我国食品安全的现状及对策

文章论述了我国食品安全的现状、存在的问题,分析了食品安全的严重性,最后就这些问题提出了解决的措施。

单增李斯特菌感染RAW264.7细胞转录组差异表达分析

为研究单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)感染前后RAW264.7细胞基因表达谱变化,筛选关键功能基因和通路,探究其致病机制。作者用感染复数(MOI)10的LM感染RAW264.7细胞6 h,提取细胞RNA进行转录组测序,选取感染组与对照组相比差异倍数≥1.5且P<0.05的差异表达基因进行GO和KEGG富集分析,并通过RT-qPCR验证部分差异基因。转录组结果显示,RAW264.7细胞在感染LM前后有1782个基因差异表达,其中上调为989,下调为793。GO分析结果主要涉及免疫系统过程、免疫反应、细胞程序性死亡调控等。KEGG分析结果显示,显著富集的通路有细胞因子-受体相互作用、肿瘤坏死因子信号通路、IL-17信号通路等。RT-qPCR验证实验结果显示,随机选择的11个显著差异基因表达倍数趋势与测序结果一致。该研究为进一步深入研究LM的致病机制奠定了基础。

宁夏地区枸杞所携带真菌的分子鉴定

宁夏是宁夏枸杞的主要种植地,枸杞鲜果加工或干果储藏不当易发霉变质造成经济损失。本研究使用真菌培养及分子生物学技术分析引起宁夏枸杞干果霉变的主要真菌种类,并探讨宁夏枸杞干果霉变可能造成的危害。从宁夏的五个村庄采集的枸杞霉变果实中分离培养真菌菌株,将分离到的菌株提取DNA,利用生物条形码技术对致病真菌进行扩增和鉴定,并使用最大似然法进行菌株系统发生分析。从宁夏枸杞分离出45株真菌,经鉴定发现存在10个属的真菌,分别为:链格孢属(Alternaria spp.)、镰刀菌属(Fusarium spp.)、立枯丝核菌属(Rhizoctonia spp.)、木霉属(Trichoderma spp.)、Filobasidium属(Filobasidium spp.)、青霉属(Penicillium spp.)、弯孢霉菌(Curvularia spp.)、毛霉菌属(Mucor spp.)、黑曲霉菌(Aspergillus spp.)、红酵母菌属(Rhodotorula spp.)。导致宁夏枸杞干果霉变的真菌最常见的为链格孢属,至少四种检出真菌能够产生真菌毒素,可能会造成食品安全问题。因此,需要加强和完善相关法律法规,对宁夏枸杞中的真菌种类和数量进行限制。

基于高分辨率溶解曲线分析鉴别食品中的3种李斯特氏菌

本研究利用高分辨率熔解曲线的方法,以iap基因为靶标新设计一对引物同时鉴别单增李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌,其余14种常见食源性病原微生物扩增为阴性结果,单增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌的检出限为10个拷贝,英诺克李斯特氏菌的检测限为50个拷贝。本研究对78份样品进行HRM-realtimePCR法、GB4789.30-2016和SN/T1870-2016(荧光PCR法)的检测,并对3种方法的检测结果进行统计学分析。结果显示:HRM法和国标方法、HRM法和荧光PCR法的检测结果之间存在统计学差异,国标方法和荧光PCR法检测结果之间无统计学差异。本研究建立的基于HRM-real time PCR法检测3种李斯特氏菌的方法快速高效、特异性好、成本低,适用于食品中李斯特氏菌的日常检测和监管。

高分辨率熔解曲线法检测饮用水中两种假单胞菌

目的用高分辨率溶解曲线法分离鉴定包装饮用水和天然矿泉水中的铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌。方法本研究以假单胞菌16S rDNA为靶基因,采用高分辨率熔解曲线的方法,利用一对引物同时鉴别铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌。结果Tm值在83℃~84℃出现熔解峰为恶臭假单胞菌,Tm值在84℃~85℃出现熔解峰为铜绿假单胞菌。通过对梯度含量的假单胞菌标准菌株DNA和多种真菌细菌的DNA进行高分辨率熔解曲线检测,显示该方法对其他12种非目标菌无交叉反应,检测限分别为41个拷贝数和48个拷贝数。结论HRM-Real time PCR检测体系可通过一对引物对上述2种假单胞菌进行有效的鉴别与区分,且具有良好的特异性和灵敏度。该方法可用于包装饮用水和天然矿泉水的日常检测中,为假单胞菌的快速检测提供了新方法。

食品中单核细胞增生李斯特氏菌的测量不确定度评定

依据GB 4789.30—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》第二法平板计数法和JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,对单增李斯特氏菌平板计数法测量不确定度的来源进行分析,以建立食品中单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法的测量不确定度评定方法。结果发现:通过建立数学模型T=AB/Cd,分析不确定度来自样品制备、样品稀释及重复测量的过程,样品的存储采集、样品的均质、培养基配制的时间、培养基灭菌温度、培养箱温度及培养时间对总不确定度的贡献较小。单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法的检测结果为(2.9±1.2)×10~6CFU/g,对同一样品测定10次的扩展不确定度为1.2×10~6。

全脂乳粉中菌落总数的测量不确定度评定

依据GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,对全脂乳粉中菌落总数的不确定度来源进行分析,建立了全脂乳粉中菌落总数的测量不确定度评定方法。全脂乳粉中菌落总数的扩展不确定度为0.182(以对数计)。

实时荧光PCR法检测肉制品中鸡、鸭源性成分

根据鸡、鸭线粒体DNA(mt DNA)序列设计了鸡、鸭特异性引物及Taqman探针,建立了肉制品中鸡、鸭源性成分的实时荧光聚合酶链式(real-time PCR)检测方法。结果发现:利用此方法,两种动物源性的最低检出限值(质量分数)分别为0.01%和0.001%。实时荧光PCR法能够作为肉制品中检测鸡、鸭源性成分的有效方法。

免疫亲和层析荧光光度法测定枸杞中黄曲霉毒素

利用免疫亲和层析荧光光度法测定枸杞中的黄曲霉毒素(AFT),样品由甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释,用黄曲霉毒素免疫亲和柱净化。以甲醇洗脱,溴溶液显色,荧光光度计测定黄曲霉毒素(B1+B2+G1+G2)含量。枸杞的最低检出限为1μg/kg,5μg/kg的加标回收率为99.6%,10μg/kg的加标回收率为114.0%。该方法准确、快速、安全。

实时荧光聚合酶链式反应技术测定肉制品中犬源性成分

根据犬线粒体脱氧核糖核酸(DNA)序列设计了特异性引物和探针,应用实时荧光聚合酶链式反应技术,检测了肉制品中犬源性成分的含量。所提取的17种犬的DNA样品扩增后均能得到典型S形扩增曲线,而所选取的14种其他动物源的DNA样品均未呈现同样的扩增曲线;同一模板所得Ct值(n=7)的相对标准偏差为1.2%。这说明所设计的条件具有较好的特异性和重复性。犬源性组分DNA的质量分数在0.000 01%~10%内与其Ct值之间呈线性关系,检测的灵敏度为0.1pg,不同加工方法所得肉制品的扩增结果之间无显著差异。

探讨信息化在招投标工作中的应用

随着大数据时代的到来,传统产业经营领域发生了巨大的变化,原有的市场业务结构亟待转型升级。本文针对我国招投标工作中信息化建设运用的现状、特征及问题进行分析,探讨信息化在招投标中的发展趋势和工作瓶颈,从转变理念、健全制度、提高技术、强化运用、规范管理等方面,对优化和完善招投标工作信息化水平进行研究,并重点对如何运用信息化提高招投标的科学性、有效性提出思考和建议,以期为改进和提高招投标现代化、信息化程度提供有价值的参考。

宁夏枸杞种植地土壤中微生物分布调查及降解农残研究

为了考察枸杞种植地土壤中微生物(细菌、霉菌、放线菌)的分布情况,筛选优势菌株,并考察其降解农药残留的能力。通过稀释涂布法对宁夏5个枸杞种植区(H区、N区、K区、Z区、B区)3个不同深度土壤样品进行细菌、霉菌、放线菌的种类及数量研究,利用16S rDNA鉴定微生物,利用液质联用仪检测农残质量浓度。结果表明,5个区域3种主要微生物分布规律各不相同,其中N区细菌及霉菌数量最多,K区放线菌数量最多。N区、Z区的3种微生物数量随采样深度增加而呈减少趋势,K区则相反。H区与B区的细菌数量随采样深度增加而减少,霉菌分布规律均随深度增加表现为先减少后增加的趋势,两区放线菌分布趋势则相反。筛选出的优势菌株在低浓度农药中降解的效率较高,如氧化乐果、对硫磷,其降解率可达100%,其余农药的降解率在30%~80%。在高浓度农药培养基中,菌株对氧化乐果、对硫磷的降解率下降至60%~80%,其余4种农药降解率下降至28%~51%。研究表明,不同种植区域土壤中3种主要微生物的分布规律与污染物种类及土壤中元素种类有一定的关系,分离出的优势菌中细菌的数量及种类最多且多为芽孢杆菌属。筛选出的3种优势菌株对农残有一定的降解能力。

基于物种特异性PCR技术检测鼻疽诺卡菌和巴西诺卡菌的初步研究

目的建立一种可以鉴别鼻疽诺卡菌和巴西诺卡菌的双重物种特异性PCR(species-specific Polymerase Chain Reaction,SS-PCR)诊断方法。方法基于鼻疽诺卡菌和巴西诺卡菌物种特异基因NFA_41530和O3I_RS18895分别设计特异性引物,通过优化反应条件和体系,建立快速准确的双重SS-PCR。对95株鼻疽诺卡菌、13株巴西诺卡菌和42株非目标菌株进行扩增,分析该方法的特异性和灵敏度,并通过模拟痰样本验证方法的准确性,预估其在临床诊断的价值。结果鼻疽诺卡菌和巴西诺卡菌质检分别扩增出一条清晰且单一的目标条带,其余42株非目标菌株均未扩增,表明该方法具有很好的特异性。该方法对鼻疽诺卡菌、巴西诺卡菌的检测下限分别为1.3×10^(4)copies/μL、2.4×10^(4)copies/μL,灵敏度较高。使用20个健康人的痰液模拟痰样本,检测符合率为100%。结论基于NFA_41530和O3I_RS18895基因建立的双重SS-PCR方法特异性强、灵敏度较高,是一种可以同时鉴定鼻疽诺卡菌和巴西诺卡菌的简便、快速、可靠、经济的方法。

实时定量荧光PCR法检测清真食品中狐狸源性成分

根据狐狸线粒体DNA(mt DNA)序列设计了狐狸特异性引物和探针,建立了食品中狐狸源性成分的实时荧光PCR检测方法。该方法的检测灵敏度可达0.1pg,而且与常见的12个物种无交叉反应,可作为食品中狐狸源性成分鉴别的有效方法。

食品检测中分子检测技术的应用及实验室管理

随着科学技术的发展,分子生物学检测技术已成为现代食品检测行业中的重要分支。近些年我国对食品的质量愈发重视,实时荧光定量PCR技术凭借着其高效、迅速、精准的优势已成为食品安全检测技术中的中流砥柱,进入了新阶段。本文对食品检测中实时荧光定量PCR技术的应用以及分子生物学实验室的安全隐患进行了分析与总结,提出了有效的管理对策,确保了检测环境与数据的安全。

浅谈食品检测机构微生物实验室人力资源管理

食品检测是食品安全保障的关键环节。食品安全检测能力和质量保证是确保检测结果可靠的基础。食品微生物检测是食品检测项目中的重要卫生指标,因此从事微生物检测的人员尤其重要。本文首先阐述本实验室岗位确定和人员配置、教育和培训、监督和考核等,然后分析本实验室人力资源管理存在的问题,并提出几点建议。“民以食为天,食以安为先”。随着国民生活水平及文化素质水平的提高,

NASBA和RPA两种等温扩增技术在病原菌检测中的应用研究

依赖核酸序列扩增和重组酶聚合酶扩增技术是在PCR基础上发展起来的等温扩增技术。本文介绍了这两个技术的反应原理、引物探针设计原则以及优势,根据其简便、准确性好、灵敏度高、周期短的特点进一步对该技术在病原菌检测中的应用予以综述及展望。