基因编辑技术在现代医学中的应用与挑战

基因编辑技术已经成为现代医学领域中引人注目的工具,其中RNA干扰(RNA interference,RNAi)和CRISPR-Cas9系统是近年来发展最迅速的基因编辑技术。RNAi通过介导特定RNA分子的降解或抑制来实现基因沉默,而CRISPR-Cas9系统可以剪切和编辑特定的DNA序列。RNAi和CRISPR-Cas9系统已经在多个领域展示出了巨大的潜力,同时它们在应用中也面临着一些挑战。本文介绍RNAi和CRISPR-Cas9系统的作用机制,简述了两种基因编辑技术在不同领域的应用,并对其面临的挑战和应用前景进行展望。

饥饿、糖尿病和肥胖状态对小鼠肝脏SOCS2基因表达的影响

目的确定小鼠肝脏SOCS2基因在饥饿、糖尿病和肥胖状态下的表达水平,并初步研究SOCS2对糖异生的影响。方法动物分3组:C57BL/6J小鼠、对照组(饱食)和实验组(饥饿24 h);糖尿病模型小鼠db/db及对照小鼠db/m饱食;肥胖模型小鼠ob/ob及其对照C57BL/6J小鼠(饱食)。处死小鼠后提取肝脏RNA做反转录PCR,荧光实时定量PCR检测小鼠肝脏SOCS2及糖异生相关基因在3组小鼠中的表达水平;使用腺病毒表达系统在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,Western blot检测SOCS2蛋白的表达,葡萄糖生成实验检测糖输出。结果饥饿使C57BL/6J小鼠肝脏中SOCS2 mRNA水平下调,db/db和ob/ob小鼠肝脏SOCS2基因表达比其对照小鼠均明显下降(P<0.05),调节糖异生的关键基因PGC-1α、PEPCK和G6Pase的mRNA水平均上升。在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2,得到大小为Mr 23 000的蛋白,糖输出受到明显抑制。结论初步认定SOCS2可抑制C57BL/6J小鼠原代肝细胞糖异生,可能是治疗糖尿病的一个新靶点。

SOCS2研究进展

细胞因子信号转导抑制因子2(suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)是SOCS家族中的一员,参与调节包括个体生长、代谢、骨形成、肿瘤发生、机体免疫在内的许多生理和病理过程。本文主要从SOCS2的结构、自身活性的调节、在信号转导中的生物学功能以及临床研究等方面,对近年来发表的SOCS2相关文献做一简要概述。

课程思政建设翻转课堂在分子生物学教学中的实践

目的为探讨课程思政建设翻转课堂教学模式在分子生物学课程中的应用。方法以济宁医学院2019级临床医学本科专业8个班学生为研究对象进行比较研究。将学生分为对照组实施课程思政建设传统教学法和实验组实施课程思政建设翻转课堂教学法。通过自设调查问卷、使用“大学生自主学习能力测评量表”和比较课程考核成绩评价学生对教学模式的满意程度、了解学生自主学习能力的改善情况及评价教学效果。结果实验组在掌握课堂知识、激发学习兴趣、增强分析解决问题能力、提高团队协作能力、课堂参与度及思政建设对未来职业规划指导方面的评价显著高于对照组(P<0.05)。实验组自主学习能力有明显改善,成绩高于对照组(P<0.05)。结论在分子生物学课程教学中,课程思政建设翻转课堂可提高学生成绩,有利于建设自主学习能力的培养。

新媒体视角下高校图书馆阅读推广策略研究

阅读是人们获得知识的重要途径,也是知识传承的一种手段。高校图书馆是阅读推广主阵营,在引导读者阅读方面有着不可替代的作用。自步入新媒体时代后,传统的纸质书刊深阅读逐步被数字化的浅阅读所取代,给高校图书馆的阅读推广带来巨大冲击。本文主要对新媒体视角下高校图书馆阅读推广的特征及作用进行介绍,并对阅读推广问题进行探讨,基于此提出阅读推广可应用的新媒体技术手段以及具体的阅读推广策略,以期可为阅读推广工作的开展提供有效参考。

CaMK Ⅱ/HDAC4途径参与雷帕霉素对学习记忆的调节作用

雷帕霉素(rapamycin,Rap)在多种生物中有抗衰老和增强学习记忆的作用。HDAC4是Ⅱα类组蛋白去乙酰化酶(classⅡαhistone deacetylases),参与神经细胞的记忆形成及其他的功能。然而,二者在功能上的联系及雷帕霉素在学习记忆中的作用机制尚未见报告。本研究证明,HDAC4作为雷帕霉素信号途径的下游底物,雷帕霉素可通过依赖钙-钙调蛋白的蛋白激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)/HDAC4途径调控学习记忆。小鼠水迷宫实验显示,雷帕霉素能有效改善D-半乳糖(D-galactose,Dgal)所致的学习记忆障碍,增强D-半乳糖诱导衰老小鼠和普通小鼠的学习记忆能力。已知Ca MKⅡ可修饰HDAC4的246位丝氨酸磷酸化。蛋白质印迹检测显示,雷帕霉素作用后的小脑海马细胞HDAC4(Ser246)和Ca MKⅡ(Thr286)磷酸化水平降低,而总蛋白水平无明显变化。D-半乳糖诱导衰老小鼠脑海马细胞HDAC4(Ser246)和Ca MKⅡ(Thr286)磷酸化水平较对照组无明显变化。本实验结果结合以往的研究揭示,雷帕霉素通过抑制其靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)而减少Ca MKⅡ磷酸化水平,低磷酸化的Ca MKⅡ失去活性不能催化HDAC4磷酸化,HDAC4的磷酸化水平影响其定位和功能。本研究证明,Ca MKⅡ/HDAC4为雷帕霉素调控学习记忆的一个可能途径,而HDAC4调控学习记忆的机制还需要进一步研究。

WPBL教学法在生物化学教学中的应用

目的:探讨教学法在临床专业生物化学教学中实施的效果。方法:在生物化学教学中进行WPBL教学法和传统教学法的对比研究,通过问卷调查评价学生的学习态度和满意程度,并通过闭卷考试评价教学效果。结果:WPBL教学组的问卷调查显示,92%的学生对WPBL教学法持肯定态度,糖代谢和蛋白质代谢两章的考试成绩明显高于对照组(P=0.005和P=0.002)。结论:WPBL教学法有助于学生多方面能力的培养,提高了生物化学的教学质量。

Par6A cDNA的克隆与表达

目的探讨Par6A基因的克隆表达及功能。方法用RT-PCR从大鼠L6骨骼肌细胞扩增出Par6A的cDNA,利用分子克隆的方法构建Par6A的克隆载体以及真核表达载体,在293细胞中进行表达,通过免疫共沉淀初步研究Par6A的功能。结果成功扩增出Par6AcDNA,片断大小约1 kb,并构建了真核重组表达质粒pDsRed-Express-N1-Par6A。在转染293ET细胞24 h后,荧光显微镜下可见红色荧光的表达。免疫共沉淀实验表明Par6A与PKCζ存在相互作用。结论成功扩增出大鼠骨骼肌的Par6AcDNA,为研究Par6A的相关功能奠定了基础。

翻转课堂+虚拟仿真实验在临床生物化学检验实验教学中的应用--基于新冠肺炎疫情时期的教学实践

为探索一种提升学生综合实践能力的临床生物化学检验实验的教学方法,课题组在济宁医学院在线教育中心自建线上课程提供学习资源,将教学病例引入临床生物化学检验实验教学,在医学检验技术专业学生中实施“翻转课堂+虚拟仿真”相结合的实验教学研究,结果显示学生对翻转课堂+虚拟仿真实验的教学方法表示认可,认为该教学方法实现了理论知识与实验技术的有效结合,激发学习兴趣,启发学生发现问题,解决问题的能力。该教学方法实现了对学生综合能力的提升,可为后疫情时代背景下医学相关课程的实验教学提供参考。

Sirt1基因的研究进展

Sirt1是在哺乳动物细胞中发现的与酵母沉默信息调节因子Sir2同源性最高的同系物,在成熟组织中广泛表达,在胚胎早期和生殖细胞中含量丰富,且与众多基因的转录调控、能量代谢及细胞衰老过程的调节有关。Sirt1可促进脂质动员和肝脏糖异生,能调控胰岛β细胞的胰岛素分泌。另外,Sirt1还是内源性的凋亡抑制因子。随着对其研究的深入,Sirt1将有望在新药作用靶点及疾病治疗方面发挥作用。

甲基化作用与肿瘤

对表观遗传学进行的研究表明,表观事件中甲基化的发生与肿瘤的发生发展密切相关。表观遗传调控主要通过DNA甲基化和组蛋白甲基化修饰控制细胞的增殖和分化、维持机体的稳定,但甲基化的异常改变常导致肿瘤的发生、发展。本文主要综述有关肿瘤基因组和组蛋白甲基化的理论研究、检测方法及甲基化在临床上作为生物学标记和药物靶点的应用。

KLF9基因腺病毒载体的构建及其抗ROS功能

目的构建及鉴定KLF9基因过表达的腺病毒载体，初步研究KLF9在对抗反应活性氧方而的功能。方法克隆KLF9过表达质粒，定向克隆人穿梭载体pAdTrack—CMV，PmeI酶切线性化，转化E．coli．BJ5183（含腺病毒载体pAdEasy-1）感受态细菌，产生重组腺病毒载体。重组载体经过卡那霉素抗性筛选和限制性内切酶分析确重组后，再用Pac I线性化重组质粒，同收，转染293A细胞，7—12d包装产生病毒颗粒。利用H2O2和过表达KLF9的腺病毒处理体外培养的C57BIJ6J小鼠原代肝脏细胞，实时定量PCR检测KLF9和抗ROS基因（CAT、SOD2和GPx1）的表达。结果H2O2可以刺激C57BIJ6J小鼠原代肝脏细胞KLF9和抗ROS基因的表达上调（P〈0．05）。定虽PCR以及Western blot结果显示成功包装过表达KLF9腺病毒，感染效率达90％以上。过表达KLF9可以上调抗ROS基因的表达水平（P〈0．05）。结论初步认定KLF9基因可参与C57BL/6J小鼠原代肝脏细胞中抗ROS基因的调节。

加拿大高校数字人文项目分析与启示

文章分析加拿大高校数字人文研究项目,以期为我国机构开展数字人文项目提供参考借鉴。通过网站调研、定量分析法,对加拿大十所高校数字人文中心项目进行调研,对项目依托机构、团队、研究领域等情况进行分析,发现加拿大高校数字人文项目存在的热点研究领域,在此基础上对这些领域特征及涉及的典型活动进行了梳理分析。鉴于此,提出注重项目团队建设、发挥LAM在数字人文项目开展中的优势、注重项目的可持续性,注重产学研一体化研究的建议。

“双一流”高校图书馆红色文献资源推广与开发实践研究

高校图书馆作为传承中华优秀文化传统以及开展校园文化的重要场所,亦承担着传承红色文化的重任。通过网络调研的方式,对国内42所“双一流”高校图书馆的红色文献资源推广及建设现状进行调研,发现目前高校图书馆红色文献资源推广存在“嘉年华”现象,推广活动深度不够,资源建设力度不够,合作开展深度和广度都不够,高校图书馆应该创新推广形式,对红色文献资源进行常规化推广,加强机构合作,注重红色文化资源的完整性,运用数字人文技术、建立专业研究团队,深入挖掘红色内涵,助力学校教学科研,促进红色文献资源共建共享。

双环己酮草酰二腙分光光度法测定火法冶炼镍基体料中铜

提出了一种新型材料——火法冶炼镍基体料中铜的分光光度测定方法。在pH8.9～9.4氯化铵-氢氧化铵缓冲溶中双环己酮草酰二腙(BCO)与Cu2+生成稳定的螯合物,螯合物的最大吸收波长位于600nm处。基体铁、镍以及铬、钴对铜的测定有干扰,但是,在试样用盐酸、硝酸和氢氟酸溶解和盐酸挥铬后,可以通过基体匹配和以柠檬酸隐蔽的方法消除。用本文确定的方法测定了4个实际样品中铜,相对标准偏差在1.4%～4.0%之间。采用原子吸收光谱法进行对照分析,同时选择了3个其他实验室进行验证分析,铜的结果基本一致。

四年制高职本科课程教学的探索与实践——以无锡职业技术学院四年制高职本科项目为例

高职本科的课程教学,既要注重基础理论教学,更要注重实践教学和技能培养,突出实践性、应用性和职业性。本文以无锡职业技术学院与江苏大学联办的四年制高职本科项目为例,对高职本科的课程教学实践进行分析与探索。

基于工程教育认证的高职本科专业人才培养方案改革探究——以无锡职业技术学院四年制高职本科项目为例

高职本科作为一种全日制本科学历教育,要提升人才培养质量和专业办学水平,实现工程教育国际互认,就要积极推进高职本科专业工程教育专业认证,建立适应国际认证要求的人才培养体系。改革专业人才培养方案是专业建设的基础性工作,高职本科专业应在坚持“职业性”原则的基础上,融入专业认证标准,从培养目标、毕业要求、课程体系等方面对人才培养方案进行优化改革。

云计算对高职院校信息服务的影响及应用对策研究

随着高科技技术的不断发展,现如今“互联网+”技术已经广泛应用于我们的日常生活,给社会生活带来了极大地便利,对各行各业也产生了深远的影响。对于高职院校信息服务来讲,为了促进学校的长远发展,形成与本科院校的竞争力,就必须紧跟时代的发展,积极响应“互联网+”技术,改变传统的教学现状,在云计算模式下,实现教学资源的合理分配,满足学生的学习需求。从云计算的含义、优势和云计算在高职院校信息服务中所面临的问题及解决措施进行分析,分析当前形势下,云计算对高职院校信息服务产生的影响。

4种花茶Vc、游离氨基酸含量及亚硝酸盐清除能力的研究

目的:研究4种花茶中Vc、游离氨基酸含量及其对亚硝酸盐的清除能力,为花茶产品的开发及保健功能的研究提供相关的实验依据。方法:采用还原钼蓝法测定花茶中Vc含量;采用茚三酮显色法测定花茶中游离氨基酸含量;采用盐酸萘乙二胺法研究花茶浸泡液对模拟人体胃液条件(pH3.0,37℃)下的亚硝酸盐清除能力。结果:Vc含量:玫瑰花>桃花>荷叶>薄荷;游离氨基酸含量:桃花>荷叶>玫瑰花>薄荷;对亚硝酸盐的清除能力:玫瑰花>桃花>荷叶>薄荷。结论:4种花茶中以玫瑰花的Vc含量最高(42.15mg/g)和亚硝酸盐清除能力(32.50%)最强,桃花的游离氨基酸含量最高(35.51mg/g)。花茶不仅可以美容养颜,还具有保健功能。

Δ6-去饱和酶和C20-延伸酶抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖的研究

为探讨外源基因Δ6-去饱和酶与C20-延伸酶基因对肿瘤细胞增殖的抑制作用,本研究选取了微拟球藻(Nannochloropsis oculata)作为研究对象,对其Δ6-去饱和酶与C20-延伸酶基因进行了逆转录PCR扩增,并将获得的上述2个基因的编码区与真核表达质粒pEGFP-C3构建重组表达质粒,转染乳腺癌细胞MCF-7,以pEGFP-C3为对照,培养48h后,在荧光显微镜下观察转染细胞中的GFP荧光信号以判断重组质粒表达情况,荧光实时定量PCR分析转染细胞中外源基因的转录水平,MTT比色法检测外源基因对MCF-7细胞的增殖抑制程度,高效气相色谱检测转染细胞中多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids,PUFAs)的含量变化。结果表明2个外源基因均可在MCF-7细胞中表达,并能有效地抑制MCF-7细胞的增殖,改变MCF-7细胞中2种PUFAs的相对含量,且n-3PUFAs与n-6PUFAs的比值升高。推测过表达的Δ6-去饱和酶与C20-延伸酶可能通过改变乳腺癌细胞MCF-7细胞膜中PUFAs的相对含量,达到抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖的效果。