MicroRNA调控肿瘤干细胞凋亡的研究进展

微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非蛋白质编码小RNAs,主要在转录后水平负性调控基因表达。miRNAs表达水平的改变与许多人类疾病尤其是癌症密切相关。肿瘤干细胞(CSCs)亦称为肿瘤起源细胞,是存在于肿瘤细胞中的一小群具有干细胞特性的亚群细胞,具有高度致瘤性及耐药性。近年来,miRNAs在CSCs凋亡调控中的作用逐渐成为研究热点。靶向miRNAs的分子疗法有望成为校正CSCs调节异常的有力工具。了解CSCs凋亡信号系统的分子机制对开发新型癌症疗法尤为重要。本文就miRNAs与CSCs凋亡相关研究作一综述。

鼻咽癌细胞来源外泌体的提取和鉴定

目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体，并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用ExoQuick—TC（SBI）试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体，使用透射电镜观察其形态特征，BCA法进行蛋白定量，Westernblot进行外泌体特异性抗原分子CD63及筏蛋白-1鉴定。结果3种鼻咽癌细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物，透射电镜下观察呈圆形的囊泡，直径为40～130nm，具有完整胞膜。且CNE-2来源的此种泡状物表达外泌体特异性膜筏蛋白-l、CD63。10mL对数生长期CNE-2培养上清液得到487μg／mL（以蛋白计）的外泌体200μL。结论本实验室保存的3种鼻咽癌细胞系很可能均能产生外泌体，ExoQtfick—TC（SBI）法能够简便快速地从鼻咽癌细胞系中提取到外泌体，不需要超速离心，为鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶点。

奈达铂联合BI-1基因沉默对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究奈达铂联合靶向沉默BI-1基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测奈达铂联合靶向沉默BI-1基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的抑制作用。采用流式细胞技术检测奈达铂联合靶向沉默BI-1基因对鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的影响。结果奈达铂联合靶向沉默BI-1基因呈时间和剂量依赖性抑制鼻咽癌细胞株CNE-2的增殖,奈达铂联合靶向沉默BI-1基因呈剂量依赖性诱导鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡。结论研究结果证实奈达铂联合靶向沉默BI-1基因能有效抑制鼻咽癌细胞CNE-2的增殖,并能诱导鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡。这种化疗联合靶向治疗的模式以期为鼻咽癌的治疗提供一种新的高效低毒的治疗模式。

鼻咽癌组织中WWOX基因和蛋白的表达及其临床意义

目的探讨WWOX基因和蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征关系。方法收集52例鼻咽癌和25例正常鼻咽组织,采用实时荧光定量PCR和免疫组化染色分别检测WWOX mRNA、蛋白表达。结果鼻咽癌组织中WWOX基因、蛋白表达显著低于正常鼻咽组织(P<0.05)。癌组织中WWOX基因、蛋白表达与分化程度、TNM分期有关(P<0.05)。结论检测WWOX表达可能有助于鼻咽癌诊断及预后判断。

佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响

目的探讨佛手柑内酯对鼻咽癌细胞周期的影响及可能的作用机制。方法利用CCK-8法测定佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1的体外抑制活性,并绘制1、10、100μmol·L-13个浓度的佛手柑内酯对2种鼻咽癌细胞作用后的生长曲线,然后利用PI染料法检测各组细胞的周期分布。利用Western blotting检测CDK4、CDK6、CDK2、Cyclin D1和Cyclin E2的蛋白表达量,并检测各组β-catenin、GSK-3β及GSK-3β的S9位点蛋白磷酸化水平。结果佛手柑内酯对鼻咽癌细胞CNE-2和HONE-1具有较显著的体外抑制活性,呈明显的浓度依赖性(CNE-2:r=0.926,P<0.05;HONE-1:r=0.959,P<0.05)及时间依赖性(CNE-2:r=0.991,P<0.05;HONE-1:r=0.963,P<0.05),随着佛手柑内酯浓度的增加,两鼻咽癌细胞处于G0-G1期的细胞数目比例上升,S期与G2-M的比例下降。相对于对照组,佛手柑内酯能显著降低实验组细胞CDK4、CDK6、CDK2、Cyclin D1、Cyclin E2和β-catenin的蛋白表达量,但对GSK-3β的蛋白表达水平无显著影响,对GSK-3β的S9位点蛋白磷酸化水平的影响也无明显规律。结论佛手柑内酯能通过阻滞鼻咽癌细胞周期运行抑制其体外增殖能力,这一过程可能与部分周期蛋白的下调及wnt/β-catenin信号通路的被抑制有关。

EB病毒的检测和结果解读

EB病毒（EBV）属于典型的疱疹病毒，是由162颗衣壳粒排列成的二十面体，并包绕着富含脂质的胞膜，在上皮细胞内完成复制并长期潜伏于淋巴细胞内。成熟的病毒颗粒内含有1条线性双链DNA，而在隐性感染的细胞中该DNA以环状游离的形式存在。EBV与多种疾病相关，如传染性单核细胞增多症（IM）等。