祛毒汤的抗菌抗炎活性及其作用机制研究

目的:探索祛毒汤对临床病原菌的抑菌抗炎效果,为中药抗感染提供实验室用药依据。方法:选用多种标准菌株、质控菌株以及临床常见病原菌,用牛津杯扩散法和琼脂平板稀释法测定祛毒汤对菌株的抑菌圈、最小抑菌浓度;菌株生长速率和琼脂平板菌落计数用于检测祛毒汤熏蒸的抑菌和杀菌效果。构建LPS和菌体裂解液刺激的RAW264.7炎症细胞模型。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;通过检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的浓度,评估祛毒汤的抗炎效果。结果:1.祛毒汤对念珠菌具有强力的抗菌效果,对各类细菌也具有一定程度的抗菌效果,存在菌株间的差异性;2.祛毒汤对念珠菌的抗菌活性与现有抗真菌药物的耐药性没有显著相关性,而祛毒汤的抗细菌效果与特殊的耐药细菌存在一定的相关性;3.祛毒汤能有效抑制LPS和菌体裂解液诱导的RAW264.7细胞NO、TNF-α、IL-6分泌。结论:祛毒汤具有特定的抗菌谱,对念珠菌最有效;祛毒汤的多药成分的抗真菌机制可能与现有抗生素的耐药机制并不相同,其抗炎机制可能与抑制TNF-α和IL-6的分泌降低NO的生成有关。

青葙苷A抑制缺氧乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭能力的研究

目的探索中药青葙子中的齐墩果烷型三萜化合物青葙苷A(celosin A,CA)对缺氧人乳腺癌MDAMB-231细胞的抗肿瘤作用及其相关机制。方法CoCl2造模MDA-MB-231细胞缺氧状态,建立细胞体外缺氧的CA给药培养体系。采用细胞计数试剂盒(MTT)检测细胞活力,免疫荧光法观察细胞形态学和核凋亡变化。流式细胞术(FCM)法检测细胞凋亡比例;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell法检测CA对肿瘤细胞迁移和侵袭的抑制能力;Western blot实验检测缺氧相关蛋白表达水平和EMT标志蛋白表达水平。结果在缺氧状态下,高剂量的CA(20、40μmol/L)能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,诱导肿瘤细胞核凋亡的形态学改变,并且能有效促进早晚期细胞的凋亡率(PI-Annexin V-FITC促凋亡率:20μmol/L:+6.09%;40μmol/L:+18.50%),有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、单核细胞趋化蛋白(MCP)、血管内皮生长因子(VEGF)表达;同时低剂量的CA(5、10μmol/L)能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的Vimentin和N-cadherin因子的表达,并减少乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭细胞的数量(转移抑制率:5μmol/L,26.90%;10μmol/L,66.13%;侵袭抑制率:5μmol/L,23.71%;10μmol/L,75.00%)。结论CA能对缺氧乳腺癌MDA-MB-231细胞起到有效地诱导凋亡、抗肿瘤血管形成以及抑制侵袭与转移的作用。