灭螺微生物的选育及其效果观察

从湖南省汨罗市血吸虫病防治研究实验基地的钉螺池中采集土壤样品15份,初筛出4株灭螺活性较强的菌株,分别为B8、B27、B36和B59。灭螺试验结果表明,与细菌发酵液组和菌体悬液组相比,4株菌株的发酵上清液组的灭螺效果最好。B59菌株的发酵上清液分别浸泡钉螺48和72 h后,钉螺的死亡率为73.3%(44/60)和96.7%(58/60),灭螺效果优于其他3株细菌。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,B59菌株的上清液、发酵液和菌体悬液中均无蛋白条带出现。B59菌株为革兰氏阳性杆菌。分子系统进化分析表明B59菌株(GenBank登录号为KP146144)的ITS序列与蜡样芽孢杆菌相关序列(Gen Bank登录号为CP001746)的同源性达100%。

灭钉螺微生物的筛选及功效研究

目的消灭钉螺是防治血吸虫病重要工作,筛选出一种高效、低毒、持久及价廉的杀螺细菌是有意义的探索。方法本文从钉螺孳生的土壤中筛选出具有杀螺作用的强毒菌株,分别制备成细菌发酵液、发酵上清液和菌体悬液进行浸泡杀螺比较,取得了初步结果。结果经初筛,分离出4株(B8、B27、B36、B59)对钉螺具有毒性作用的细菌;灭螺实验结果表明,4株细菌的发酵液、发酵上清液和菌体悬液均显示出不同的毒杀作用,综合比较发现,B59菌株的灭螺效果最好,其次是B27、B36菌株,B8菌株最弱。在细菌发酵上清液各菌株间灭螺效果差异有统计学意义(χ2=21.286,P=0.002);各菌株发酵液的灭螺效果差异也有统计学意义(χ2=17.298,P=0.008);但各菌株菌体悬液之间的灭螺效果未显示统计学差异(χ2=7.579,P=0.271)。结论细菌的代谢产物,尤以B59菌株的发酵上清液有较好的灭螺功效。

激光诱变选育耐高温耐酸乳酸菌

为获得耐温和耐酸性能优良的乳酸菌广泛应用于工业化生产,从不同地方采集的样品中分离筛选出一株耐高温乳酸菌株作为出发菌株,采用He-Ne激光对其进行诱变处理,对激光诱变参数进行优化,考察了突变株的耐温性、耐酸性和遗传稳定性。在波长632.8nm,功率10mW,照射时间15min条件下,经初筛、复筛获得1株耐高温且产酸能力强的优良菌株L-2,70℃培养突变株菌数量是出发菌株的9.4倍,菌数量多达15.56×108个/mL,突变株的酸度值最终可达3.42,且其具有良好的遗传稳定性。

耐高温乳酸菌的分离与鉴定

目的:本实验从不同地方采集的青贮玉米饲料、果渣、牛奶、新鲜的泡菜汁等样品中筛选耐高温乳酸菌。方法:通过初筛、复筛,获得一株耐高温且产酸能力较强的菌株L1;依据伯杰氏系统细菌学手册和乳酸菌分类鉴定的标准和描述,对其进行了生理生化特性鉴定;通过单因素试验和正交试验确定菌株L1的最佳发酵条件。结果:确定其为乳杆菌属德氏乳杆菌;最佳增殖培养基组分为:玉米粉16%+麸皮5%;在α-淀粉酶(5U/g玉米粉、90℃、30min)和糖化酶(150U/g玉米粉、55℃、2h～3h)酶解作用下,最佳发酵条件为:发酵温度60℃,发酵时间36h,pH值3.5。结论:经过初筛、复筛获得一株耐高温菌株L1,通过糖发酵等生理生化试验、正交试验鉴定,最后确定此菌株为乳杆菌属德氏乳杆菌(LacotobaciLLus deLbbruecki)。

聚乳酸/聚乙醇酸新型纳米支架载药体系研制

以具有良好生物降解性、相容性和降解产物无毒性的聚乳酸／聚乙醇酸（PLGA）为原料,通过静电纺丝制备PLGA载盐酸四环素（Tet）纳米纤维膜,制备组织工程支架材料.通过扫描电镜（SEM）和荧光显微镜观察纳米纤维膜的形貌结构及细胞与膜的黏附、生长情况;用紫外光分光光度计检测药物的吸光度,并计算其释药速率;通过改良的Kirby-Bauer方法观察其体外抑菌性能.结果显示：不同载药量纳米纤维膜的平均直径在360～ 470 nm之间,无显著差异;载药量为10％的纳米纤维突释最大,在体外可持续释药27 d以上.体外抗菌活性结果表明纳米纤维膜对金黄色葡萄球菌均有瞬时、长效的抑菌活性.SEM结果显示人成骨样细胞MG-63与纳米纤维膜在支架上共培养后生长良好,表明其细胞相容性好.

医学微生物学多媒体素材库的网络教学应用

根据医学微生物学课程特点,建设医学微生物多媒体素材库包括图谱库、基本理论文本、电子课件、授课录像素材库,案例库,试题题库,文献资料库和常见问题解答等。将多媒体素材库的网络教学应用于医学微生物学理论课、实验课教学和精品课程网站的建设,通过教学资源共享,优化教学过程,激发学生的创造性思维,提高医学微生物学的教学质量和教学效果。

基于16S rDNA序列的1株灭螺微生物的分子鉴定

从湖南省汨罗市血吸虫防治基地土壤中分离得到1株灭螺活性较强的微生物菌株B59,以B59菌株的总DNA为模板,采用细菌16S rDNA通用引物进行PCR扩增并测其核酸序列,得到1条约1 500 bp的片段。通过Blast软件在Gen Bank中进行同源性检索,将其与同源性较高的菌株的ITS序列进行Clustal X序列差异和同源性分析,分别使用MEGA 6.0软件中的邻接法、Phylip软件中的最大简约法及最大似然法构建系统发育树。结果显示,3种方法构建的系统发育树基本一致,B59菌株与Bacillus cereus的亲缘关系最近,聚为一支,相似度达100%。

药学专业医学微生物学课程建设探索

课程建设是教学改革的中心环节,是衡量教学质量的重要标志。根据药学专业特点及培养目标,在微生物学药学课程教学中,进行教材建设,优化教学设计,更新整合教学内容,改进教学方法,优化考核方式,改革实验教学,增加虚拟实验室,以期提高医学微生物课程建设水平,为深化药学类专业的教学改革提供参考。

胃癌组织中PTEN、RUNX3基因甲基化与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨胃癌组织中PTEN、RUNX3基因甲基化与幽门螺杆菌感染的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测100例胃癌患者的癌组织及其对应的癌旁组织中PTEN、RUNX3基因启动子甲基化情况。所有受检者行胃镜前均进行^(13)C尿素呼气试验检测幽门螺杆菌感染情况。结果胃癌组织标本中PTEN基因甲基化率高于癌旁组织,差异有统计学意义(40%vs 4%,P<0.01)。RUNX3基因甲基化率高于癌旁组织,差异有统计学意义(64%vs 8%,P<0.01)。胃癌组织中PTEN、RUNX3基因甲基化表达情况与淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位无关(P>0.05)。RUNX3基因甲基在低分化程度组织和高中分化程度组织中差异有统计学意义(27.1%vs 61.5%,P=0.001),PTEN基因甲基化在低分化程度组织和中高分化程度组织中差异无统计学意义(43.8%vs 42.3%,P=0.522)。PTEN、RUNX3基因甲基化在H.pylori阳性胃癌组与阴性胃癌组中比较差异有统计学意义(55.9%vs 31.3%,47.1%vs 15.6%,均P<0.05)。结论幽门螺杆菌感染增加抑癌基因PTEN和RUNX3的甲基化,与胃癌的发生发展有关。

He-Ne激光诱变选育高温乳酸菌

目的对本实验室保存的L1菌株进行He-Ne激光诱变,以获得一株耐高温且产酸能力强的菌株。方法运用He-Ne激光辐照L1菌株,对激光诱变参数进行优化,考察了突变株的耐温性、耐酸性和遗传稳定性。结果在照射剂量15min,照射功率10mW条件下,选育出一株耐高温且产酸能力强的菌株TL1,70℃培养下突变株菌数量是原菌株的12倍,菌数量最多达1.275×109个/mL,且其具有良好的遗传稳定性。结论He-Ne激光育种技术可以在高温乳酸菌中应用。

医学微生物学混合式教学的体会

医学微生物是基础医学和临床医学之间的一门桥梁课程,在教学中利用多媒体课件组织教学;以问题为核心激发学生主动思维的兴趣;有针对性的引入相应病案,让学生体会该课程的重要性;重视实验课教学,培养学生实事求严谨踏实的科学态度和良好作风;利用网络资源,构建出适应学生身心特征与时代特征的教学模式。总之,在教学中,运用灵活多样的教学方法,优化教学过程,提高教学效果,以达到培养高素质、高层次医学高级人才的培养目标。

网吧键盘鼠标微生物群落分布调查

目的:了解长治市某校附近网吧计算机键盘鼠标微生物分布情况,为预防和控制疾病传播提供理论依据。方法:选取长治市某校附近3家网吧,无菌棉拭子采集180台计算机键盘、鼠标,采用常规培养与鉴定法检测细菌与真菌(90份样品),采用酶联免疫法(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(90份样品)。结果:键盘、鼠标细菌总数平均为151.38cfu/cm2,细菌总数超标率为67.63%,计算机键盘、鼠标上细菌菌群以葡萄球菌属、链球菌属、埃希菌属、芽胞杆菌属为主,检出率分别为100.00%,95.56%,94.44%,51.11%;检出的细菌有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌、咽峡炎链球菌、唾液链球菌、血链球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌等。真菌共检出5属真菌,分别为毛癣菌属、表皮癣菌属、小孢子癣菌属、白假丝酵母和隐球菌属,检出率分别为15.56%,22.22%,8.89%,17.78%,6.67%。乙肝病毒HBsAg检出率为5.56%(5/90)。结论:长治市学校附近网吧卫生状况不容乐观,计算机键盘、鼠标表面存在较多的微生物种群,其中有致病性与条件致病性微生物。计算机键盘、鼠标是一种潜在的疾病传播媒介。

健康新生儿粪钙卫蛋白水平及影响因素

目的 探讨不同因素对健康新生儿粪钙卫蛋白(fecal calprotectin,FC)的影响。方法 收集2017年12月-2018年12月在长治医学院附属和平医院产科出生的66例健康新生儿的第一次胎粪标本,并记录健康新生儿的一般资料。采用ELISA法检测FC水平。结果 对66例健康足月儿的粪便样本进行分析,其中男54例,女12例;顺产28例,剖腹产38例;母乳喂养28例,混合喂养38例,胎龄为39.3(38.3~40.3)周;出生体重为3575(2900~4250) g。男性和女性新生儿胎粪中FC水平中位数分别为712.99(363.24~1049.80)μg/g和666.04(538.12~1250.59)μg/g,FC水平差异无统计学意义(P=0.464);母乳喂养和混合喂养的新生儿胎粪中FC水平中位数为719.48(363.24~1250.59)μg/g和700.04(431.20~910.55)μg/g,FC水平差异无统计学意义(P=0.763);顺产和剖宫产新生儿胎粪FC水平中位数为716.24(363.24~1250.59)μg/g和810.15(431.20~1049.80)μg/g,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 不同性别和喂养方式健康新生儿胎粪中FC水平无影响,不同的分娩方式胎粪中FC水平差异较大。

一种新型壳聚糖分离介质的制备

以壳聚糖为载体、液体石蜡为分散介质、戊二醛为交联剂、Span80为乳化剂,采用反相悬浮法制备壳聚糖微球,以环氧氯丙烷为活化剂、亚氨基二乙酸为螯合配基制备新型壳聚糖分离介质,并研究分离介质制备过程中各参数对壳聚糖分离介质性能的影响。确定最佳活化工艺为:40%DMSO/NaOH(0.6 mol/L)、ECH体积分数10%、反应温度40℃、反应时间4 h,测得环氧基修饰密度可达到0.15 mmol/g(gel);最佳螯合工艺:IDA(0.6 mol/L)/NaOH(2.0 mol/L)混合液,反应时间为6 h,制备的新型壳聚糖分离介质对Cu2+吸附量达到172.787 g/g gel,壳聚糖分离介质含水率为45.60%,孔隙率为69.45%,得到一种新型金属螯合层析填料。

医学微生物学实验教学模式改革的探索与实践

以临床专业学生为研究对象,进行了传统实验教学和新实验教学模式的对比研究。新实验教学模式为"基础性实验—综合性实验—探索性实验"。结果显示新实验教学模式的开展充分调动了学生的学习热情,激发了学生的学习兴趣,培养了学生实践能力和创新精神,提高了医学实验教学质量。

山西汉族人群HLA-DQ基因多态性分析

目的分析山西汉族人群HLA-DQA1、HLA-DQB1基因多态性。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法对100例山西汉族健康人进行HLA-DQA1、HLA-DQB1基因分型,并与国内部分地区汉族人群进行比较。结果①共检出9种HLA-DQA1等位基因型别,分别是:HLA-DQA1*0301/2(24.5%)、*0102(14.0%)、*0103(12.5%)、*0201(12.0%)、*0501(12.0%)、*0104(8.5%)、*0401(8.0%)、*0601(4.5%)、*0101(4.0%)。②在100个健康人中共检出13种HLA-DQB1等位基因型别,分别是:HLA-DQB1*0301/4(21.0%)、*0201(18.5%)、*0303(14.5%)、*0302(12%)、*0603/8(9.0%)、*0501(5.5%)、*0401(4.5%)、*0602(4.5%)、*0604(3.5%)、*0503(2.5%)、*0601(2.0%)、*0502(1.5%)、*0402(1.0%)。③山西汉族HLA-DQ等位基因分布与北方汉族接近,又有其自身特征。结论山西汉族人群HLA-DQ基因具有丰富的多态性,其分布特征与北方汉族人群接近,但又有其独特性。

企业实践教学在医学微生物学实验技术教学中的应用探索

参照实验课程教学经验,制定医学实验技术专业的《医学微生物学实验技术》课程教学计划,增加企业实践教学。建设"双师素质"教学队伍,选取意愿强烈、专业基础扎实的学生参与企业的产品研发和生产活动,培养具有专业性的创新创业精神、良好职业素养的应用型人才。从学校、企业、学生三方面评价企业实践教学效果,在企业实践教学中总结成绩、发现不足,为进一步开展企业实践教学积累经验。

医学微生物学教学模式改革探索

通过对医学微生物学课程教学模式改革,综合应用多媒体教学、网络教学、PBL教学、双语教学等教学手段和教学模式,改革实验方法,改变考核形式,激发了学生的学习兴趣,提升了创新能力,提高了教学质量。

微生物实验教学改革初探

文章从当前微生物实验教学中存在的问题出发,以提高实验教学质量为目的,围绕课程设置、教学方式、教学内容、考核方式四个方面进行了教学改革初探,旨在激发学生的学习兴趣和主动性、培养学生的科技创新能力,为临床实践与科研工作培养全面创新人才。

基于分枝杆菌感染免疫相关实验的微生物学毕业设计带教体会

毕业设计是大学教育过程中重要的实践教学环节。通过带教与分枝杆菌感染免疫相关的微生物学毕业设计,针对如何充分发挥学生主动性,从课题设计、实践操作、论文写作等多方面进行了心得探讨,以期提高学生的科研创新能力,激发科研兴趣,培养创新型科研人才。