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猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析
被引量:
3
1
作者
吕茂杰
冯力
+6 位作者
时洪艳
陈建飞
孙东波
申识川
崔小辰
王承宝
范秀萍
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期691-696,共6页
以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒CV777株核衣壳蛋白(N)基因的阳性质粒pMDT-18-N为模板,用含有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增获得N基因,该PCR产物经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)中...
以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒CV777株核衣壳蛋白(N)基因的阳性质粒pMDT-18-N为模板,用含有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增获得N基因,该PCR产物经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经过酶切鉴定和测序鉴定,将构建的重组质粒命名为pcD-NA3.1(+)-N,且未发现碱基的缺失和插入。用脂质体法将pcDNA3.1(+)-N转染Vero E6细胞,在48 h后,以针对猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的鼠源`多抗血清进行Western blot、免疫荧光检测,并运用共聚焦显微镜分析N蛋白的亚细胞定位。结果表明N基因能在真核细胞Vero E6中正确表达,共聚焦分析结果表明N蛋白在细胞质和细胞核中定位。
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关键词
猪流行性腹泻病毒
核衣壳蛋白
真核表达
亚细胞定位
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职称材料
题名
猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析
被引量:
3
1
作者
吕茂杰
冯力
时洪艳
陈建飞
孙东波
申识川
崔小辰
王承宝
范秀萍
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室
东北农业大学
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期691-696,共6页
基金
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所院所长基金
文摘
以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒CV777株核衣壳蛋白(N)基因的阳性质粒pMDT-18-N为模板,用含有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增获得N基因,该PCR产物经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经过酶切鉴定和测序鉴定,将构建的重组质粒命名为pcD-NA3.1(+)-N,且未发现碱基的缺失和插入。用脂质体法将pcDNA3.1(+)-N转染Vero E6细胞,在48 h后,以针对猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的鼠源`多抗血清进行Western blot、免疫荧光检测,并运用共聚焦显微镜分析N蛋白的亚细胞定位。结果表明N基因能在真核细胞Vero E6中正确表达,共聚焦分析结果表明N蛋白在细胞质和细胞核中定位。
关键词
猪流行性腹泻病毒
核衣壳蛋白
真核表达
亚细胞定位
Keywords
porcine epidemic diarrhea virus
nucleocapsid protein
eukaryotic expression
subcellular localization
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析
吕茂杰
冯力
时洪艳
陈建飞
孙东波
申识川
崔小辰
王承宝
范秀萍
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
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