基于刃天青微平板法检测金黄色葡萄球菌对天然产物的敏感性

[目的]以刃天青为检测试剂,评价大黄酸、棉子酚、盐酸小檗碱、兰雪醌、槲皮素5种天然产物对金黄色葡萄球菌的抑制作用。[方法]比较刃天青浓度、菌悬液浓度、培养基种类和反应时间对吸光值的影响,优化刃天青的工作条件。刃天青法进行药敏性实验得到五种天然产物的最低抑菌浓度(MIC),求得毒力回归方程、相关系数(R^(2))和半抑菌浓度(IC_(50))。通过Z值判断刃天青显色法适用于高通量筛选药物的可行性。[结果]当刃天青孔内终浓度为20μg/mL,培养基为LB,菌悬液浓度为5×10^(5) CFU/mL,反应时间9 h时适用于金黄色葡萄球菌的药敏性实验。刃天青显色法与微量肉汤法检测得到的五种天然产物的抑菌结果具有一致性。[结论]五种天然产物均具有一定的抑菌活性。刃天青显色法具有准确性好、灵敏度高及高通量的特点,适用于天然产物抗菌活性的筛选。

生物发酵菊叶薯蓣富集薯蓣皂苷的研究

目的通过响应面分析法优化菊叶薯蓣的发酵条件,富集菊叶薯蓣中的薯蓣皂苷。方法采用响应面分析法,设计三因素三水平实验,考察发酵时间、发酵温度、接种量对菊叶薯蓣中薯蓣皂苷含量的影响。采用HPLC-ELSD测定薯蓣皂苷的含量。结果回归模型分析表明二次回归方程能够用于菊叶薯蓣生物发酵条件的优化(R^(2)=0.9685),最佳发酵条件为发酵时间47 h、发酵温度33.4℃、接种量16.3%。结论响应面分析法能够优化菊叶薯蓣的发酵条件并实现薯蓣皂苷的富集,为菊叶薯蓣的进一步研究与利用提供参考。

基于4种皂苷的定量分析评价干燥方式对菊叶薯蓣有效成分的影响

目的建立HPLC-ELSD法同时测定菊叶薯蓣中4种皂苷的含量,评价干燥方式对菊叶薯蓣有效成分的影响。方法采用HPLC-ELSD的方法同时测定菊叶薯蓣鲜品及不同干燥方式所获得的干品中原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷的含量。结果结果表明菊叶薯蓣中4种皂苷的含量在不同干燥方式所获得的干品及鲜品之间存在差异:与鲜品相比,60℃热风干制后4种皂苷的含量变化最小;阴干法干制后4种皂苷的含量差异较大,其中原薯蓣皂苷含量下降显著,薯蓣皂苷含量上升明显,伪原薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅱ含量均有所升高;晒干法干制后4种皂苷的含量与阴干法的含量变化趋势相似。结论HPLC-ELSD同时定量测定多种皂苷的方法,可用于菊叶薯蓣及其他含皂苷类药材的质量控制,60℃热风干制是保障菊叶薯蓣有效成分的最优产地干燥技术,可为菊叶薯蓣的产地加工及质量控制提供参考。