半自动化结核杆菌扫描仪与萋-尼法人工镜检对分枝杆菌的诊断价值

目的评估半自动化结核杆菌扫描仪与萋-尼法人工镜检对分枝杆菌的诊断价值。方法选择疑似肺结核患者225例,收集其痰标本共225份,进行萋-尼染色法人工镜检、半自动化结核杆菌扫描仪镜检,以罗氏培养法为金标准,比较两种检测方法的检测时间及诊断效能。结果检测时间仪器镜检组为(2.0±0.0)分钟,人工镜检为(4.8±0.8)分钟,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。以罗氏培养法检测结果为诊断结核病的金标准,仪器镜检与人工镜检的敏感度分别为55.31%(26/47)和42.55%(20/47),特异度分别为95.51%(170/178)和99.44%(177/178),尤登指数分别为0.51和0.42。结论半自动化结核杆菌扫描仪镜检较人工镜检检测时间短、诊断效能高,在结核病实验室有很好的应用前景。

BS-400全自动分枝杆菌液体培养系统对分枝杆菌培养的效果评价

目的:评价BS-400全自动分枝杆菌液体培养系统(简称“BS-400培养系统”)在临床标本中培养分枝杆菌的效果。方法:搜集2022年3—5月在浙江大学附属杭州市胸科医院就诊的疑似结核病患者标本427份用于本研究,标本包括除血液和粪便外的331份呼吸道标本(包括痰液和呼吸道灌洗液)和96份非呼吸道标本(包括脑脊液、组织、分泌物、尿液、骨髓和坏死物等)。所有标本同时使用BACTEC MGIT 960液体培养系统(简称“MGIT 960培养系统”)和BS-400培养系统进行培养,培养阳性标本进行细菌分离和菌种鉴定。比较两种培养系统对不同类型标本分枝杆菌培养阳性率、检测时间、污染率及成本差异,并以MGIT 960培养系统培养结果为参照标准,评价BS-400培养系统对不同类型标本分枝杆菌感染的检测效能。结果:BS-400培养系统对呼吸道标本的培养阳性率为32.02%(106/331),污染率为5.14%(17/331);对非呼吸道标本的培养阳性率为17.70%(17/96),污染率为1.04%(1/96),与MGIT 960培养系统[分别为32.93%(109/331)和5.44%(18/331),15.63%(15/96)和2.08%(2/96)]相比,差异均无统计学意义(χ^(2)值分别为0.062、0.030、0.150、0.339,P值分别为0.803、0.862、0.699、1.000)。BS-400培养系统检测时间为12.31(7.89,19.56)d,MGIT 960培养系统检测时间为9.79(7.00,16.58)d,差异无统计学意义(Z=-1.895,P=0.058)。以MGIT 960培养系统培养结果为参照标准,BS-400培养系统检测呼吸道标本分枝杆菌感染的敏感度为93.58%(102/109)、特异度为98.20%(218/222),Kappa值为0.924;检测非呼吸道标本分枝杆菌感染的敏感度为100.00(15/15)、特异度为97.53%(79/81),Kappa值为0.925。BS-400培养系统检测成本[(55±10)元/份]约为MGIT 960培养系统检测成本[(75±10)元/份]的70%。结论:BS-400培养系统对疑似结核病患者临床标本中分枝杆菌的检测效能较高,具有较好的应用价值。

2014-2018年杭州市肺结核患者的耐药情况及其影响因素分析

目的分析2014—2018年杭州市肺结核患者对一线抗结核药品的耐药特征及其影响因素,为杭州市防治耐药结核病提供科学依据。方法收集2014—2018年浙江省中西医结合医院结核病诊疗中心就诊的杭州市全部常住人口中的活动性肺结核患者,共12 851例,纳入结核分枝杆菌培养阳性且对一线抗结核药品药物敏感性试验(简称"药敏试验")信息全面的3807例患者。通过国家结核病信息管理系统和结核病实验室信息系统(laboratory information system,LIS)收集所有患者的性别、年龄、户籍、职业、治疗分类(初治和复治)、肺部有无空洞、患者来源及现居住地、结核分枝杆菌培养及药敏试验结果。运用单因素和多因素非条件logistic回归分析的方法研究杭州市耐药肺结核患者耐药特征及其影响因素。结果 3807株菌株中,907株(23.82%)对4种一线抗结核药品耐药,耐药顺位依次为异烟肼(18.57%,707例)、链霉素(18.41%,701例)、利福平(12.03%,458例)、乙胺丁醇(6.41%,244例);所有患者的耐多药率和多耐药率分别为11.11%(423/3807)和4.44%(169/3807)。2014—2018年不同年份肺结核患者耐药率分别为22.87%(185/809)、25.55%(198/775)、25.60%(181/707)、23.04%(188/816)、22.14%(155/700),差异无统计学意义(χ_(趋势)^(2)=4.275,P=0.370);耐多药率分别为11.12%(90/809)、13.16%(102/775)、11.88%(84/707)、11.40%(93/816)、7.71%(54/700),差异有统计学意义(χ_(趋势)^(2)=11.276,P=0.024)。多因素条件logistic回归分析显示,相对于男性和初治患者,女性和复治肺结核患者是发生耐药的危险因素[OR(95%CI)=1.308(1.111~1.540);OR(95%CI)=4.281(3.498~5.238)];相对于下沙区,居住在其他6个区的结核病患者发生耐药的可能性较大,萧山区和富阳区的风险更高[OR(95%CI)=4.400(2.559~7.565);OR(95%CI)=3.803(2.037~7.098)]。相对于男性、<40岁、初治患者,女性、≥40岁、复治的肺结核患者是产生耐多药的危险因素[OR(95%CI)=1.724(1.364~2.178);40~岁组:OR(95%CI)=3.418(1.599~7.305);60~岁组:OR(95%CI)=3.885(1.832~8.239);复治:OR(95%CI)=7.645(5.984~9.766)]。结论杭州市应该加强年龄≥40岁、复治、女性、居住在萧山地区、富阳区耐药结核病患者的管理和治疗,是降低杭州市耐药及耐多药结核病产生和传播的关键。

结核抗体lgG/lgM检测在肺结核和肺外结核中的诊断价值

目的探讨异种血清抗体检测技术在结核病诊断中的应用价值。方法采用IgG/IgM抗体试剂盒分别检测102例结核病患者(包括73例肺结核和29例肺外结核)、223例其他肺部疾病患者和100例对照者结核感染情况,以临床诊断为标准评价该方法的敏感度和特异性,同时分别与痰菌培养及痰涂片平行检验的结果作比较,统计学分析采用χ2检验。结果结核抗体IgG/IgM检测结核病患者的敏感度为74.51%、特异度为91.64%。结核抗体IgG/IgM检测肺结核和肺外结核的敏感度分别为82.19%、55.17%,肺内和肺外结核的敏感度差异有统计学意义(P<0.05),结核抗体lgG/IgM检测结核患者阳性检出率明显高于痰培养法和痰涂片法(P<0.05)。102例结核病患者年龄段分组分析,少年组和老年组检出率分别为58.33%、36%,远低于青年组和中年组的96.15%和89.74%。不同年龄组间进行卡方比较分析显示,P<0.05,差异有统计学意义。425例标本中,共发现8例非结核分枝杆菌,其中6例胞内分枝杆菌,2例脓肿分枝杆菌,lgG/lgM抗体检测均为阴性。结论 IgG/IgM血清抗体检测肺内、外结核具有快速方便、经济和较高的敏感度,适合用于临床结核筛查。

2010—2011年杭州市636例肺结核患者耐药情况分析

目前，结核病已经成为世界性的公共卫生问题，引起国际社会的极大关注。2007—2008年我国开展了全国结核病耐药基线调查，调查结果显示肺结核患者耐多药率为8．32％，每年新发MDRTB患者12万例，约占全球每年新发耐多药患者总数（51万例）的1／4，居全球第二位[1]。耐药结核病已经成为我国结核病控制面临的重大挑战，如不能及时控制其流行，将严重削弱我国遏制结核病已取得的成效，阻碍我国控制结核病的进程。近年来，杭州市的结核病流行情况在全国一直处于较为平稳的水平，但随着人口流动的增加，耐药结核病的不断蔓延给结核病控制工作带来了新的威胁与挑战。

结核分枝杆菌rHpsX-MPT64融合蛋白的制备与临床应用

目的构建结核分枝杆菌融合基因hpsX-mpt64原核表达系统,建立基于rHpsX-MPT64为包被抗原酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)并对其用于结核患者血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法PCR扩增并克隆结核分枝杆菌hpsX和mpt64基因,以连接引物PCR构建hpsX-mpt64人工融合基因,建立上述目的基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯上述目的重组蛋白,Western Blot检测其免疫性。分别以rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64为包被抗原,建立相应ELISA检测150例健康人群、73例非结核肺部疾病患者和277例活动性肺结核患者血清标本中抗体。结果克隆的hpsX和mpt64及构建的hpsX-mpt64融合基因与GenBank中相关序列相似性为100%。rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64表达量分别为细菌总蛋白的20.3%、28.5%和26.5%,其提纯物电泳后均显示单一条带。基于rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64为包被抗原的ELISA对涂阳患者血清抗体检出率明显高于涂阴患者(P<0.01),检测活动性结核患者血清抗体的敏感性分别为59.2%、61.4%和74.4%,特异性分别为90.6%、83.9%和91.0%,rHpsX-MPT64为包被抗原敏感性明显高于rHpsX和rMPT64抗原(P<0.01)。结论基于rHpsX-MPT64为包被抗原的ELISA有较高的敏感性和特异性,重组融合蛋白为抗原有助于进一步提高检测结核病血清学诊断的敏感性。

环介导等温扩增技术在检测痰标本结核分枝杆菌中的应用

目的评价结核分枝杆菌环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测试剂盒的临床应用效果。方法选取肺结核患者183例(肺结核组)和非肺结核患者120例(对照组)。采用涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP对痰标本进行检测,采用结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测试剂盒(TB-PCR)检测罗氏培养与LAMP结果不符的标本,分析LAMP与罗氏培养的检出率及两者的符合率。结果去除经鉴定为非结核分枝杆菌的10例标本,涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP的阳性检出率分为64.1%(111/173)、64.7%(112/173)、78.6%(136/173)。LAMP与抗酸染色、罗氏培养阳性检出率的差异有统计学意义(P<0.01),抗酸染色与罗氏培养比较差异无统计学意义(P>0.05)。以罗氏培养为金标准,LAMP检测的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.5%(108/122)、82.3%(149/181)、77.1%(108/140)、91.4%(149/163),LAMP检测与罗氏培养的符合率为84.8%(257/303)。结论结核分枝杆菌环介导等温扩增技术的灵敏度和特异度高,具有简单易行、快速准确的特点,在肺结核患者的早期诊断中将发挥重要作用。

不同检验方法用于肺结核早期诊断的价值分析

目的比较不同检验方法在肺结核早期诊断中的应用价值。方法随机抽取150例肺结核患者为肺结核组,另选取同期接受治疗的50例非结核肺疾病患者作为对照组,所有患者均接受痰培养、结核菌素皮肤试验、血清结核抗体检测、γ-干扰素释放试验及结核分枝杆菌基因检测,比较不同检验方法对肺结核的检出情况。结果结核分枝杆菌基因检测对肺结核的检出率明显高于痰培养、结核菌素皮肤试验、血清结核抗体检测及γ-干扰素释放试验(均P<0.05);肺结核组在痰培养、结核菌素皮肤试验、血清结核抗体检测、γ-干扰素释放试验、结核分枝杆菌基因检测方法中的阳性率均高于对照组(均P<0.05);结核分枝杆菌基因检测对肺结核的诊断灵敏度、特异度、准确性均高于痰培养、结核菌素皮肤试验,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论痰培养、结核菌素皮肤试验、血清结核抗体检测、γ-干扰素释放试验、结核分枝杆菌基因检测对肺结核均具有较高的检出率,可用于肺结核的早期诊断中,在肺结核早期诊断时可根据具体情况选择相应的肺结核检测方法,尤其是结核分枝杆菌基因检测,可作为早期肺结核诊断的首选方法。

荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物耐药性的诊断价值

目的 评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物(卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素)耐药性的诊断价值。方法 收集2018年1月~2019年5月在浙江大学医学院附属杭州市胸科医院收治的培养阳性且具有荧光PCR熔解曲线和BACTEC MGIT 960药敏结果的205例资料。以BACTEC MGIT960药敏结果为金标准,评价荧光PCR熔解曲线法对抗结核药物利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物耐药性的诊断价值。结果 荧光PCR熔解曲线法敏感而BACTEC MGIT960药敏耐药的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为1、9、1、1例。荧光PCR熔解曲线法耐药而BACTEC MGIT960药敏敏感的例数,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为2、1、2、0例。两种技术方法的总体符合率,在利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类分别为98.54%、95.12%、98.54%、99.51%。荧光PCR熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是96.96%、98.84%、94.12%、99.42%、0.946,对异烟肼耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是80.43%、99.37%、97.37%、94.61%、0.851,对氟喹诺酮耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是93.33%、98.94%、87.50%、99.47%、0.895,对二线注射类药物耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值分别是85.71%、100.00%、100.00%、99.50%、0.921。结论 荧光PCR熔解曲线法对利福平、异烟肼、氟喹诺酮、二线注射类药物的耐药性有较好的辅助诊断价值,适合临床结核病患者的早期耐药性筛查。

贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌快速培养中的应用

目的评估贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌快速培养中的效果。方法收集浙江大学医学院附属杭州市胸科医院2021年10月-2021年11月疑似结核病患者痰标本共216份。对每份标本分别进行贝索系统和Bactec 960系统快速培养,分析两种方法的阳性检出率、阳性报告时间及污染率。结果贝索系统与Bactec 960系统在结核分枝杆菌的阳性检出率及阳性报告时间上差异均无统计学意义(P>0.05),污染率均为7.41%,在质控要求范围。结论贝索系统较Bactec 960系统操作简单,阳性检出率和阳性报告时间两者一致性较高,污染率均容易控制,故贝索系统是比较理想的结核分枝杆菌快速培养方法,值得临床推广应用。

三种结核分枝杆菌分子检测技术诊断肺结核比较

目的比较SAT-TB、结核/非结核分枝杆菌核酸检测和Xpert MTB/RIF检测三种结核分枝杆菌分子检测技术检测灌洗液标本诊断肺结核的价值。方法选择杭州市红十字会医院2017年9月—2018年6月诊治的疑似肺结核患者1 294例,参照《肺结核诊断和治疗指南规定》,经临床确诊肺结核患者771例,确诊为非肺结核的其他疾病患者523例。所有患者均用纤维支气管镜收集灌洗液标本10～20 m L,均分后进行SAT-TB、结核/非结核分枝杆菌核酸快速检测和Xpert MTB/RIF检测。以临床诊断为"准金标准",用受试者工作特征(ROC)曲线分析,比较三种检测结核分枝杆菌分子检测技术的诊断价值。结果 SAT-TB、结核/非结核分枝杆菌核酸检测和Xpert MTB/RIF检测的灵敏度分别为58.6%、60.3%和63.2%;特异度分别为88.7%、86.6%和82.8%;ROC曲线下面积(AUC)分别为0.737、0.735和0.730,两两比较结果显示,三种分子诊断技术间的AUC值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论三种分子检测灌洗液标本技术临床诊断肺结核效果均较好,三者诊断价值没有差别。

RNA恒温扩增实时检测技术与荧光定量PCR联合检测肺泡灌洗液对痰涂阴性肺结核的快速诊断价值

目的通过采用RNA恒温扩增实时检测技术(FQ-PCR)两种不同类型靶标核酸检测方法联合检测支气管肺泡灌洗液(BALF)标本,评估联合应用对痰涂阴性肺结核的诊断价值。方法采集2014年11月-2016年5月医院收治的疑诊为肺结核并且痰涂片至少3次阴性的1 155例患者灌洗液标本,剔除295例未明确诊断病例,肺结核确诊患者672例纳入肺结核组,其他肺部疾病188例(包括43例非结核分枝杆菌疾病)纳入对照组,以临床诊断为金标准,计算SAT-TB与FQ-PCR联合检测的各类评价指标,并与单一SAT-TB、FQ-PCR、结核分枝杆菌快速培养(Bactec MGIT 960)、抗酸杆菌染色进行比较,绘制受试者工作特征曲线(ROC)进行分析比较。结果以临床诊断为"金标准",分别以AFS、MIGT960、SAT-TB、FQ-PCR、SAT-TB与FQ-PCR联合检测平行试验(单阳)、系列试验(双阳)为检验变量时,ROC曲线下面积(AUC)依次为0.507、0.501、0.670、0.660、0.734、0.658,准确性依次为29.45%、33.64%、58.67%、58.32%、67.40%、49.82%,SAT-TB和FQ-PCR单独检测或者联合检测其诊断价值均有统计学意义(P<0.001);对痰涂阴性肺结核病诊断价值比较,平行试验>SAT-TB>FQ-PCR>系列试验>涂片>MIGT960。结论与细菌学检测方法比较,SAT-TB与FQ-PCR联合检测痰涂阴性肺结核病诊断具有快速、敏感、鉴别结核分枝杆菌(MTB)与非结核分枝杆菌(NTM)等优势,缩短了确诊时间,提高准确率,给痰涂阴性肺结核患者提供一种有效辅助手段,值得临床推广应用。

PCR-荧光探针法和Xpert MTB/RIF检测非呼吸道标本在结核病诊断中的应用价值

目的比较PCR-荧光探针法和Xpert MTB/RIF在组织、脓液等非呼吸道标本中对结核病的诊断价值。方法收集2017年10月至2018年8月在浙江省中西医结合医院疑似结核病患者225例的非呼吸道标本,后经临床确诊结核病177例,非结核病48例。所有标本均行PCR-荧光探针、Xpert MTB/RIF、Bactec MGIT960检测。以临床确诊为金标准,比较PCR-荧光探针、Xpert MTB/RIF、Bactec MGIT960检测结核病的诊断效能。绘制受试者工作曲线(ROC)评估三种方法在结核病诊断中的价值。并对PCR-荧光探针法和Xpert MTB/RIF的一致性进行分析。结果与临床确诊比较,PCR-荧光探针、Xpert MTB/RIF、Bactec MGIT960检测的敏感度分别为53.67%(95/177)、58.76%(104/177)、31.07%(55/177)。PCR-荧光探针和Xpert MTB/RIF的敏感度均高于Bactec MGIT 960培养(χ^2=17.60和27.41,P值均<0.01)。PCR-荧光探针和Xpert MTB/RIF的敏感度相比,差异无统计学意义(χ^2=0.93,P>0.05)。与临床确诊比较,PCR-荧光探针、Xpert MTB/RIF、Bactec MGIT960培养检测的特异度分别为100.00%(48/48)、100.00%(48/48)、97.92%(47/48),三种检测方法的特异度比较,差异无统计学意义(F=1.83,P>0.05)。ROC曲线分析显示,PCR-荧光探针、Xpert MTB/RIF、Bactec MGIT960的ROC曲线下面积分别为0.768、0.794、0.645。PCR-荧光探针、Xpert MTB/RIF对结核病的诊断价值高于Bactec MGIT960(Z=5.19和6.52,P值均<0.01)。Xpert MTB/RIF优于PCR-荧光探针法(Z=2.80,P<0.05)。在各类型标本中,PCR-荧光探针法和Xpert MTB/RIF的结核病检出率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。PCR-荧光探针和Xpert MTB/RIF具有较好的一致性(kappa=0.829)。结论Xpert MTB/RIF在组织、脓液等非呼吸道标本中对结核病的检测效能优于PCR-荧光探针法,但二者具有较好的一致性,PCR-荧光探针法经济实用,易于推广,具有较高的临床应用前景。

三种分子方法检测结核分枝杆菌利福平耐药性的比较

目的评估Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术用于快速筛查利福平耐药结核病的临床价值。方法收集2016年9月3日至2019年8月11日在浙江省中西医结合医院收治的经Bactec MGIT 960液体培养药敏确诊为结核病,且具有Xpert MTB/RIF和基因芯片技术结果的150例患者临床资料,对所有患者分离培养菌株行荧光PCR熔解曲线检测。以Bactec MGIT 960液体培养药敏结果为金标准,分析Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术对利福平耐药结核病的诊断效能。绘制受试者工作曲线(ROC)评估三种方法在利福平耐药结核病诊断中的价值。结果以Bactec MGIT 960药敏结果为金标准,Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术检测利福平耐药的敏感度分别为88.89%(16/18)、94.44%(17/18)、88.89%(16/18),特异度分别为96.21%(127/132)、96.21%(127/132)、95.45%(126/132)。三种检测方法的敏感度和特异度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。三种分子方法检测利福平耐药与Bactec MGIT 960药敏结果的一致性Kappa值分别为0.794、0.827、0.770。ROC曲线分析显示,Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术的ROC曲线下面积分别为0.926、0.953、0.922。三种检测方法对利福平耐药均具有较好的诊断价值(P<0.01),但三种方法比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。三种方法检测利福平耐药与Bactec MGIT 960药敏不一致结果共8例。结论Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术三种分子方法对利福平耐药性检测能力相当,均具有较高的敏感度和特异度,适合快速筛查利福平耐药结核病。

交叉引物扩增技术检测痰样本中结核分枝杆菌的应用价值

目的采用ROC曲线分析法评估交叉引物扩增技术(CPA)直接检测临床痰样本结核分枝杆菌的检测效能,为临床应用提供参考依据。方法选取肺结核患者225例和非肺结核患者82例,采用CPA进行检测,并同时使用涂片抗酸染色、罗氏培养法、荧光定量PCR技术(FQ-PCR)三种最常用的实验室诊断方法作为对照。根据每种方法对样本检测结果的灵敏度和特异度,以受试者工作曲线(ROC)进行分析比较。结果去除非结核分枝杆菌的26个样本,以临床诊断为金标准,涂片抗酸染色、罗氏培养法、FQPCR技术和CPA的灵敏度分别为46.73%(93/199),63.32%(126/199),69.85%(139/199),70.35%(140/199),假阳性率分别为0%(0/82),0%(0/82),1.22%(1/82),1.22%(1/82)。ROC曲线下的面积分别为0.729、0.817、0.841、0.843,均P<0.01。结论 ROC曲线分析结果显示,交叉引物扩增技术诊断结核病具有较好的准确性,该方法可作为结核病的实验室诊断方法。

TB-SAT检测支气管肺泡灌洗液诊断肺结核的价值研究

目的探讨结核分枝杆菌RNA恒温扩增荧光实时检测技术(TB-SAT)在肺结核诊断中的临床价值。方法纳入992例临床确诊肺结核患者和159例非结核病患者,采集患者支气管肺泡灌洗液,使用常规抗酸染色镜检(AFS)、Bactec MIGT960结核分枝杆菌液体培养(MIGT960)和TB-SAT三种方法检测结核分枝杆菌,应用ROC曲线比较三种方法的诊断价值。结果 AFS、MIGT960和TB-SAT三种方法诊断肺结核病时的AUC分别为0.635(95%CI:0.606~0.662)、0.681(95%CI:0.654~0.708)和0.758(95%CI:0.733~0.783),诊断价值由高到低依次为TB-SAT、MIGT960和AFS(均P<0.05);AFS、MIGT960和TB-SAT三种方法的灵敏度分别为26.92%、36.29%和63.00%,特异度分别为100.00%、100.00%和88.68%。结论 TB-SAT具有快速、简便、准确等优点,可作为肺结核辅助诊断的方法。

干扰素体外释放酶联免疫法在结核病诊断中的临床应用

目的探讨干扰素体外释放酶联免疫法(IFN-γrelease assay,IGRA)在结核病诊断中的应用价值。方法采用北京万泰生产的γ-干扰素检测试剂盒分别检测493例结核病患者(包括391例肺结核和102例肺外结核)、108例其他肺部疾病患者和150例健康对照者结核感染情况,并与结核抗体试验(TB-AB)、痰菌培养及痰涂片比较检测的灵敏度和特异性。结果 TB-IGRA检测结核病患者的灵敏度为90.1%(444/493),肺结核和肺外结核的阳性检出率无显著性差异(P>0.05),TB-IGRA检测结核患者阳性检出率明显高于TB-AB试验、痰培养法和痰涂片法(P<0.01)。TB-IGRA方法的特异性为87.6%,与TB-AB方法特异性无显著性差异(P>0.05)。结论 TB-IGRA检测肺内结核、肺外结核具有快速和较高的灵敏度和特异性,值得临床推广应用。

T-SPOT.TB和SAT-TB联合检测诊断涂阴肺结核

目的应用结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)和支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时检测技术(SAT-TB)联合应用检测诊断痰涂阴性肺结核。方法选择2014年11月—2016年5月杭州市红十字会医院收治的疑诊肺结核、痰涂阴性患者进行全血T-SPOT.TB检测,收集BALF样品进行萋尼-抗酸杆菌染色(AFB)、结核分枝杆菌快速培养(MGIT960)和SAT-TB等检测。以临床诊断为金标准,采用ROC曲线分析比较不同检测效果。结果共纳入252例患者,其中肺结核患者197例,非肺结核患者55例。BALF-AFB、MIGT960、SAT-TB、T-SPOT.TB、 T-SPOT.TB和SAT-TB,以及T-SPOT.TB或SAT-TB检测敏感度分别为16.24%、 32.49%、 69.54%、95.43%、65.48%和99.49%;特异度分别为98.18%、90.91%、87.27%、56.36%、98.18%和43.64%;AUC值分别为0.572、 0.617、 0.784、 0.759、 0.818和0.725。其中T-SPOT.TB和SAT-TB阳性预测值为99.23%, T-SPOT.TB或SAT-TB阴性预测值为96.00%。诊断价值从高到低依次为T-SPOT.TB和SAT-TB、T-SPOT.TB或SAT-TB、MIGT960及BALF-AFB (均P<0.05)。结论 T-SPOT.TB联合SAT-TB检测可应用于痰涂阴性肺结核患者的诊断。

Xpert MTB/RIF检测技术在骨关节结核诊断中的应用价值

目的采用核酸扩增检测法(Xpert MTB/RIF)检测骨关节结核患者脓液标本,评价该方法在骨关节结核病诊断中的应用价值。方法收集2014年8月—2015年3月杭州市红十字会医院住院治疗的骨关节结核患者67例及非结核性骨关节患者30例的脓液标本进行Xpert MTB/RIF检测、抗酸染色法和结核分枝杆菌液体培养(TB培养)。以临床(含病理)诊断为金标准,根据3种检测方法的灵敏度和特异度,绘制受试者工作特征曲线(ROC)进行比较分析。结果 67例骨关节结核患者脓液标本,Xpert MTB/RIF、抗酸染色、TB培养3种方法的灵敏度分别为82.09%、8.96%和23.88%,特异度分别为96.67%、100.00%和100.00%;ROC曲线下的面积分别为0.89、0.54和0.62(均P<0.01)。结论 Xpert MTB/RIF比抗酸染色和TB培养的特异度和灵敏度高,且检测耗时短。

新登记肺结核菌阳患者耐药情况分析

目的分析新登记肺结核患者的初始耐药情况，为进一步控制肺结核的发病和流行提供依据。方法对杭州市红十字会医院2012年新登记的活动性肺结核患者进行痰培养获得768株分枝杆菌菌株，对培养阳性菌株进行菌型鉴定并用比例法进行药物敏感性试验。结果2012年非结核分枝杆菌（NTM）分离率为4．42％，结核分枝杆菌（MTB）初始耐药率13．35％，耐多药率4．50％，耐单药率从高到低为INH（8．31％）、RFP（7．22％）、SM（6．40％）和EMB（2．45％）。耐药率随年龄增长呈下降趋势，16岁～组人群初始耐药率明显高于61岁及以上年龄组。结论青壮年肺结核患者初始耐药率高，应加强对重点人群的管理及随访。