斑点金免疫渗滤法检测鼠疫菌的方法研究

目的 建立一种简便、快速的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)用于鼠疫菌的快速诊断。方法 用柠檬酸钠还原法制备 10nm的胶体金标记鼠疫多价抗体 ,制备成鼠疫抗体金探针。结果 鼠疫胶体金渗滤法对鼠疫FI抗原的最低检出限为 10ng/ml;对EV76的最低检出限为 2 .4× 10 5cfu ;除 4株鼠疫菌外 ,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森菌等其他细菌发生交叉免疫反应 ;整个反应过程在 10min内完成。结论 该方法简便、快速、特异、敏感 ,不需任何特殊仪器设备 ,适合于现场鼠疫监测。

斑点金-薄层色谱法检测鼠疫耶尔森氏菌的实验研究

目的建立一种简便、快速的斑点金-薄层色谱法(DIGFA-TLC)用于鼠疫耶尔森氏菌的快速定量诊断。方法用柠檬酸钠还原法制备10 nm的胶体金标记鼠疫耶尔森氏菌多价抗体,制备成鼠疫抗体金探针,通过薄层色谱扫描对样品斑点进行定量测定。结果斑点金-薄层色谱法对鼠疫FI抗原的最低检出限为5 ng;对EV76的最低检出限为1.2×105cfu;且二者呈高度的正相关关系,前者相关直线方程为y=448.467 37+2.511 43x,后者相关直线方程为y=375.760 88+4.112 31×10-4x;整个反应过程在10 min内完成。结论该方法简便、快速、特异、敏感,可以实现鼠疫耶尔森氏菌的定量监测。

鼠疫菌EV_(76)对达乌尔黄鼠血气的影响

目的 研究鼠疫菌ＥＶ７６对达乌尔黄鼠血气各项指标的影响。方法 用２亿个ＥＶ７５６菌株加０．２５％的硫酸亚铁攻击实验动物８只；设正常对照一组８只。两组动物饲养观察２～７ｄ后分别取动脉血进行血气测试。结果 免疫组动脉血ｐＨ值极显著低于正常组（Ｐ＜ ０．０１）； Ｐｃｏ２显著低于正常组（Ｐ＜０．０５）；Ｐｏ２极显著低于正常组（Ｐ＜０．０１）；Ｋ＋显著高于正常组（Ｐ＜０．０５）。结论 鼠疫菌ＥＶ７６对生物机体血气各项指标影响显著。

鼠疫菌PCR检测方法的研究

本文采用聚合酶链反应(PCR)技术,通过扩增鼠疫菌9.5kb质粒pla基因上一个456bp片段,用于鼠疫菌的快速诊断。对4株鼠疫菌参考株PCR扩增后,琼脂糖凝胶电泳分析均呈现单—DNA扩增区带,其分子量大小与预期结果相符。对13株非鼠疫菌参考株作平行实验,PCR扩增后未见扩增区带。其检测的敏感性为10个cfu。全部实验可在4h内完成。对鼠疫菌的快速诊断和分子流行病学调查具有重要意义。

PCR检测动物鼠疫方法的应用研究

应用聚合酶链反应(PCR)检查感染鼠疫的动物脏器标本并与细菌分离培养进行比较。在31份肝组织标本中PCR阳性11份(35.5％),细菌培养阳性9份(29.0％);31份脾组织标本中PCR阳性25份(80.7％),细菌培养阳性21份(67.7％)。对照组中,以假结核菌感染的小白鼠和未经感染的小白鼠脏器标本PCR全部阴性。结果表明,PCR法优于传统的细菌分离培养,具有快速、特异性强、敏感性高和不受杂菌污染影响等优点。适用于鼠疫自然疫源地动物鼠疫的监测。

聚合酶链反应在我国各生态型鼠疫菌检测中的应用

应用聚合酶链反应(PCR)对我国各生态型鼠疫菌进行检测,结果被试的37株鼠疫菌扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析均呈现单—DNA带,其分子量大小与预期结果相符合。而假结核菌、结肠炎菌等均未见扩增带。10cfu即可产生阳性反应,仅耗时4h。表明本法快速、特异、敏感,可用于各生态型鼠疫菌的快速诊断。

应用PCR技术检测一例肺鼠疫患者的结果

聚合酶链反应(PCR)作为非培养诊断技术,是近年来鼠疫快速诊断一项重大突破。它是以分析鼠疫菌的遗传物质—DNA而达到特异、敏感、快速地检测和鉴定鼠疫菌的目的。本文应用PCR技术对一例经抗生素治疗后,细菌学检查阴性的肺鼠疫患者痰液进行检测,结果如下。1

吉林西北部草原鼠疫菌质粒及酶切图谱的研究

为探讨吉林西北部草原鼠疫菌分子生物学性状，本研究测试了该地区３０株鼠疫菌携带的质粒种类和质粒ＤＮＡ酶切图谱。结果显示该地区鼠疫菌携带３种规范的质粒，即６５Ｍａｌ、４５Ｍｄａｌ和６Ｍｄａｌ质粒，质粒ＤＮＡ ＥｃｏＲＩ酶切图谱可切成１６个片段。

微波消解-电感耦合等离子体质谱法同时检测配方乳粉中14种元素

目的建立微波消解-电感耦合等离子体质谱法同时检测配方乳粉中钠、钾、铜、镁、铁、锌、锰、钙、磷、碘、铅、铬、镉和砷14种元素的检测方法。方法样品经微波消解、赶酸、定容后,应用电感耦合等离子体质谱仪进行14种元素定量检测。结果对样品消解程序及仪器条件进行优化,并进行方法学实验。方法的检出限0.01μg/L^1.94μg/L,回收率89.8%~106.2%,相对标准偏差为0.96%~4.57%。采用该方法检测国家一级标准物质GBW 10017乳粉,其检测结果均在标准值范围内,且碘、磷2种元素的检测结果也分别与国家标准方法检测结果相一致。结论该方法检测配方乳粉中14种元素简单、快速,且具有较高的精密度和准确度。

食品接触油墨中16种多环芳烃的测定

目的建立食品接触油墨中16种多环芳烃(PAHs)的测定方法。方法样品经超声提取、硅胶柱净化、浓缩处理,用气相色谱/质谱仪测定16种PAHs含量,外标法定量。结果该法优化了16种PAHs类物质的分离测定条件,回收率为82.8%～107.2%,相对标准偏差为2.4%～11.2%,线性范围为8～10000ng/mL。结论该方法能同时分离16种PAHs,灵敏度高、精密度好,适用于油墨中多环芳烃的分离测定。

吉林西北部草原鼠疫菌染色体PCR指纹图谱分析

本文通过ＰＣＲ指纹图谱，分析了吉林西部草原鼠疫菌染色体ＮＤＡ特征，结果显示该地区鼠疫菌染色体可产生８条非常明显的扩增区带，其他对照的菌株只产生６条扩增区带。分析认为这种差别可能是该地菌株的一特征。

鼠疫菌分子生物学研究现状

1 鼠疫菌质粒的研究1.1 鼠疫菌携带质粒的种类 Ferber等研究了10株鼠疫弱毒苗和1株强毒菌,报道了鼠疫菌携带6、45和65Mdal三种质粒。Ben—Gurion等报道了12.5、44.5和61Mdal的鼠疫菌质粒。Portnoy等则报道了6、47和65Mdal的鼠疫 菌质粒。冢野寻子用电镜观察到了1、7、13、23和45Mdal质粒。 我国任士明首先报道了鼠疫弱毒菌株携带三种质粒,分子量分别为6、45和65Mdal。

休哈特控制图在检测结果质量控制中的应用

目的建立一种运用休哈特控制图对实验室检测过程进行质量控制的方法。方法通过对影响检测过程的5M1E因素分析,利用控制图技术对检测数据分析,剔除异常,采取纠正措施,建立处于统计稳态和技术稳态的控制用控制图。结果通过对检测实验室某一产品质量指标检测数据分析,得到了处于稳态的控制图。结论休哈特控制图可以用于检测实验室的质量控制。

吉林省西北草原鼠疫自然疫源地调查与分析

本部场区属于中国松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地的一部分,疫源地面积为2256km^2,地处北纬45°43′～45°20′,东径122°24′～122°58′,位于吉林、内蒙古、黑龙江三省(区)交界处,驻地毗邻9个县(市、旗)历史上曾发生鼠疫病人5560人,死亡4473人,自1957年后未发生人间鼠疫,驻地1955～1961年鼠间鼠疫流行,1978年又从草原深处分离出2株鼠疫菌,1979年以来未发现鼠疫动物病。

膜片电极支撑双层脂膜的构建和寡核苷酸探针的固定

目的对双层脂膜（Bilayer lipid membranes，BLMs）在膜片电极上的构建和十二烷基修饰的寡核苷酸（Oligonucleotide）探针在BLMs上的固定技术进行研究。方法利用膜片钳放大器系统对细胞膜上离子通道跨膜电流变化极其灵敏的特点，构建一种新型BLMs。调节膜片钳放大器。施加一系列电压后对不同浓度的寡核苷酸探针在BLMs上进行固定。结果双层脂膜在膜片电极上稳定构建，成膜完全稳定之后，拟合直线方程为：I（pA）=7．2153＋0．0054V（mV），r=0．9908（P〈0．01），由短杆菌肽法确认了膜的形成。寡核苷酸探针质量浓度在0～273．65ng·mL^-1范围变化时，与跨膜电流呈线性关系，拟合直线方程为：I（pA）：5．4853＋2．9382C（ng·mL^-1），r=0．9962。施加0～180mV阶跃电压于固定有寡核苷酸探针的BINs上，拟合直线方程为：I（pA）=9．3954＋15．2364V（mV），r=0．9977（P〈0．01）。结论膜片电极支撑双层脂膜成功构建并确证，寡核苷酸探针可以在膜片电极支撑双层脂膜上固定，对施加于膜上的一系列电压响应迅速，灵敏度高，稳定性和重复性良好，为构建以膜片电极支撑BLMs的生物传感器监测环境污染物奠定了良好的基础。

中国白城兵器试验中心场区鼠疫菌生物学性状的研究

为研究探讨吉林西部草原鼠疫菌生物学性状，本研究对该地区３０株鼠疫菌的生化性状、质粒种类及质粒ＤＮＡ酶切图谱、染色体ＰＣＲ指纹图谱和外膜蛋白种类进行了测试。通过系统研究，证实该地区鼠疫菌生化结果为，分解葡萄糖、麦芽糖和甘油，不分解乳糖、蔗糖、山梨醇、鼠李糖、密二糖和尿素，硝酸盐还原（脱氧）试验阳性，靛基质试验阳住，Ｖ－Ｐ试验阴性，Ｍ－Ｒ试验阳性；试验全部菌株都具有规范的质粒图谱，携带的质粒种类为，６５Ｍｄａｌ、４５Ｍｄａｌ、６Ｍｄａｌ３种；被试菌株的质粒单纯用ＥｃｏＲＩ酶切，可切成１６个片段；鼠疫菌染色体ＰＣＲ指纹图谱分析，吉林西部草原场区鼠疫菌的染色体可产生８条主要ＤＮＡ带；可产生１５条外膜蛋白带。

天津市即食食品微生物污染情况调查分析

目的了解天津市即食食品微生物污染状况,为天津市食品安全监管部门采取针对性的监管措施提供科学依据。方法采用随机抽样的方法,采集天津市16个区六类764份即食食品样本并进行检测,采样地点包括了市场、学校及街头的小食商铺、餐饮单位,其中盒饭142份、炒菜117份、凉拌菜231份、生食水产品230份、熟制米面制品40份、焙烤及油炸食品4份。依据食品安全国家标准GB4789《食品微生物学检验》与《国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》实行检测与评价,并对检测结果进行统计分析。结果764份样品中检出食源性致病菌共19份,检出率为2.49%,其中金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌检出率均为0.13%,阪崎肠杆菌检出率为0.52%,铜绿假单胞菌检出率为0.65%,变形杆菌检出率为1.05%。结论天津市2018年即食食品中微生物合格率较低,对消费者的健康存在一定的安全隐患,有针对性防控微生物污染,是保障食品安全,防止食源性疾病暴发的重要措施。