黑色素纳米颗粒-丝素蛋白-单宁酸水凝胶的制备及其抗氧化性能检测

背景在牙周软组织再生过程中,由于各种原因引起的氧化应激状态常导致组织修复迟滞,而传统修复材料对此疗效不佳。制备具有抗氧化功能的水凝胶材料,有希望为牙周软组织生物材料修复提供更多的选择。目的制备黑色素纳米颗粒(melanin nanoparticles,MNPs)-单宁酸(tannic acid,TA)-丝素蛋白(silk fibroin,SF)复合水凝胶,检测MNPs含量对水凝胶微观形貌、抗氧化性能和细胞相容性的影响。方法制备MNPs,将不同浓度的MNPs加入到SF,加入TA化学交联,得到MNPs-SF-TA复合水凝胶。根据水凝胶中MNPs浓度分为实验组MNPs1-SF-TA(1 mg/mL)、MNPs2-SF-TA(2 mg/mL)、MNPs4-SF-TA(4 mg/mL)和对照组SF-TA(0 mg/mL)。通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察水凝胶表面形貌;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)法、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]法和Cu2+法检测其自由基清除能力和抗氧化能力;采用CCK-8和Calcein-AM/PI活/死细胞荧光染色法检测该水凝胶材料的细胞相容性。结果成功制备了MNPs和MNPs-SF-TA复合水凝胶。DPPH、ABTS及Cu2+法均显示MNPs-SF-TA水凝胶对自由基的清除能力和抗氧化能力随MNPs浓度的升高而提高(P<0.05),4 mg/mL时达峰值。CCK-8结果显示:随观察时间延长,吸光度增强,细胞增殖活性增强;相同时间下各组细胞增殖活力随MNPs浓度升高而降低,MNPs2-SF-TA组显著高于MNPs4-SF-TA组(P<0.05);Calcein-AM/PI荧光染色结果与此一致。结论成功制备了MNPs-SF-TA复合水凝胶,其中MNPs浓度为2 mg/mL时,MNPs-SF-TA水凝胶具有较强的活性氧清除能力和良好的细胞相容性,有望成为牙周软组织修复的新型生物替代材料。

生物活性分子在种植体骨结合中的研究进展

钛及钛合金因良好的生物相容性和机械性能已成为目前人工种植体最主要材料,但其自身的惰性和缺乏生物活性的缺点会影响种植体骨结合效能,进而影响种植体的长期稳定性。为解决这一难题,学者们尝试采用生物化学法对钛及钛合金种植体表面进行改性,赋予种植体表面生物活性来提高种植体骨结合率。生物化学改性是将生物活性分子包括细胞外基质蛋白、生长因子及生物活性小分子如多肽等通过物理、化学方式结合于生物惰性钛或钛合金人工种植体表面,诱导种植床成骨细胞粘附、增殖、分化成骨,促进种植体骨结合。本文就该领域近年来研究较多的、用于种植体表面生物化学改性的方法、主要的生物活性蛋白和多肽的研究和应用进展进行综述。

适配体技术在骨疾病干预中的应用研究进展

适配体是人工合成的单链寡核苷酸,可以其高亲和性及特异性的靶向结合(包括核苷酸、氨基酸、蛋白质、小分子、病毒和细胞等)多种靶标。与传统的抗体相比,适配体具有低免疫原性、高稳定性及低生产成本等优点。近年来,国内外已有多家研究机构采用指数富集的配体系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)鉴定并合成出多种可靶向结合骨细胞的适配体,并成功将其应用于骨疾病的干预及阻断,本文就近年来适配体技术在骨疾病干预中的应用研究作一综述。

碱酸处理钛基钽涂层对兔骨髓间充质干细胞生物学活性的影响

目的:研究碱酸处理钛基钽涂层对兔骨髓间充质干细胞(rabbitbonemarrowmesenchymalstem cells,rBMSCs)黏附、增殖和成骨分化的影响,为钽涂层人工种植体的临床转化研究提供依据。方法:实验分四组:钛基钽涂层(Ta)组、酸处理(HCl)组、碱处理(NaOH)组、碱酸(NaH)组。通过扫描电镜(SEM)、能量色散X射线光谱仪(EDS)、蛋白吸附实验观察不同处理组表面理化性质的变化。将rBMSCs接种在四组材料表面,通过荧光显微镜、CCK-8、碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色及RT-qPCR对Runx2和COL-I基因表达分析,评估不同处理组对rBMSCs的黏附、增殖和成骨分化的影响。结果:SEM和EDS显示HCl组涂层表面形貌和元素组成未见明显改变,NaOH组表面孔隙略有增大且表面钠元素含量显著增高。NaH组涂层孔隙均匀,表面钠元素含量明显降低,且较其它三组对蛋白吸附量增多(P<0.05)。免疫荧光及CCK-8结果表明细胞黏附和增殖能力依次为:NaH组>NaOH组>HCl组≈Ta组;ALP染色、茜素红染色发现NaH组和NaOH组有更多深染蓝色颗粒和红色钙化结节;RT-qPCR可见细胞在NaH组表面成骨相关基因Runx2和COL-I表达量高于其它三组。结论:碱酸处理的钽涂层表面形貌及成分明显改变,能有效促进rBMSCs黏附、增殖及成骨分化,改善钽涂层表面的生物活性并促进成骨,该法是提升钛基钽涂层人工种植体表面生物活性的有效途径。

骨改建中miR-134-5p通过靶向Itgb1抑制小鼠破骨细胞形成的研究

背景微RNA(microRNA)是一种内源性非编码RNA,在生命活动的各个方面都拥有不可忽视的地位,尤其在骨改建中发挥着重要作用。其中,miR-134-5p及其靶基因整合素β1(integrinβ1,Itgb1)在破骨细胞中发挥的相互作用尚未见报道。目的研究miR-134-5p靶向Itgb1对小鼠破骨细胞形成的影响。方法诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bone marrowderived macrophages,BMMs)分化为破骨细胞,用TRAP染色观察破骨细胞形态,并通过qRT-PCR检测BMMs向破骨细胞分化的过程中破骨相关基因TRAP、CTSK、NFATc1以及miR-134-5p的表达水平变化。实验分为过表达miR-134-5p组(agomir)、敲低miR-134-5p组(antagomir)及其相应对照组(agomir NC和antagomir NC),将其分别转染入BMMs中,qRTPCR检测转染效率后,对各组进行破骨细胞TRAP染色和肌动蛋白环(F-actin)染色观察细胞形态,同时检测破骨相关基因TRAP、CTSK、NFATc1的表达水平;通过生物信息学网站筛选出miR-134-5p可能的靶基因Itgb1,qRT-PCR和Western blot检测Itgb1基因表达。结果与诱导1 d后的BMMs细胞相比,BMMs诱导分化7 d后TRAP染色阳性的破骨细胞形成增多,破骨相关基因TRAP、CTSK、NFATc1表达水平升高(P<0.01),同时qRT-PCR检测结果提示miR-134-5p表达水平降低(P<0.01);转染agomir后BMMs在体外向破骨细胞的分化受到抑制,TRAP染色阳性的破骨细胞数目减少,荧光下肌动蛋白环数目也减少,且TRAP、CTSK、NFATc1基因表达水平降低(P<0.01);而转染antagomir后促进BMMs细胞向破骨细胞分化表现为TRAP染色阳性的破骨细胞数目增加,肌动蛋白环数目同样增加,且TRAP、CTSK、NFATc1基因表达水平升高(P<0.01)。通过生物信息学网站筛选,miR-134-5p与Itgb1基因在其3-UTR端存在结合位点,qRT-PCR和Western blot检测均显示上调miR-134-5p时Itgb1表达降低。结论miR-134-5p通过靶向Itgb1在破骨细胞形成中发挥抑制作用。

人工种植体表面缓释载药系统的应用研究进展

通过人工种植体表面结构改变或涂层改性,赋予其携带生物活性分子或药物的功能,使种植体植入后随着加载药物的缓释作用,成骨活性增强,种植体骨结合效能提高,增加抗感染作用或其他不同的药物作用。为解决种植体表面加载药物后出现初期爆发性释放,引起局部副作用及远期药物浓度下降导致效果不理想等问题,种植体表面缓释载药系统应用而生。

汝州:强化保障房新型墙材应用质量监管

今年以来．在河南省汝州市墙改部门的监管下．汝州市新建保障房工程全部使用了合格新型墙材。为把好保障房工程建设质量第一关．让困难群众住上放心房．汝州市墙改部门从六个方面加强了新型墙体材料质量监管。

光动力治疗口腔黏膜多发性乳头状瘤1例

本文报道光动力治疗口腔黏膜多发性乳头状瘤1例,诊治过程展示光动力疗法优点及在口腔黏膜疾病中治疗的可普及性。

汝州:墙改连续三年跻身省先进

本刊讯日前．河南省汝州市住房城乡建设局被省住房和城乡建设厅授予2013年度河南省“墙材革新工作先进单位”。这是汝州市墙改革新工作继2011年以来连续三年跻身省级先进。2013年．汝州市通过深入开展“墙改队伍建设年”活动．有效提高了工作效能．全市墙改工作稳步推进。