UPLC-FLD法测定全血中原卟啉和锌原卟啉

目的建立全血中原卟啉和锌原卟啉的超高效液相色谱-荧光测定方法。方法全血加入间卟啉Ⅸ-二盐酸盐内标,经纯水稀释后,采用二甲基亚砜-丙酮液液萃取进行净化,经C_(18)色谱柱分离,双通道荧光检测器检测,内标法定量。结果原卟啉和锌原卟啉的线性范围均为0.1~5.0μmol/L,相关系数均为0.9995;方法的检出限分别为0.02μmol/L和0.03μmol/L,定量限分别为0.06μmol/L和0.09μmol/L;原卟啉和锌原卟啉在低、中、高三个浓度加标时,方法的加标回收率分别为85.2%~94.7%和84.8%~92.8%;批内精密度(RSD)分别为2.8%~5.3%和2.7%~6.1%,批间精密度(RSD)分别为3.4%~6.3%和3.2%~7.1%;对30份血样中原卟啉与锌原卟啉检测结果分别为:0.1~0.5μmol/L与0.4~1.2μmol/L。结论本方法适用于全血中的原卟啉和锌原卟啉的同时测定。

氯乙烯职业暴露与DNA加合物εdA、εdC水平表达相关性研究

目的研究氯乙烯职业接触人群的DNA损伤情况。方法以氯乙烯车间工人为暴露组,行政管理和后勤人员为对照组。每位研究对象采集4 mL静脉血全血,运用超高效液相串联质谱检测研究对象血样中εdA、εdC两种DNA加合物的含量,应用单因素方差和多因素方差分析性别、年龄、饮酒、吸烟、氯乙烯暴露情况等因素对εdA和εdC含量的影响。结果暴露组血样中εdA、εdC的含量分别为:(3.38±2.58) pmol/mg,(2.37±1.84) pmol/mg;对照组血样中εdA、εdC的含量分别为:(1.39±1.20) pmol/mg,(0.83±0.73) pmol/mg,氯乙烯暴露组血样中εdA和εdC水平均高于对照组的水平差异有统计学意义(P<0.05)。年龄、吸烟、饮酒对研究对象血样中εdA含量的影响差异无统计学意义(P> 0.05)。年龄、吸烟对研究对象血样中εdC含量的影响差异无统计学意义(P> 0.05),饮酒者血样中εdC含量高于非饮酒者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论氯乙烯职业暴露水平低于我国职业接触限值(PC-TWA为10 mg/m^3)的剂量水平时,暴露组的εdA和εdC含量显著高于对照组的水平。即低暴露水平的氯乙烯也可引起DNA加合物的增加,导致DNA损伤,增加了接触者的患癌风险。

UPLC-MS/MS法测定尿液中反-反式粘糠酸

目的建立尿液中反—反式粘糠酸的超高效液相色谱串联质谱测定方法。方法尿液加入同位素标记的反—反式粘糠酸内标,采用强阴离子固相萃取柱进行净化,经Shield RP18色谱柱分离,三重四级杆质谱检测,内标法定量。结果反—反式粘糠酸的线性范围为20.0~1000.0μg/L,相关系数为0.9997;方法的检出限和定量限分别为1.10μg/L和3.30μg/L;加标浓度为50.0、200.0、800.0μg/L时,方法的加标回收率为98.3%~101%;批内精密度(RSD)为0.88%~2.79%,批间精密度(RSD)为3.38%~5.63%。结论本方法适用于尿液中反—反式粘糠酸的测定。

豫南地区地表水多环芳烃污染分析

目的研究豫南信阳、周口和驻马店地区水域多环芳烃的污染现状。方法于2011年初采集三地区的地表水样156份,参照国家环境保护标准《水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法》(HJ 478-2009),进行16种多环芳烃项目检测,并对结果进行分析研究。结果豫南信阳、周口和驻马店三地区水域中存在多环芳烃污染现象。结论豫南三地区水域水质状况不佳,需要继续进行监测和控制。

柴油机尾气和噪声联合暴露致大鼠听力损失的实验研究

目的探讨柴油机尾气和噪声联合暴露对SD大鼠听力损失的影响。方法24只SD大鼠随机分为4组,每组6只,分别为柴油机尾气暴露组、噪声暴露组、柴油机尾气和噪声联合暴露组、对照组。在暴露结束后第4天,进行听性脑干反应测试。取耳蜗固定后,进行扫描电镜检查和免疫荧光染色,观察耳蜗内外毛细胞形态变化和带状突触损伤的情况。结果各实验组大鼠均出现不同程度的听力损失,听力阈值位移:联合暴露组(43.33±8.31)dB SPL>噪声暴露组(39.25±9.05)dB SPL>柴油机尾气暴露组(32.83±13.22)dB SPL>对照组(27.33±12.90)dB SPL,并且观察到联合暴露组大鼠出现不同程度的耳蜗毛细胞倒伏粘连,带状突触减少。对照组耳蜗带状突触平均荧光表达强度最高,柴油机尾气暴露组、噪声暴露组依次降低,柴油机尾气和噪声联合暴露组最低,对照组与各暴露组耳蜗带状突触平均荧光表达强度差异均有统计学意义(F=94.96,P<0.05)、柴油机尾气暴露组与噪声暴露组、柴油机尾气暴露组与联合暴露组耳蜗带状突触平均荧光表达强度差异均有统计学意义(q=5.484,8.767,P<0.05),噪声暴露组与联合暴露组比较差异无统计学意义(q=3.282,P>0.05)。结论柴油机尾气和噪声联合暴露对听力损失有增强作用,主要表现在耳蜗外毛细胞和耳蜗突触严重受损。

尿中苯乙醛酸和苯乙醇酸测定的高效液相色谱法

目的对尿中苯乙醛酸和苯乙醇酸的高效液相检测标准方法进行修订。方法通过试验对原高效液相色谱方法进行评估，比较ACQUITYUPLCBEHC8,C18、Phenyl（50mm×2．1mm×1．7μm）色谱柱，并对定量方法、方法检出限、定量下限及方法稳定性进行研究。结果采用苯基（BEHPhenyl）色谱柱分离，内标工作曲线定量，苯乙醇酸和苯乙醛酸内标工作曲线回归方程分别为y=3．6607x＋0．0663和y=5．1612x-0．0073；线性相关系数分别为0．9993和0．9991，线性范围分别为0．10～1．00mg／ml和0．04～0．40mg／ml；苯乙醛酸回收率为91．6％～97．1％，批内和批间精密度分别为1．7％-2．4％、0．9％～4．6％，方法检出限1．1mg／L，定量下限为3．7mg／L；苯乙醇酸回收率为84．3％-99．0％，批内和批间精密度分别为0．5％-1．9％、1．1％-1．8％，方法检出限5．4mg／L，定量下限为17．9mg／L。结论该方法采用苯基修饰色谱柱，明确了定量下限，提高了方法稳定性、检测准确度和检出限，满足职业人群生物样品的检测。

职业卫生生物监测方法检出限和定量限计算方法探讨

目的探讨职业卫生生物监测方法检出限和定量限的计算方法。方法通过IUPAC、NIOSH、OSHA三种不同方法分别计算苯乙醛酸和苯乙醇酸的检出限和定量限。结果采用IUPAC、NIOSH、OSHA三种不同方法计算的苯乙醛酸和苯乙醇酸的检出限和定量限各不相同。结论计算职业卫生生物监测方法检出限和定量限时，为保证检出限附近的检出率及定量限附近有75％以上的回收率应采用标准曲线法，通过一系列浓度加标的方式来计算检出限和定量限。

苯甲醛衍生-高效液相色谱法测定工作场所空气中肼

目的建立工作场所空气中肼的苯甲醛衍生-高效液相色谱测定方法。方法采用硫酸溶液浸渍过的玻璃纤维滤膜采集空气样品,经磷酸二氢钠-乙二胺四乙酸二钠缓冲液洗脱,体积分数为1.00%的苯甲醛-乙腈溶液衍生,并经C18液相色谱柱分离,二极管阵列检测器检测。结果肼在质量为12.50～150.00μg时线性关系良好,相关系数为0.999 7。肼的平均洗脱效率为89.28%～95.52%,批内、批间相对标准偏差分别为1.09%～1.86%和3.63%～4.00%;样品在4℃冰箱内至少可保存25 d。结论本方法灵敏度高,精密度好,样品前处理简单,可用于工作场所空气中肼的测定。

高效液相色谱-质谱法测定尿中苯巯基尿酸方法改进

目的优化高效液相色谱-质谱测定尿中苯巯基尿酸(SPMA)方法中的萃取和定量方法。方法尿液采用体积分数50.0%的硫酸进行水解;水解液采用固相萃取柱进行净化,经C18色谱柱分离,串联质谱检测。以同位素标记的SPMA作为内标,以内标工作曲线法定量。结果SPMA的线性范围为0.50~50.00μg/L,相关系数为0.9998;方法的检出限和定量限分别为0.05和0.17μg/L;加标回收率为97.0%~102.0%,批内相对标准偏差(RSD)为0.6%~1.0%,批间RSD为1.7%~6.5%。采用本方法检测,职业性苯接触组人群尿中SPMA质量浓度高于无职业接触组(中位数:2.81 vs 0.28μg/g肌酐,P<0.05)。结论与国家标准方法比较,本方法采用固相萃取和内标法定量,改进后的方法有利于消除基质效应,准确度和精密度好,适用于尿中SPMA的测定。

超高效液相色谱串联质谱检测生物样本中多环芳烃

目的建立高灵敏度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,用于检测生物样本中痕量多环芳烃(PAHs),包括血浆中3种致癌性多环芳烃苯并(a)芘(BaP)、苯并(g,h,i)苝[B(g,h,i)P]、二苯并(a,h)蒽[DB(a,h)A],及尿液中三种羟基多环芳烃代谢产物2-羟基萘(2-OHN)、2-羟基芴(2-OHF)、1-羟基芘(1-OHP)。方法血浆经饱和氯化钠过夜盐析,尿液经β-葡糖苷酸酶水解,固相萃取后,用UPLC-MS/MS分析。结果血浆中3种致癌性多环芳烃在0.5～100μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.99,加标回收率为87%～124%,日内精密度为0.91%～10.31%,日间精密度为4.59%～15.83%,血浆中3种致癌性多环芳烃BaP、B(g,h,i)P、DB(a,h)A的检出限分别为0.33、0.41和0.65μg/L;尿液中3种羟基多环芳烃代谢产物在0.5～100μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.99,加标回收率为81.8%～110.5%,日内精密度为1.28%～8.56%,日间精密度为6.87%～10.91%,尿液中3种羟基多环芳烃代谢产物2-OHN、2-OHF、1-OHP的检出限分别为0.17、0.03和0.04μg/L。结论该方法生物样本用量少,回收率较高,重现性好,检出限低,适用于人群多环芳烃的生物监测。

癌症高发区致癌性多环芳烃的生物监测

目的对河南省沈丘县人群多环芳烃(PAHs)暴露水平进行生物监测,评价PAHs暴露与消化道癌症的关联性。方法采用病例对照研究方法,分别募集自河南省沈丘县肿瘤高聚集区和低聚集区的41例食管癌、26例胃癌、17例肝癌患者和19例健康对照,采用固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法检测血中3种致癌性多环芳烃苯并(a)芘(BaP)、苯并(g,h,i)苝[B(g,h,i)P]、二苯并(a,h)蒽[DB(a,h)A]暴露水平和尿中2-羟基萘(2-OHN)、2-羟基芴(2-OHF)、1-羟基芘(1-OHP)3种羟基多环芳烃代谢水平,用SPSS17.0进行数据分析。结果 66.9%的研究对象尿中1-OHP高于一般居民生物暴露限值(0.11μmol/mol Cr)。肿瘤高聚集区和低聚集区人群间多环芳烃暴露水平差异无统计学意义(P>0.05);高、低聚集区病例组血中B(g,h,i)P暴露水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着体内B(g,h,i)P暴露水平的增加,消化道癌症的发病风险增加。结论该地区研究人群的PAHs暴露水平普遍较高,食管癌、胃癌及肝癌的发病可能与某些致癌性多环芳烃的暴露有关,需要进一步研究进行证实。

低浓度苯接触工人尿中代谢产物与苯暴露浓度相关性分析

目的分析低浓度苯接触工人尿中代谢产物苯巯基尿酸(s-phenylmercapturic acid,SPMA)和反-反式黏糠酸(trans,trans-muconic acid,t,t-MA)与苯暴露浓度的相关性。方法2018年9月—2021年9月选择山东省某鞋厂和篮球厂共117名苯接触工人作为接苯组,80名鞋厂和食品厂不接触苯的工人为对照组。通过被动个体采样方式进行工人苯暴露浓度监测,收集工人班后尿并检测尿中SPMA和t,t-MA浓度。分析内、外暴露指标的相关性及相对内暴露指数(relative internal exposure index,RIE index)随空气苯暴露浓度的变化趋势。结果苯接触组工人空气苯浓度在1.00~107.40 mg/m^(3)之间,M(P25,P75)为4.14(2.71,6.63)mg/m^(3),71%的苯接触组工人空气苯浓度低于我国工作场所空气中苯时间加权平均容许浓度限值(6.00 mg/m^(3)),对照组工人空气苯浓度低于检出限值。苯接触组工人尿中代谢产物SPMA浓度、t,t-MA浓度与对照组尿中相应苯代谢产物浓度的差异均有统计学意义(均P<0.05)。SPMA和t,t-MA浓度与空气苯浓度呈正相关(r=0.770、0.680,均P<0.05),低浓度苯暴露组(≤4.14 mg/m^(3))的SPMA浓度增长幅度及其RIE随着苯暴露浓度的增加呈上升趋势(r=0.350,P<0.05);高浓度苯暴露组(>4.14 mg/m^(3))的SPMA浓度增长幅度及其RIE随着苯暴露浓度的增加而趋于稳定(r=0.160,P>0.05)。t,t-MA浓度的增长幅度及其RIE随苯暴露浓度的增加呈现下降趋势(r=-0.440,P<0.05)。结论在低浓度苯暴露时(≤4.14 mg/m^(3)),SPMA可随苯浓度的增加而迅速增长,增长幅度高于t,t-MA。SPMA可作为敏感的内暴露生物标志物用于低浓度苯的生物监测。

长工时与DNA加合物εdA、εdC水平表达相关性研究

目的研究工作时长对护士外周血中Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平的影响。方法本研究采用横断面研究方法,于2022-2024年期间募集来自广东省清远市、湖南省长沙市、新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市以及重庆市等四个地区共12家医院的女性护士为研究对象。研究对象纳入标准:(1)身体健康,无基础疾病史;(2)在岗临床注册护士,且从事护理工作一年以上;(3)年龄不超过55岁;(4)研究对象无长期吸烟史与饮酒史;(5)月经周期正常;(6)研究对象同意参加本研究,并自愿签署知情同意。排除标准:(1)孕产妇;(2)有乳腺癌患病史,或有直系亲属(父母、子女及兄弟、姐妹)乳腺癌家族史;(3)临床诊断的糖尿病、高血压、高血脂、心血管系统疾病、其他类型肿瘤、肾脏疾病、慢性疼痛;(4)过去三个月内服用过含褪黑素的补剂、免疫抑制剂、激素类药物、降糖药物、降脂药物或类固醇药物、抗氧化补充剂;(5)ICU、放射科或急诊科;(6)长期病假者。通过问卷现场调查,收集研究对象工作时长、年龄、工龄、健康特征等基本情况。按照工作时间进行分组,包括标准工作时长组35~40 h/周25人,41~48小时/周36人、≥49小时/周30人的四个组,共纳入研究对象91人。采集每位研究对象的班前空腹静脉血5 ml,采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS-MS)方法检测研究对象外周血中Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平。通过单因素分析探索年龄、工龄、健康特征对Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平的影响;利用多元线性回归模型检验在平衡可能影响加合物水平的混杂因素后,护士工作时长与Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平的关联性。结果与标准工作时长组(35~40 h/周)相比,≥49 h/周组研究对象血中εdA和εdC加合物水平显著升高(ZεdC=2.424,ZεdA=1.776;P<0.05);研究采取多元线性回归,在平衡了可能的混杂因素(年龄、工龄、健康特征等)后,发现与标准工作时长组(35~40 h/周)相比,工作时长≥49 h/周组外周血中Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平显著升高(β=0.70、0.41,P<0.05)。结论长工时是外周血中Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平上升的危险因素之一,当工作时长超过标准工作时长(35~40 h/周)时,特别是工作时长≥49 h/周时,护士外周血中Etheno-DNA加合物(εdA、εdC)水平显著升高。