青海湖裸鲤颗粒蛋白基因克隆及其参与盐碱适应机制研究

【目的】探究青海湖裸鲤颗粒蛋白A基因(GrnA)和颗粒蛋白B基因(GrnB)的生物学功能,为揭示颗粒蛋白(Grn)在青海湖裸鲤耐盐碱过程中的作用机制提供理论依据。【方法】以青海湖裸鲤为研究对象,通过RACE和PCR克隆青海湖裸鲤GrnA基因cDNA序列和GrnB基因编码区(CDS)序列,利用实时荧光定量PCR检测青海湖裸鲤GrnA和GrnB基因在各组织中的表达情况及在盐碱耐受过程中的表达变化,并分析二者与成骨分化特异性转录因子基因(Runx2)和补体基因C8g间的相关性。【结果】青海湖裸鲤GrnA基因cDNA序列全长653 bp,其开放阅读框(ORF)465 bp,共编码159个氨基酸残基;青海湖裸鲤GrnB基因CDS序列长1560 bp,共编码519个氨基酸残基。青海湖裸鲤与银鲫的GrnA氨基酸序列相似性高达89.61%,基于GrnA氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示青海湖裸鲤与鲤和鲫的亲缘关系较近;青海湖裸鲤与多鳞白甲鱼的GrnB氨基酸序列相似性高达89.69%,基于GrnB氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示青海湖裸鲤与多鳞白甲鱼和虎皮鱼的亲缘关系较近。GrnA和GrnB基因在青海湖裸鲤不同组织中均有表达,且以脾脏中的相对表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05,下同)。青海湖裸鲤鳃组织中的GrnA基因对盐胁迫浓度增加的响应速度最快,其次是脾脏和肾脏;GrnB基因则表现为在肾脏中的响应速度最快,其次是脾脏和鳃组织,但在鳃组织中能持续响应。在碱胁迫下,青海湖裸鲤GrnA基因在3个组织中呈不规律性表达变化;GrnB基因表现为在鳃组织中的响应最强,其次是肾脏。在盐碱混合胁迫下,GrnA基因在鳃组织中的响应强于脾脏,在肾脏中也有响应;GrnB基因在鳃组织中最先响应盐碱混合胁迫,其次是肾脏和脾脏。在青海湖裸鲤鳃组织中,GrnA和GrnB基因在盐胁迫或碱胁迫下与Runx2基因呈正相关;在脾脏中,GrnA基因与C8g基因在盐胁迫下呈极显著正相关(P<0.01),碱胁迫下GrnA和GrnB基因与C8g基因呈正相关。【结论】青海湖裸鲤GrnA和GrnB基因除了在脾脏中高表达外,在鳃组织和肾脏中也有相应表达,参与青海湖裸鲤的盐碱适应过程,且表现为GrnA基因对盐胁迫的响应更明显,而GrnB基因对碱胁迫的响应更明显。此外,青海湖裸鲤GrnA和GrnB基因在鳃组织中可能是通过调控Runx2基因影响鳃弓的生物矿化过程,在脾脏中可能是通过激活免疫调节过程,共同协助青海湖裸鲤适应高盐碱环境。

盐度对青海湖裸鲤幼鱼生长、鳃组织形态和糖代谢相关指标的影响

将初始体质量(3.87±0.32)g的一龄青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)幼鱼饲养在55 cm×40 cm×34 cm冷水鱼循环水族箱中,设淡水对照组(CK)和盐度5.0、7.5、10.0、12.5和15.0组共6组,每组3个重复,每箱10尾。实验盐度用海量星海水素配制,养殖69 d检测其生长性能等指标,旨在为科学养殖青海湖裸鲤幼鱼提供科学依据。结果显示:随盐度的升高,青海湖裸鲤幼鱼增重率(WGR)与特定生长率(SGR)逐渐降低,但盐度12.5组略有回升;日均增重率(ADG)呈先升高后降低的趋势,5.0组最高;体长特定生长率(SGRL)呈先降低再升高再降低的趋势;肥满度(CF)先升高再降低,5.0组最小;存活率(SR)无明显变化(90%以上)。盐度在0~10.0范围内,幼鱼鳃小片间隔逐渐减小;盐度超过10.0后,鳃组织退化,鳃小片弯曲程度加剧,上皮细胞脱落、坏死,泌氯细胞数量增多、体积增大,鳃小片长度变短、宽度减小、间隔增大。不同盐度处理均显著提高了糖原含量以及果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)活性(P<0.05),5.0组肝糖原含量最高,10.0组肌糖原含量最高;10.0组肝中FBA活性最高,15.0组肌中FBA活性最高,首次确认FBA参与青海湖裸鲤的耐盐过程。综上所述,盐度在0~5.0时青海湖裸鲤幼鱼的生长性能最佳,盐度超过10.0对青海湖裸鲤幼鱼鳃组织影响显著,说明盐度处理增强了幼鱼糖代谢过程。本研究结果为青海湖裸鲤的人工养殖提供了新思路。

青海湖裸鲤SMIT1和SMIT2基因克隆及其对碱度环境的应答

【目的】哺乳动物钠/肌醇共转运蛋白(sodium/myo-inositol cotransporter, SMIT)有2个同源体,分别是SMIT1和SMIT2,属于溶质载体(SLC)超家族。试验旨在探究青海湖裸鲤SMIT1、SMIT2基因对碱度环境的应答,为后续SMIT1和SMIT2基因在碱度环境下参与肌醇转运的分子机制奠定基础。【方法】利用PCR技术扩增、克隆SMIT1、SMIT2基因CDS区,并对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术检测SMIT1和SMIT2基因在淡水环境下青海湖裸鲤鳃、肾脏、脑等8个组织中的表达情况,以及不同碱度胁迫(0、J25、J50、J75、J100)下鳃和肾脏组织中2个基因表达的规律;利用气相色谱质谱法(GC-MS)检测不同碱度胁迫下鳃和肾脏组织中的肌醇含量变化。【结果】SMIT1基因CDS区为2 130 bp,共编码709个氨基酸,其氨基酸序列与犀角金线鲃相似性最高(86.5%),与多鳞白甲鱼亲缘关系最近;SMIT2基因CDS区为2 016 bp,共编码671个氨基酸,其氨基酸序列与多鳞白甲鱼的相似性最高(90.3%),与犀角金线鲃、多鳞白甲鱼的亲缘关系较近。SMIT1和SMIT2均属于溶质体超家族的SLC5家族成员,其中SMIT1蛋白包含2个SLC家族保守结构域。实时荧光定量PCR结果显示,淡水环境下SMIT1和SMIT2基因在青海湖裸鲤不同组织中均有表达,其中,SMIT1基因在脑和肾脏中表达量较高,SMIT2基因在肾脏中表达量最高,均显著高于其他组织(P<0.05)。随着碱度的升高,与对照组相比,J25、J50、J100时SMIT1基因在青海湖裸鲤鳃中表达量均显著升高(P<0.05),在肾脏中整体表达量均显著升高(P<0.05);J25时SMIT2基因在青海湖裸鲤鳃中表达量显著升高(P<0.05),J50、J75、J100时在肾脏中表达量均显著降低(P<0.05)。GC-MS结果显示,随着碱度的升高,青海湖裸鲤鳃中肌醇含量均显著高于对照组(P<0.05);肾脏中肌醇含量与对照组相比无显著变化(P>0.05)。【结论】SMIT1、SMIT2基因CDS区分别长2 130和2 016 bp,分别编码709和671个氨基酸,SMIT1基因在青海湖裸鲤脑组织中高表达,而SMIT2基因在青海湖裸鲤肾脏中高表达。不同碱度胁迫下SMIT1、SMIT2基因在青海湖裸鲤鳃、肾脏中的表达规律不同;肌醇含量在鳃组织中显著升高,且在J50时达到最高,在肾脏中变化不显著。研究结果为进一步探究青海湖裸鲤适应碱度环境的分子机制提供参考依据。

产品化研制模式在某电气单机中的实践

目前,航天产品结构组成愈加复杂,性能指标要求日益严苛,在全面国产化的大背景下,产品成本不断攀升。在此新形势下,本文结合北京航天长征飞行器研究所业务特点,基于新型研制模式探索实践研究所典型产品的降本增效途径,此举对于助力航天事业的高质量发展具有重要意义。一、项目背景某电气单机是航天某分系统的重要组成部分。虽然在航天系统内划分为单机级,但该产品的研制涉及数字电路、模拟电路、天线、软件、算法等多专业,配套层级多,硬件成本高,是一个复杂的电子系统。此外,该产品需要在狭小空间内完成力、热、电综合设计,实现难度较大。

纳米ZnO气敏元件对H_2的测定研究

以采用物理热蒸发法制备的纯ZnO纳米线以及Ag掺杂ZnO纳米线为气敏基料制备成旁热式气敏元件,用静态配气法对不同浓度的H2进行气敏性能测试。利用测试结果,绘制元件灵敏度与所测气体浓度的关系曲线,并对此曲线进行了线性拟合。结果表明,Ag掺杂纳米ZnO元件与纯纳米ZnO元件相比会明显提高对H2的灵敏度,两类元件的气敏性能与所测气体浓度呈现相同的变化规律。用拟合方程计算出的气体浓度值与实际检测值间吻合较好,误差小于10%。因此,可以利用这两类元件及其拟合直线对H2气体浓度进行测定。

ZnO纳米线CO气敏性能与气体浓度的关系研究

以采用物理热蒸发法制备的纯ZnO纳米线和掺杂Ni、Al的ZnO纳米线为气敏基料，以蒸馏水调和制备成旁热式气敏元件，用静态配气法对一系列浓度的一氧化碳气体进行了气敏性能的测试。结果表明掺杂的纳米ZnO元件与纯的纳米ZnO元件相比对CO气体的灵敏度更高，三种元件的灵敏度与所测气体浓度均呈现先上升后下降的变化趋势，且在同一浓度下出现最高值。

Ag掺杂ZnO纳米线酒敏性能的研究

利用漫渍法将ZnO纳米线浸渍于AgNO3溶液中制备了Ag掺杂的ZnO纳米线。借助X射线衍射仪（XRD）和场发射扫描电子显微镜（FESEM）对纳米线的晶体结构和形貌进行了表征。结果表明纳米线既含面心立方结构的Ag又含有六方纤锌矿结构的ZnO。三维网络结构的ZnO纳米线被一层致密的Ag颗粒包裹并在其表面形成了大量的具有高比表面剂的孔洞结构。将纯的和Ag掺杂的ZnO纳米线都作为酒敏传感材料，在酒精浓度为0．001％，工作温度为150～400℃的范围内测试了它们的气敏特性，结果显示，Ag掺杂的ZnO纳米线的酒精灵敏度比纯ZnO纳米线提高了14。在工作温度为350℃的条件下测试了它们的响应-恢复时间。气敏元件的酒敏特性主要归结于表面吸附效应。

ZnO纳米线气敏元件对单一气体浓度的判定研究

以不同金属掺杂的ZnO纳米线为气敏材料,在350℃下对不同浓度的H2气体进行了气敏性能测试。结果表明,掺杂Ag的ZnO纳米线在H2浓度为2.52×10-3时具有较高的气体灵敏度28.549。同时,利用Origin软件对测得的气敏性能曲线进行线性拟合,对未知的H2浓度进行了有效判定。还对金属掺杂提高ZnO纳米线气敏性能的原因进行了分析,认为金属的化学状态可能是ZnO纳米线气敏性能提高的物理本质。

碱度胁迫对青海湖裸鲤血清生理生化指标的影响

【目的】探究碱度对青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)相关生理生化指标的影响,对制定青海湖裸鲤应对碱环境的策略提供理论参考。【方法】以青海湖裸鲤血清为研究对象,进行慢性碱度胁迫,碱度先逐渐上升至最高点后逐渐降低(未胁迫为对照),测定分析取各胁迫点血清中激素、渗透、能量、氧化及免疫等指标的变化。【结果】青海湖裸鲤血清的皮质醇(COR)、钙(Ca^(2+))、血糖(GLU)、渗透压(OS)、Na^(+)/K^(+)-ATPase(NKA)、碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)、碳酸酐酶Ⅳ(CAⅣ)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和丙二醛(MDA)变化趋势相同,均为随碱度升高先升高后下降,随碱度降低则先下降后升高。COR与CAIV、总胆固醇(TC)、ALT、GPX和MDA呈极显著正相关(P<0.01),与TP、GLOB、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、TG和CAT呈显著正相关(P<0.05,下同)。胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、超氧化物歧化酶(SOD)、钠(Na^(+))、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)有相同变化趋势,无论碱度升高还是下降,均呈先下降后升高变化趋势。三碘甲状腺原氨酸(T3)、TC、HDL-C和LDL-C与碱度呈负相关,肌酐(CREA)和总胆红素(TBIL)与碱度呈正相关。IGF-Ⅰ与T3呈显著正相关。甲状腺激素(T4)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活力随碱度升高先升高后下降再恢复,之后随碱度降低先下降后升高。生长激素(GH)和氯(Cl-)随碱度升高先升高后下降再升高,之后随碱度降低逐渐升高。催乳素(PRL)含量随碱度升高先稍微下降后恢复再降低,之后随碱度降低先迅速升高后恢复。钾(K^(+))浓度随碱度升高而下降,随碱度降低先升高后下降。尿酸(UA)含量随碱度升高先下降后恢复,随碱度降低逐渐下降。尿素(UREA)含量随碱度升高先升高后恢复再升高,随碱度降低继续升高后恢复。【结论】在碱度胁迫时,青海湖裸鲤COR起主导作用,T3和IGF-Ⅰ协同,T4调控GH辅助,从而维持鱼类的体液稳态;TP、ALB、GLOB和TG含量的升高、SOD活力先下降后恢复及AKP活力先下降后恢复再升高等反应可能是青海湖裸鲤应对碱环境的一个重要策略。

乐都紫皮大蒜4种病毒多重RT-PCR检测技术的建立

【目的】建立乐都紫皮大蒜4种病毒的多重RT-PCR快速检测方法,为大蒜病毒病病原鉴定、脱毒效果验证等提供技术支撑。【方法】根据乐都紫皮大蒜RNA全长转录组测序结果,分别设计洋葱黄矮病毒(onion yellow dwarf virus,OYDV)、大蒜潜隐病毒(garlic latent virus,GLV)、大蒜D病毒(garlic virus D,GarVD)和大蒜X病毒(garlic virus X,GarVX)4种病毒的外壳蛋白特异性引物,筛选不同引物,优化引物用量、模板用量、退火温度等条件,并进行了多重RT-PCR的灵敏度检测和12份引进栽培大蒜种质资源的病毒检测。【结果】通过优化筛选,在一个PCR反应体系中实现了OYDV(1232 bp)、GLV(831 bp)、GarVD(506 bp)和GarVX(116 bp)4种病毒的多重检测,最优反应条件为退火温度55℃,模板用量2.5μL,混合引物用量1.0μL。多重RT-PCR的灵敏度略低于单一RT-PCR。对引进的12份栽培大蒜资源进行4种病毒的多重RT-PCR检测发现,有5份资源存在4种病毒,4份资源存在2种病毒,3份资源存在1种病毒。对7份资源中经多重PCR未检测到的病毒,使用单一RT-PCR进行检测和验证发现,除1份内蒙古资源(NMG)的1种病毒(GarVX)外,多重RT-PCR结果与单一RT-PCR检测结果一致。【结论】本研究建立的大蒜多重RT-PCR体系可靠性强,可用于大蒜病毒的检测与防控。

高层工业厂房异常振动测试与加固试验

为了研究高层工业厂房的异常振动成因与加固方法,采用有限元分析和现场振动测试相结合的方法,建立了高层工业厂房三维有限元模型,进行了高层工业厂房加固前的有限元分析和现场振动测试。针对高层工业厂房作业舒适程度要求严格、采光要求高、加固空间受限等要求,为解决机器设备与高层工业厂房的共振问题,提出了采用短肢剪力墙加固的现场加固方案,并进行了加固前后有限元分析结果和现场振动测试结果的对比分析。结果表明:机器设备安装在工业厂房的高层后,机器设备与厂房共振是造成高层工业厂房异常振动的主要原因;加固后高层工业厂房的强度和刚度得到明显提高,高层工业厂房长度方向固有频率由2.45Hz提高至5.87Hz,高层工业厂房宽度方向固有频率由2.94Hz提高至7.83Hz,与机器设备沿高层工业厂房水平方向频率不在共振区间,高层工业厂房的加速度和速度振动特性得到改善,取得了良好的加固效果;振动测试结果和加固方法可为高层工业厂房的设计和加固提供借鉴和参考。

风机联轴器断裂原因分析

某风机在试运行过程中其膜片联轴器发生断裂失效,采用宏观分析、金相检验、化学成分分析和力学性能测试等方法对联轴器的断裂原因进行了分析。结果表明:该联轴器发生断裂主要是由于联轴器锻造后热处理不当,形成过热组织缺陷,从而导致其韧性极差;另一方面是由于联轴器锻造后未进行退火处理,内应力未及时消除,最终导致其在使用过程中的应力作用下发生早期脆性断裂失效。对断裂的联轴器进行退火+调质处理,可使其韧性大幅度提高,得到优良的综合力学性能。

湿热处理对马铃薯淀粉超高压糊化的影响

目的研究湿热处理对马铃薯淀粉超高压糊化的影响。方法将经过不同时间湿热处理的样品迚行不同压力的超高压处理,采用偏光显微、X射线衍射、差示扫描量热、快速粘度分析等技术对马铃薯淀粉样品颗粒形貌、结晶结构、糊化特性热特性迚行研究。结果湿热处理增加了马铃薯淀粉的相对结晶度及糊化焓值,提升了糊化温度。同时通过改变淀粉颗粒内部结构,引起淀粉分子吸水性降低,迚而导致淀粉膨胀性变差,粘度降低,粘度曲线由A型向D型转变。无论湿热与否,淀粉在400~600MPa超高压处理过程中,其相对结晶度、糊化焓值均降低,但与原淀粉相比,湿热处理后淀粉在超高压处理过程中相对结晶度和糊化焓值降低程度减小。结论马铃薯淀粉水分含量为30%(m:m)时, 90℃湿热处理5~15 h导致淀粉颗粒内部结构更为致密,增加其压力抵抗性,延缓了超高压糊化过程。

某2Cr13钢零部件裂纹产生原因分析

采用化学成分分析、金相检验、扫描电镜和能谱分析以及力学性能测试等方法对某2Cr13钢零部件上裂纹产生的原因进行了分析。结果表明:该裂纹为氧化物裂纹,是由于锻造过程氧化物裹入产生的。建议该零部件在锻造时,注意清理毛坯因加热而产生的表面氧化物及模具内残留的氧化物,加强锻后热处理,防止产生较大的内应力。

政府会计制度改革和行政事业单位绩效关系分析

论文首先介绍了我国政府会计的发展历程,在诠释了政府绩效的基础上,从完善行政事业单位绩效评价体系、摸清行政事业单位“家底”和提升行政事业单位管理效率三个层面探讨了政府会计改革对行政事业单位绩效的影响。最后,结合以上分析,提出了政府会计制度改革提升我国行政事业单位绩效的对策建议。论文的研究有助于明晰政府会计制度改革和行政事业单位绩效之间的内在关系。

新时代我国政府会计制度改革的概况分析

本文首先综述了我国政府会计制度的研究文献,然后分析了新时代我国政府会计制度改革的必要性,从财务工作人员的业务水平不高、新的政府会计制度的实施机制不健全和信息系统构建不完善三个方面阐述了新时期我国会计制度改革存在的问题。最后,从转变财务工作人员的思想转念、提升其业务素质,加快新型政府会计财务信息系统构建几个方面提出了我国新的会计制度实施推进的对策建议。

未来已来:创新驱动引导时代新变化

20世纪80年代末以来弗里曼、佩雷兹等新熊彼特主义经济学家对工业革命以来的技术创新进行了系统的考察和梳理,并划分出五次技术革命:18世纪60-70年代,以“斯密顿水车”“珍妮纺纱机”等为标志,开启了工业革命的序幕;18世纪末到19世纪30年代,以“瓦特蒸汽机”广泛应用和“利物浦—曼彻斯特”铁路线开通为标志,人类进入“蒸汽和铁路时代”;19世纪70年代,以钢铁、电力及重型机械等为代表的第三次技术革命将人类社会带入到“钢铁和电气时代”;20世纪初,以石油化学、汽车制造为代表开启了“石油与汽车时代”;20世纪60—70年代,以英特尔公司微处理器发布为标志宣告了“信息时代”的到来。

成功放飞梦想 金牌铸就辉煌——记中国航天科技集团公司一院“长三甲”系列火箭研制团队

2013年12月2日1时30分，明丽的烈焰划破夜的寂静，巨大的轰鸣声直撞心底。长征三号乙遥23运载火箭在华夏儿女炽热的目光中，成功托举嫦娥三号月球探测器，极为精准地到达地月转移轨道。这一刻，中国火箭的金色神奇再次通贯寰宇。

压缩机叶轮材料S41500低温冲击影响因素研究

为了研究S41500材料低温冲击韧性不合格的原因及其影响因素,分别从材料的化学成分、力学性能、金相组织及热处理工艺方面对20组试样的冲击试验结果进行了分析。结果表明:S41500材料中δ-铁素体的出现是造成其冲击韧性偏低的主要原因。当材料中合金元素Cr含量越接近上限、Ni含量越接近下限时,会导致δ-铁素体含量增加,大大降低低温冲击韧性。此外,热处理也不能有效地消除δ-铁素体,无法使低温冲击韧性得到明显改善。

浅析社会力量参与公共文化服务体系建设的必要性

党在十八届三中全会提出改变过去“政府总揽”的参与主体模式,健全公共文化服务体系建设的参与机制。在此过 程中,社会力量的参与尤为重要,这不仅是历史传承、马克思主义中国化的根本体现,也是政府转型的政策要求,更是广大 人民群众的现实需求,是提高我国公共文化服务水平和质量的必经之路与必要环节。