猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防治

猪繁育与呼吸综合征(Porcine Breedingand Respiratory Syndrome,PRRS)又称猪蓝耳病,据报道1987年在美国一些地区首次暴发。随后在北美、欧洲和亚洲成为一种大流行疾病。目前为止,PRRS已成为全球养猪业的一种严重传染病,其传染性强、发病率高、死亡率高达80%~90%,给养猪业带来了巨大挑战。尤其是我国作为生猪和猪肉生产的大国.

猪繁殖与呼吸综合征病毒GS15株NSP2蛋白多位点缺失病毒的拯救与体外生长特性分析

【目的】本实验室前期在高致病性毒株PRRSV/GSWW/2015的感染性克隆上,拯救获得了非结构蛋白(non-structural protein 2,NSP2)第519-565位和第628-747位氨基酸双缺失的工程病毒(r GS15-?2)。本研究旨在在双缺失病毒的感染性克隆上,构建拯救获得NSP2三个位点缺失的工程病毒。【方法】在前期双缺失病毒感染性克隆的基础上,利用融合PCR方法分别构建缺失NSP2第323-364位和第372-433位优势抗原表位的两个3个位点缺失的重组质粒。经脂质体介导,转染Marc-145细胞拯救病毒,通过电子显微镜观察、免疫荧光实验、测定病毒滴度、绘制生长曲线等方法对缺失病毒的生长特性进行分析。【结果】成功获得拯救病毒r GS15-?3-1和r GS15-?3-2。电子显微镜下可以观察到直径大小为50-80 nm的病毒粒子;免疫荧光实验检测表明,拯救病毒与亲本病毒GS15一致,都能检测到PRRSV N蛋白表达;缺失区域RT-PCR扩增鉴定,拯救病毒传至40代缺失标记稳定存在;r GS15-△3-1与r GS15-△3-2病毒滴度分别为2.00×10^(6.0)TCID_(50)/m L和2.25×10^(5.8)TCID50/m L,与亲本病毒相比病毒滴度差异显著(P<0.05);生长曲线分析表明拯救病毒复制水平低于亲本病毒达到最高滴度的培养时间比亲本病毒延迟24 h。【结论】本研究通过对PRRSV基因2型非结构蛋白NSP2多位点缺失病毒的体外生长特性分析,为研制新型PRRSV标记疫苗奠定了基础,也为猪繁殖与呼吸综合征的防控提供新的策略。

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因2型类NADC30毒株感染模型的建立

本研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)类NADC30流行毒株的感染模型。选择田间分离的类NADC30毒株PRRSV/GSWW/2018作为攻毒毒株,采用滴鼻、肌肉注射和皮下注射这3种方式进行感染,攻毒剂量为接种细胞培养病毒液2 m L/头(10~6TCID50/m L),每组3头猪。攻毒后采集血液、鼻拭子、肛拭子检测病毒血症与排毒情况,每天检测体温变化,记录增重与发病死亡情况,死亡猪及时进行剖检,观察肺组织病变情况,根据以上指标评价感染模型是否建立成功。结果显示,滴鼻与肌肉注射组在感染后第24小时出现发热症状,持续约1周时间;感染后第48小时病毒血症达峰值、并持续至死亡;滴鼻与肌肉注射攻毒组猪的体重下降,并表现出明显的临床症状与排毒现象,滴鼻组、肌肉注射组均100%死亡,皮下注射组与未感染对照组均表现正常。上述结果表明,PRRSV/GSWW/2018株通过肌肉注射或滴鼻方式均可成功感染仔猪,并表现出明显的临床症状,且有很强的致病性,表明感染模型建立成功,这为后续抗病毒药物筛选或疫苗研发奠定了良好基础。

猫杯状病毒引起细胞凋亡的信号转导通路研究进展

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是猫科动物上呼吸系统疾病的常见病因,威胁野生猫科动物和家猫的健康。FCV在体外培养过程中会引起CRFK等细胞的凋亡,导致明显的细胞病变。近年来已有FCV对细胞凋亡转导通路影响的研究,其中较为详细的是线粒体转导通路,但对FCV影响细胞凋亡机制的研究尚不完整。本文对FCV结构特征及诱导凋亡产生的细胞病理变化和相关信号转导途径的现阶段研究情况展开综述,以期为FCV致病机制的深入研究和该病治疗方法的探索提供参考及理论依据。