置抗感败毒口服液推荐剂量的1倍、3倍和5倍剂量组(1、3、5m L/L),连续饮水给药30d,对照组饮水不添加药物。试验期间每天观察并记录各组鸡的临床体征。试验结束后采集血液和组织器官,测定血液生理指标、血清生化指标和脏器指数的变化,并进行病理组织学观察。结果表明,抗感败毒口服液各剂量组鸡只的生长发育、血液生理、血液生化和脏器指数等指标与对照组相比差异均不显著,各组织器官未见明显的病理组织学变化。试验结果说明,抗感败毒口服液按推荐剂量(1m L/L)饮水给药对靶动物鸡是安全的。

壳聚糖吸附澄清工艺在清瘟解毒口服液中的应用研究

清瘟解毒口服液为兽药质量标准(中药卷)2017年版中收载的中药品种,由地黄、栀子、黄芩、连翘、玄参、板蓝根6味药材组成的复方制剂,是近几年在家禽疾病防控中最常用的中药复方制剂之一,其功效为清热解毒,主治鸡外感发热。其标准中制备方法为:“以上6味,加水煎煮两次,合并煎液,静置,滤过,浓缩,滤过,加适量苯甲酸钠,加水至1000 ml,罐装,灭菌,即得。”

国家四类新兽药磺胺氯吡嗪钠甲氧苄啶可溶性粉

一、研究背景鸡球虫病是鸡常见的由一种或多种球虫引起急性流行性寄生虫病,病原为原虫中的艾美耳科艾美耳属的球虫,目前世界公认的有7种,不同种的球虫在鸡消化道内寄生的部位不同,其致病力也不相同,其中危害最严重的为柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫,前者寄生于鸡的盲肠,后者寄生于小肠粘膜中。

管碟法测定阿莫西林硫酸黏菌可溶性粉中黏菌素含量的研究

采用管碟法,以大肠埃希菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅵ号为试验用培养基,建立阿莫西林硫酸黏菌素可溶性粉中黏菌素含量测定方法。结果表明,黏菌素浓度在512~2443 U/ml范围内,其浓度对数值与抑菌圈直径具有良好的线性关系,相关系数为0.999。精密度试验结果RSD分别为0.18%和0.32%。重复性试验结果RSD为0.42%。稳定性试验结果RSD为0.76%。平均加样回收率为99.29%。建立测定阿莫西林硫酸黏菌素可溶性粉中黏菌素含量的方法重现性好、准确度高。

鱼腥草苓蓝口服液对靶动物鸡的安全性试验

为了评价鱼腥草苓蓝口服液对靶动物鸡的安全性,试验选取20日龄健康麻鸡120只,随机分为4组,每组30只。设置鱼腥草苓蓝口服液推荐剂量的1倍、3倍和5倍剂量组(1 mL/L-3 mL/L、5 mL/L),连续饮水给药7天,对照组饮水不添加药物。试验期间每天观察并记录各组鸡的临床体征。试验结束后采集血液和组织器官,测定血液生理指标、血清生化指标和脏器指数的变化,并进行病理组织学观察。结果表明,鱼腥草苓蓝口服液各剂量组鸡的精神状态、生长发育、血液生理、血液生化和脏器指数等指标与对照组相比差异均不显著,各组织器官未见明显的病理组织学变化。该试验结果说明,鱼腥草苓蓝口服液按推荐剂量(1 mL/L)饮水给药对靶动物鸡是安全的。

高效抗球虫药磺胺氯吡嗪钠甲氧苄啶可溶性粉的制备工艺及抗球虫效果研究

鸡球虫病是鸡常见的由一种或多种球虫引起的急性流行性寄生虫病,在田间广泛存在,严重危害家禽养殖业的发展[1-2]。磺胺氯吡嗪钠是一种广谱抗菌、抗球虫药,在动物体内具有吸收快、分布广、维持时间长且不影响宿主对球虫的免疫力等特点,被广泛应用于鸡球虫病的治疗。