基于网络药理学与动物实验探究八味沉香散对阿霉素心脏损伤的保护作用及机制

目的基于网络药理学与动物实验探究八味沉香散对阿霉素心脏损伤的保护作用及机制。方法应用网络药理学与动物实验学方法开展研究。借助TCMSP数据库筛选八味沉香散入血成分及靶点;利用OMIM、GeneCards等数据库检索疾病靶点;取交集靶点构建PPI网络。做GO以及KEGG富集分析,并构建“入血成分-关键靶点-作用通路-关键疾病”网络。建立阿霉素心脏损伤大鼠模型。测心电图以及大鼠左心功能;检测血清ALT、AST、LDH、CK-MB含量;检测心肌组织PI3K/AKT信号通路及凋亡相关蛋白表达情况;观察心肌超微结构。结果筛选八味沉香散入血靶点1897个、阿霉素心脏损伤靶点1598个,得到八味沉香散与阿霉素心脏损伤交集靶点198个。筛选AKT1、STAT3、EGFR、SRC、BCL2、TNF、MAPK1、MAPK3、ESR1、CASP3等为关键靶点。通过GO与KEGG分析进一步发现,PI3K/AKT可能为八味沉香散改善阿霉素心脏损伤的重要信号通路。检测结果显示,八味沉香散可改善阿霉素心脏损伤大鼠左心功能,降低血清ALT、AST、LDH、CK-MB含量;上调大鼠心肌组织PI3K、AKT、BCL2蛋白,下调BAX、CASP3蛋白;改善心肌超微结构。结论八味沉香散可有效改善阿霉素心脏损伤大鼠的心脏功能,其可能作用机制为,调节PI3K/AKT信号通路,抑制细胞凋亡。

基于网络药理学从线粒体自噬途径探讨八味沉香散抗缺血性心脏病的作用机制

目的基于网络药理学结合分子对接技术及细胞实验验证,探讨八味沉香散经线粒体自噬途径抗缺血性心脏病(ischemic heart disease,IHD)的潜在机制。方法利用Swiss target prediction平台预测八味沉香散入血成分靶点;从GeneCards、NCBI、OMIM数据库中筛选缺血性心脏病、线粒体自噬相关靶点;取三者交集得到八味沉香散经线粒体自噬途径抗缺血性心脏病的潜在靶点。构建“成分-疾病-潜在靶点”网络及蛋白质相互作用网络,分别进行网络分析筛选出关键活性成分和核心靶点,并进行分子对接。利用DAVID数据库进行GO富集及KEGG富集分析。构建H9C2细胞缺氧模型,考察八味沉香散含药血清对H9C2细胞存活率、自噬水平及关键通路相关蛋白表达的影响。结果筛选得到八味沉香散经线粒体自噬途径抗IHD的关键活性成分9种,核心靶点8个;分子对接结果显示关键活性物质和核心靶点均有较好的结合活性。KEGG结果显示八味沉香散经线粒体自噬途径抗IHD的作用可能与EGFR、PI3K-Akt、MAPK、FoxO等信号通路有关。细胞实验结果表明八味沉香散可增加缺氧条件下H9C2细胞的细胞活性,明显降低细胞中LC3、p62的蛋白相对表达量,升高p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的蛋白相对表达量。结论八味沉香散可能通过槲皮素、山奈酚、柚皮素、去氢二异丁香酚等活性成分作用于AKT1、STAT3、MAPK3,EGFR等多个靶点调控线粒体自噬发挥抗缺血性心脏病的作用,其具体机制可能与PI3K-AKT信号通路相关。

八味沉香散含药血清对H9c2细胞氧糖剥夺损伤的保护机制研究

目的研究八味沉香散含药血清对H9c2细胞氧糖剥夺损伤的保护机制。方法将H9c2细胞分为空白组、模型组和八味沉香散低、中、高剂量组(含药血清剂量依次为2.5、8、12 g/kg)。体外培养H9c2细胞并建立氧糖剥夺损伤模型,含药血清干预后检测细胞存活率,观察细胞形态,检测生化指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、呼吸链复合酶Ⅰ(ComplexⅠ)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平,检测细胞内活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位和细胞凋亡情况,检测氧化应激相关蛋白[Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、NADH氧化还原酶辅酶10(Ndufa10)、硫氧还蛋白(Trx)]、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)和细胞色素C(Cytc)]的表达。结果与空白组比较,模型组细胞形态破损,LDH、CK和MDA水平均显著升高(P<0.01),CAT、ComplexⅠ、SOD、GSH-Px水平和线粒体膜电位均显著降低(P<0.01),细胞内ROS含量和凋亡率均显著升高(P<0.01),氧化应激相关蛋白(Keap1、Nrf2、HO-1、Ndufa10和Trx)和促凋亡相关蛋白(Bax、Caspase-3、Cytc)表达水平均显著升高(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05)。给予八味沉香散含药血清后,细胞形态改善,以上指标大部分显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论八味沉香散含药血清对H9c2细胞氧糖剥夺损伤有较好的保护作用,其机制与降低细胞氧化损伤、抑制细胞凋亡相关。

藏药抗心肌缺血再灌注损伤研究进展

心肌缺血区域及时再灌注是挽救缺血性心脏病患者的有效手段,但由此引发的心肌缺血再灌注损伤(MIRI)严重影响了患者的愈后,如何有效预防和治疗MIRI是目前治疗缺血性心脏病所面临的主要问题。藏药是我国民族医药的重要组成部分,对于心血管疾病的防治有显著疗效优势。通过对藏药在防治MIRI中的应用和作用机制进行综述,以期对藏药在抗MIRI方面的进一步应用和推广提供参考。

藏药八味沉香散血清对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 研究藏药八味沉香散血清对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法 将H9c2心肌细胞置于三气培养箱缺氧处理8 h,然后更换新鲜高糖培养基做常规培养(4h),建立缺氧/复氧模型;将实验组分为空白组,缺氧/复氧模型组,八味沉香散血清低、中、高剂量组及复方丹参片(阳性对照)组,空白组及模型组加入空白血清,含药组加入含药血清,进行缺氧/复氧干预,待干预结束后,在倒置显微镜下观察细胞生长及形态变化;用CCK-8法检测细胞存活率;用微板法和ELISA法分别检测缺氧8 h和复氧4 h后细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)活性。结果 与模型组相比,含药血清低、中、高剂量组镜下心肌细胞形态相对完整;与模型组相比,含药血清低、中、高剂量组细胞存活率均显著升高(P<0.05)。与空白组相比,缺氧8 h及复氧4 h后模型组上清液中LDH、CK的活性显著升高(P<0.05);与模型组相比,含药血清中剂量组LDH显著降低(P<0.05),含药血清中、高剂量组CK显著降低(P<0.05)。结论 藏药八味沉香散血清对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有一定的保护作用。

中药及其复方抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究进展

早期再灌注是挽救缺血性心脏病的有效方式。但与之矛盾的是,缺血区域血运重建可能引起心肌缺血再灌注损伤(MIRI),导致更严重的心肌损伤。这不仅增加了患者的身体负担,甚至可能造成危及生命的严重后果。中药作为我国的传统药物,在MIRI预防和治疗中得到了广泛应用。随着对中药认识的逐渐深入,中药治疗MIRI的作用机制也被逐渐揭示,这不仅为中药治疗MIRI提供了理论保障,也为进一步阐明MIRI的发病机制提供了参考。基于此,本文对近年来中药治疗MIRI的研究进展进行了综述,期望对中药在MIRI预防治疗领域的应用提供参考。

高效液相色谱法测定当归芍药散不同极性部位中阿魏酸和芍药苷的含量

目的建立当归芍药散不同极性部位中阿魏酸和芍药苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定当归芍药散不同极性部位中阿魏酸和芍药苷的含量,色谱柱为Kromasil 100-5-C18柱(4.6 mm×250.0 mm),流动相为甲醇∶0.2%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1 mL/min,阿魏酸、芍药苷的检测波长分别为320,230 nm,进样量10μL,柱温30℃。结果阿魏酸和芍药苷的回归方程分别为Y=3.53×10~4X-4.83×10~2(r=0.999 0),Y=1.50×10~4X-2.51×10~4(r=0.999 9),线性范围分别为6.076～303.800μg/mL和7.448～372.400μg/mL;方法学考察中精密度、稳定性和重复性均符合要求,加样回收率的RSD分别为1.2%和1.1%。含量测定结果显示,除醇提物的水相部分未检出阿魏酸外,其他部分中均存在阿魏酸和芍药苷,且水煎液中阿魏酸、芍药苷含量均最高。结论该法简便、准确、分离效果好,可用于当归芍药散不同极性部位中阿魏酸、芍药苷的含量测定。