生物标志物在妊娠期糖尿病患者早产预测中的研究进展

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是一种常见的产科并发症,易导致早产等严重不良妊娠结局的发生,进而增加新生儿转归不良的风险,严重威胁新生儿的健康。因此及早的筛查、诊断对于GDM早产意义重大。本文简述了近年国内外有关GDM孕妇早产的筛查及预测方法,系统性分析了常规及新型生物标志物在GDM孕妇早产中的预测价值,以期为建立合理的GDM孕妇早产预测模型提供依据,从而实现早诊断、早干预,改善母婴结局。

生命早期表观遗传改变与疾病发生

以往研究认为,疾病特别是慢性病主要与成年期以及成人期以后的生活方式、饮食习惯等有关。近年研究证实,人类生命早期状况对后期身体健康具有长久的影响。大量的流行病调查揭示,宫内生长受损与代谢异常和心血管障碍,如心脏病、2型糖尿病、免疫功能异常、肿瘤和胰岛素抵抗等显著相关。尽管影响这些疾病发生的因素并不明确,但其作用的关键时期已经确认,包含胚胎期、胎儿期与婴儿期。

lncRNA MEG3在人白色脂肪细胞分化过程及肥胖人群脂肪组织中的表达变化研究

目的探讨长链非编码RNA (long noncoding RNA,lncRNA) MEG3在人白色脂肪前体细胞分化过程及肥胖人群脂肪组织中的表达变化,明确MEG3与体质量指数(body mass index,BMI)的相关性,为阐明MEG3在人脂肪细胞分化过程及肥胖中的作用提供线索。方法通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测MEG3在人白色脂肪细胞分化第0、1、3、5、9、12天的表达水平;应用qPCR检测MEG3在肥胖和正常人群中的表达变化;采用Pearson相关分析探讨MEG3与人群BMI、血清三酰甘油及胆固醇的相关性。结果 (1) MEG3在脂肪细胞分化第1、3、5、9、12天的表达量均为增高趋势,尤其在分化早期增长趋势更为明显;(2) MEG3在肥胖人群内脏脂肪组织中的表达量显著增加,差异具有统计学意义(P <0. 05);(3) MEG3与人群BMI呈正相关,相关系数为r=0. 5038 (/PPIA)和r=0. 5497 (/18s)。结论 MEG3在白色脂肪细胞分化及肥胖人群脂肪组织中的差异表达趋势提示,其可能作为人脂肪细胞分化重要调控因素及肥胖防治的潜在靶标。

335例剖宫产切口部位子宫内膜异位症的临床分析

目的 分析剖宫产切口部位子宫内膜异位症(CSE)的临床特征与分型情况。方法 回顾性分析2016年1月至2022年6月该院收治的335例CSE患者临床资料,分析病灶最大径与其他临床指标的相关性,比较不同病变分型患者的临床特征。结果 335例患者发病年龄为(30.2±4.2)岁,潜伏期为1个月至15年,平均(35.7±29.3)个月。328例患者接受手术治疗,48例(14.6%)患者既往剖宫产次数≥2次,既往剖宫产次数≥2次者发病年龄和病灶最大径高于1次者,差异有统计学意义(P<0.05)。按病灶侵及深度将患者分为皮下型26例、鞘膜型271例和腹膜型31例,病灶最大径腹膜型>鞘膜型>皮下型,差异有统计学意义(P<0.05);腹膜型血清糖类抗原125(CA125)水平、术中出血量、使用引流管和补片的比例均明显高于皮下型和鞘膜型(P<0.05)。病灶最大径与孕次、剖宫产次数、病程、术中出血量、病灶侵及深度及使用引流管、补片的比例呈正相关(P<0.05)。结论 剖宫产次数在一定程度上影响CSE患者的病灶大小,腹膜型患者的病灶较大,术中出血量和使用补片比例较高,应引起临床重视。

妊娠早期和晚期棕色脂肪组织代谢能力与基因表达变化

目的探究不同妊娠时期棕色脂肪组织(brown adipose tissue, BAT)的基因表达及代谢能力变化。方法建立C57BL/6J小鼠正常妊娠动物模型, 以同周龄未妊娠小鼠为对照组, 观察妊娠各时期BAT组织形态变化, 检测产热标志物解偶联蛋白1(UCP1)表达, 揭示脂肪棕色化及线粒体标志基因的mRNA水平变化;此外选取妊娠早期和晚期小鼠BAT进行转录组测序(RNA sequencing, RNA-seq), 筛选随妊娠进程的差异表达基因, 并开展基因本体(gene ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)分析。结果随妊娠进展, BAT脂滴显著增大, 产热标志蛋白UCP1表达下降(P<0.01), 脂肪棕色化标志基因Ucp1、2型脱碘酶(Dio2)、过氧化物酶增殖体激活受体γ辅激活因子1α(Pgc1α)以及线粒体标志基因细胞色素C(CytC)均显著下调(P<0.001), 以妊娠晚期组减弱最为显著。RNA-seq共筛选出差异表达基因1 298个, 其中906个基因在妊娠晚期上调、392个基因下调, GO及KEGG通路分析显示差异表达基因在脂质代谢、性类固醇激素、炎症因子等多种生物调节功能通路富集。结论小鼠妊娠晚期BAT出现脂滴变大、产热活性与代谢能力降低现象, BAT基因表达在妊娠不同时期存在显著差异, 因此BAT代谢能力降低可能是引发妊娠期代谢异常的重要原因。

南京地区0~5岁儿童25-羟基维生素D水平及其与季节的关系

目的：了解南京地区儿童血清25-羟基维生素D[25-（OH）D]水平,为临床维生素D制剂使用提供参考依据。方法选取2013年6月至2014年5月在南京医科大学附属南京妇幼保健院儿童保健门诊进行健康体检的0~5岁儿童为研究对象,采用人25-（ OH） D检测试剂盒检测其血清维生素D水平；统计不同年龄段儿童维生素D平均水平,计算各年龄组维生素D缺乏情况；分析其与年龄、性别以及季节变化之间的关系。结果0~5岁儿童维生素D水平为（81.5±30.4） nmol/L,其中男童维生素D水平为（81.9±31.6）nmol/L,女童维生素D水平为（81.3±29.8） nmol/L,平均缺乏率达9.5%（271/23944例）；缺乏主要存在于〉4~5岁儿童；且〉4~5岁组男童维生素D水平[（64.9±21.2） nmol/L]显著高于女童[（60.8±21.2） nmol/L]（t=0.98,P〈0.05）；维生素D水平受季节变化影响显著,第3季度水平[（108.1±11.6）nmol/L]显著高于其他季度[（71.8±15.6） nmol/L、（95.5±21.2） nmol/L、（86.6±3.5） nmol/L]（F=4.53,P=0.03）。结论维生素D作为儿童生长发育的必要营养元素,其补充应该贯彻儿童发育的不同时期,且不同年龄段儿童还应该根据当地季节变化补充维生素D。

棕色脂肪细胞分化过程中关键基因及常用内参表达水平变化

目的探究棕色脂肪细胞分化过程中关键基因以及参照基因随分化进程的表达变化趋势。方法根据随机数字表法随机选取20只4周龄雄性C57BL/6J小鼠，提取肩胛间区棕色脂肪组织。以高糖DMEM培养原代棕色前体脂肪细胞，以＂鸡尾酒法＂诱导培养基（含0.5 mmol/L异丁基甲基黄嘌呤、5 mmol/L地塞米松、320 nmol/L胰岛素、1 nmol/L三碘甲状腺原氨酸和0.125 mmol/L吲哚美辛）诱导分化。Trizol裂解法提取分化过程中（0、2、4、6 d）棕色脂肪细胞总RNA，琼脂糖凝胶电泳验证总RNA质量。油红O染色，检测棕色脂肪细胞成熟情况，免疫荧光鉴定棕色脂肪细胞成熟标志物UCP1表达水平。实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法比较在棕色脂肪细胞中参照基因（GAPDH、β-actin、18S和PPIA）表达水平的恒定性，并检测棕色脂肪分化关键基因（UCP1、PRDM16、PGC-1α、EBF2、PPARγ和Cidea）的表达水平。结果1.诱导第6天可见棕色脂肪细胞内密布细小脂滴，UCP1表达水平较高。2.琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量，可见3条明亮带，提示RNA质量合格。3.在小鼠棕色脂肪分化过程中PPIA的表达水平相对恒定，可作为小鼠棕色脂肪分化合适的内参。4.棕色脂肪能量代谢相关基因UCP1、PRDM16、PGC-1α、EBF2、PPARγ和Cidea随着分化天数（0、2、4、6 d）的增加表达量显著增加，差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论原代棕色脂肪细胞分化过程中，内参基因PPIA表达恒定，是合适的内参基因。原代棕色分化关键基因UCP1、PRDM16、PGC-1α、EBF2、PPARγ和Cidea可作为合适的棕色脂肪细胞成熟标志基因。

内源性多肽的潜在作用方式与功能预测

内源性多肽是一类常见的生物活性物质,在生命活动中发挥着重要作用。近年来内源性多肽的功能受到越来越多的关注,研究内源性多肽对于深入了解疾病机制、开发新的治疗药物有着十分重要的价值。因此,对于内源性多肽潜在作用方式的分析和生物功能的初步预测,在了解多肽性质特征,提升研究效率具有重要意义。

南京地区0～5岁儿童钙含量分析

目的 研究南京地区0~5岁儿童血清钙水平及其与季节的关系。方法 采用BH5100型原子吸收光谱仪检测南京地区24 977例0~5岁儿童末梢血中的钙元素含量,分析其与不同因素间的关系。结果 0~5岁儿童钙水平为（1.78±0.17）mmol/L。钙缺乏的548例（2.2%）儿童中,0~1岁儿童居多。5岁女童的钙水平高于男童[（1.80±0.16）mmol/L vs.（1.77±0.15）mmol/L]（P〈0.05）,而其他各年龄段男童和女童的钙水平无统计学差异（P〉0.05）。第1、2季度钙水平高于第3、4季度[（1.80±0.15）mmol/L、（1.80±0.16）mmol/L vs.（1.76±0.15）mmol/L、（1.77±0.15）mmol/L]（P〈0.05）。结论 儿童发育的不同时期都应当注意钙的补充。

母乳中蛋白成分的营养与生理意义

母乳作为新生儿营养的惟一标准，其独特的生物学功能归因于它含有的种类繁多的蛋白质。胆盐刺激脂酶和淀粉酶在消化中发挥辅助功能促进母乳中微量和大量营养物质的利用。免疫球蛋白、乳铁蛋白、κ-酪蛋白、溶菌酶以及乳过氧化物酶具有抗微生物的活性，它们可以抵抗胃肠道中的蛋白水解作用，从而以完整或部分水解的形式为母乳喂养婴儿提供对病原微生物和病毒的防护。细胞因子、集落刺激因子和趋化因子具有免疫调节活性，而胰岛素样生长因子、表皮生长因子、酪蛋白来源肽则在肠黏膜和组织发育中发挥作用。总之，母乳中的蛋白不仅提供母乳喂养婴儿适量的营养还在预防婴儿体内感染和促进组织器官发育中发挥着重要的生理功能。

小鼠棕色脂肪成脂分化功能随年龄增加的变化

目的探讨C57BL／6J小鼠棕色脂肪成脂分化功能随着年龄增加的变化情况。方法选取0周（初生）、4周、8周、12周C57BL／6J雌雄小鼠各4只，分别取其肩胛部的棕色脂肪组织。采用免疫组织化学法来鉴别其棕色脂肪，之后提取棕色脂肪的总RNA，并对总RNA的质量进行鉴定。通过实时荧光定量PCR法检测0周、4周、8周、12周C57BL／6J小鼠棕色脂肪成脂分化相关基因PPARα、C／EBPα、PGC-1α、PPARγ、FOXC2、BMP7的表达水平。结果解耦联蛋白-1（UCPl）免疫组织化学显示阳性着色较深的为C57BL／6J小鼠棕色脂肪组织，实时荧光定量PCR结果显示成脂分化基因的表达量随着小鼠年龄增加逐渐降低，各时间点之间差异有统计学意义[PPARα（F=11．96，P〈0．0001）、C／EBPα（F=9．39，P〈0．0001）、PGC-1α（F=17．21，P〈0．0001）、PPARγ（F=13．11，P〈0．0001）、FOXC2（F=12．23，P〈0．0001）、BMP7（F=16．44，P〈0．0001）]。结论小鼠棕色脂肪成脂分化能力随着小鼠年龄增长逐渐减退，活性逐渐降低。但其功能的调控因素尚需进一步研究探索。

多肽在肥胖研究中的新趋势

多肽是由氨基酸通过肽键相连而成的一类化学活性物质。生物体内已发现的多肽种类达数万种,具有一定生理活性。多肽作为神经-内分泌系统调控的信号分子,在肥胖及相关并发症中的作用得到广泛揭示,如神经肽Y、脑肠肽、胰高血糖素样肽等。近年,多肽组学的快速发展给多肽研究再添新概念,其中非编码基因短开放阅读框编码、功能肽同源区域、大蛋白分子断裂片段等来源的多肽以及脂肪细胞自身产生的内源性多肽也开始引起研究者的重视。本文就多肽在肥胖中的研究进展和趋势展开综述,为肥胖的预防和治疗提供了新的靶点。

长链非编码RNA uc.417的生物信息学分析及其在棕色脂肪细胞中的表达研究

目的：对长链非编码RNA（lncRNA）uc.417进行系统的生物信息学分析，预测其可能参与的生物学过程，并初步研究其在棕色脂肪细胞中的表达。方法应用UCSC在线数据库获取lncRNA uc.417的序列、位置，并分析其特征；应用Ensemble数据库预测lncRNA uc.417靶基因。分离C57BL/6J小鼠肩胛部棕色脂肪，胶原酶法消化、接种培养并诱导其向成熟的棕色脂肪细胞分化。采用逆转录PCR法检测lncRNA uc.417，同源异型基因B6（HOXB6）及同源异型基因B7（HOXB7）在棕色脂肪细胞分化过程中的表达变化，采用t检验比较三者在分化过程第0-10天的表达差异。结果lncRNA uc.417在各物种之间高度保守，其序列所在染色体区域存在众多顺式作用元件结合位置以及大量表观遗传调控线索，可能的调控靶标为HOXB6与HOXB7。lncRNA uc.417在分化过程D4天的相对表达量显著高于D2（2.07±0.77比0.89±0.18，t=4.103，P〈0.01），分化过程D8天的相对表达量显著高于D6（10.68±3.28比3.12±0.88，t=-4.238，P〈0.01）。结论 lncRNA uc.417在棕色脂肪细胞成脂分化过程中表达量逐渐增加，生物信息学分析提示可能通过调控下游靶基因，参与棕色脂肪细胞成脂分化过程。

妊娠期糖尿病孕晚期脂代谢异常对妊娠结局的影响

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇孕晚期血脂水平与妊娠结局的关系。方法选取2020年11月—2021年2月在南京医科大学附属妇产医院分娩的GDM孕妇200例为GDM组,另选取同期糖耐量正常孕妇(NGT)200例为NGT组,根据三酰甘油(TG)水平将两组研究对象分别分为血脂异常亚组和血脂正常亚组,比较亚组间妊娠结局,利用相关性分析和多元线性回归分析孕晚期血脂水平对妊娠结局的影响。结果NGT亚组妊娠结局比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。GDM血脂异常亚组新生儿出生体质量、巨大儿发生率明显高于血脂正常亚组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。整组人群相关性分析显示,新生儿出生体质量与孕前体质指数(BMI)、孕期增重及TG均呈正相关关系(r=0.122、0.165、0.241,P=0.015、0.001、0.000),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关关系(r=-0.193,P=0.000)。多元线性回归分析显示,孕期增重、TG及HDL-C是新生儿出生体质量的独立影响因素(均P<0.05),回归方程:出生体质量(g)=2932.842+孕期增重(kg)×21.252+TG(mmol/L)×76.410-HDL-C(mmol/L)×194.194。结论GDM孕妇孕晚期存在以TG升高、HDL-C降低为主的显著脂代谢异常,脂代谢水平与新生儿出生体质量相关,糖代谢异常合并脂代谢异常增加巨大儿发生率。

母乳的蛋白质水解系统

近年来研究发现母乳中存在许多来源于特定蛋白质水解生成的内源性多肽,其生成是由于母乳中复杂的蛋白质水解系统(其中包括蛋白酶原,活性蛋白酶,蛋白酶抑制剂和激动剂),它们来源于血液转运或由乳腺上皮细胞分泌以及免疫细胞分泌。而和足月儿相比早产儿母乳中蛋白质表达和酶活性存在差异,从而生成更多差异性多肽来弥补早产儿先天的不足。因此,现对目前研究的母乳蛋白质水解系统进行综述。

长链非编码RNA-Co7 Rik的表达特征及其对糖异生的影响

目的：揭示长链非编码RNA（long non-coding RNA,LncRNA）Co7Rik的表达特征及其在肝脏糖异生中的潜在作用。方法建立饥饿-再进食动物模型、高脂饮食诱导的肥胖模型, qPCR 法检测LncRNA-Co7Rik表达变化；分离C57BL/6J小鼠不同部位组织,检测其组织表达规律。原代分离小鼠肝脏原代细胞,分别给予二丁酰环腺苷酸（ db-cAMP）、Forskolin、地塞米松、Hydrocortisone等药物刺激,揭示生糖信号对LncRNA-Co7Rik表达的影响。采用核质分离法检测LncRNA-Co7Rik在细胞核/细胞质中的分布特征,进行亚细胞定位。结果动物模型研究显示LncRNA-Co7Rik在饥饿0 h、2 h、5 h、16 h及再进食20 h的表达量分别为1.00±0.61、2.98±0.87、3.41±0.98、6.73±1.21、1.53±0.78（均P〈0.05）,表明LncRNA-Co7Rik的表达水平随饥饿进程显著升高,在再进食后恢复正常水平。且与正常对照组相比,高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏中LncRNA-Co7Rik的表达明显上调（1.00±0.21对2.92±0.63, P〈0.01）。不同组织定量表明LncRNA-Co7Rik在肝脏组织中特异性表达,表达量是其他组织的3~4倍（P〈0.05）；体外研究发现, LncRNA-Co7Rik的表达受糖异生信号调控,提示其可能参与糖异生过程；亚细胞定位揭示LncRNA-Co7Rik主要分布于细胞核中,提示其可能在基因转录水平发挥作用。结论 LncRNA-Co7Rik是一个受生糖信号调控的肝脏特异性长链非编码RNA,并可能参与糖异生生理、病理过程。

新生儿疾病筛查血片微量DNA提取方法的建立及其在甲基化检测中的应用

目的 建立新生儿疾病筛查血片DNA提取的方法,探索其在甲基化检测中的应用.方法 依据性别随机将新生儿出生时的血片样本20例分为2组：传统法组（10例）、改良试剂盒法组（10例）.从DNA浓度、完整性和是否适应于聚合酶链反应（PCR）研究,对抽提的DNA质量进行评估.进一步对DNA做重亚硫酸盐处理,采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测瘦素（Leptin）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因启动子区域甲基化水平变化.结果 改良试剂盒法抽提的DNA浓度为（5.70 ±0.81） mg/L,显著优于传统法[（3.50±0.45）mg/L]（=2.79,P＜0.05）;生化分析仪分析显示DNA片段完整性更好.琼脂糖凝胶电泳显示可以扩增出有效的18S基因PCR片段,说明抽提的DNA可以用于PCR相关实验研究;MSP结果显示不同血片样本甲基化Leptin、TNF-α基因启动子区域甲基化模式不同.结论 改良试剂盒方法可以简便有效地从干血片中提取DNA,而且抽提的DNA可以较好地用于基因甲基化研究;为从DNA甲基化的角度揭示疾病的发生,提供了新的研究方案和技术方法.