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结核分枝杆菌rv0199基因在耻垢分枝杆菌中的表达及检测 被引量:2
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作者 崔保亮 陈利苹 +2 位作者 张娈娈 李华芳 刘思国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期9-13,共5页
为研究结核分枝杆菌(M.tb)rv0199基因在该病原致病性中可能发挥的作用,本研究克隆了rv0199基因,在耻垢分枝杆菌(Ms)中异源表达,并对其表达进行检测。将大肠杆菌—分枝杆菌穿梭表达载体pMV261进行改造,向载体中引入常用的6His和StrepⅡ... 为研究结核分枝杆菌(M.tb)rv0199基因在该病原致病性中可能发挥的作用,本研究克隆了rv0199基因,在耻垢分枝杆菌(Ms)中异源表达,并对其表达进行检测。将大肠杆菌—分枝杆菌穿梭表达载体pMV261进行改造,向载体中引入常用的6His和StrepⅡ重组蛋白标签,命名为pMV262。使用Ms/pMV262表达系统对rv0199基因进行超表达,用抗6His标签抗体和抗StrepⅡ标签抗体均能特异的检测到重组蛋白。本试验改造的pMV262穿梭表达载体可很方便的检测M.tb的基因在Ms中的异源表达,不用制备针对蛋白的多克隆抗体或单克隆抗体。构建的重组菌Ms/262-99为进一步研究rv0199基因的功能提供了材料,奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 rv0199基因 pMV261 pMV262 耻垢分枝杆菌
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立井提升机用安全制动手自一体并联冗余回油实现探讨 被引量:8
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作者 崔保亮 《煤矿机械》 2016年第10期10-11,共2页
立井提升安全是矿井不可忽视的问题,尤其安全制动系统的安全可靠性极其重要。2016年版的《煤矿安全规程》新增第425条规定:安全制动必须有并联冗余的回油通道。在我国,煤矿行业矿井提升机液压制动系统大多不具备此功能,为此,通过现场实... 立井提升安全是矿井不可忽视的问题,尤其安全制动系统的安全可靠性极其重要。2016年版的《煤矿安全规程》新增第425条规定:安全制动必须有并联冗余的回油通道。在我国,煤矿行业矿井提升机液压制动系统大多不具备此功能,为此,通过现场实际及原有液压制动系统原理调研,通过设计2种并联冗余的回油通道、自动控制及手动控制的并联回油通道、减压阀与B组制动闸并联等液压回路予以实现。该方案在冀中股份葛泉矿实施过程中效果良好,不仅满足了《煤矿安全规程》的要求,而且大大提高了矿井提升机液压制动系统的安全可靠性。 展开更多
关键词 立井提升 液压制动 冗余回路 实现
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煤矿35/6kV变电站综合自动化改造
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作者 崔保亮 《工矿自动化》 2011年第12期116-118,共3页
以葛泉矿为例,提出了煤矿35/6 kV变电站自动化改造的方案。通过综合自动化改造实现了变电站继电保护和控制、远动、计量、故障录波、数据处理、五防操作和闭锁、在线监测等功能,满足了变电站后期扩容和线路改造的需要。
关键词 煤矿变电站 自动控制 35/6kV 自动化改造
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立井提升用钢丝绳罐道维检探讨
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作者 崔保亮 《煤炭与化工》 CAS 2016年第10期84-85,共2页
为避免提升容器在立井井筒中运行发生偏离以防撞坏井筒装备甚至卡罐、断绳事故,对于使用钢丝绳罐道的立井,井筒罐道对提升容器运行轨迹和钢丝绳罐道维检工作尤为重要,通过对钢丝绳罐道强制周期性维检、采取护绳措施、定期进行试验、定... 为避免提升容器在立井井筒中运行发生偏离以防撞坏井筒装备甚至卡罐、断绳事故,对于使用钢丝绳罐道的立井,井筒罐道对提升容器运行轨迹和钢丝绳罐道维检工作尤为重要,通过对钢丝绳罐道强制周期性维检、采取护绳措施、定期进行试验、定期更换全绳等措施,可延长钢丝绳罐道的使用寿命,减少提升安全事故发生。 展开更多
关键词 立井提升 钢丝绳罐道 措施 维检
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中原大化创新激活力 半年减亏逾一亿
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作者 崔保亮 《河南化工》 CAS 2011年第1期2-2,共1页
2011年1月13日,中原大化公司财务快报显示,2010年该公司全年实现营业收入35亿元,同比增收13亿元,增长60%。2010年7月份以来逐月减亏,10月份环比减亏2061万元,11月份实现赢利243万元,下半年累计减亏1.2亿元,彻底扭转了持续亏... 2011年1月13日,中原大化公司财务快报显示,2010年该公司全年实现营业收入35亿元,同比增收13亿元,增长60%。2010年7月份以来逐月减亏,10月份环比减亏2061万元,11月份实现赢利243万元,下半年累计减亏1.2亿元,彻底扭转了持续亏损的被动局面,实现了逆势增长。 展开更多
关键词 中原 活力 创新 营业收入
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结核分枝杆菌rv3802c基因双顺反子真核表达质粒的构建及鉴定
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作者 张娈娈 陈利苹 +3 位作者 曹俊 崔保亮 李华芳 刘思国 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第10期1-5,共5页
为了构建结核分枝杆菌rv3802c基因双顺反子真核表达质粒,本研究利用重叠延伸PCR技术扩增出rv3802c-HisFlag基因片段,将其克隆到真核表达载体pCDNA3.1(+)上,测序验证后,将基因合成的内部核糖体进入位点和增强型红色荧光蛋白基因片段(IRES... 为了构建结核分枝杆菌rv3802c基因双顺反子真核表达质粒,本研究利用重叠延伸PCR技术扩增出rv3802c-HisFlag基因片段,将其克隆到真核表达载体pCDNA3.1(+)上,测序验证后,将基因合成的内部核糖体进入位点和增强型红色荧光蛋白基因片段(IRES-DsRed2)定向插入到这个重组质粒上,经酶切鉴定获得双顺反子表达质粒pC3.1-3LHF-Red。将质粒pC3.1-3LHF-Red转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,通过荧光显微镜观察到增强型红色荧光蛋白成功表达;经Western blot分析表明Rv3802c-HisFlag融合蛋白在CHO细胞中获得了表达。结果表明,本研究成功构建了共表达增强型红色荧光蛋白和Rv3802c-HisFlag融合蛋白的双顺反子表达质粒pC3.1-3LHF-Red,为进一步研究结核分枝杆菌Rv3802c蛋白在分枝杆菌感染细胞过程中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 Rv3802c蛋白 pC3.1-3LHF-Red重组质粒 内部核糖体进入位点(IRES) CHO细胞
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