PBL教学法在手外科教学中的应用

PBL是一种以问题为基础的学习,其教学模式以学生为主体,以小组讨论为形式。近年来,PBL教学法在各学科的教学中均得到了广泛应用。本文对手外科的学科特点、传统教学的局限性、PBL教学法的优势,以及PBL教学法在手外科教学中的应用进行阐述。

手外科多学科联合诊治教学模式的建立与实施

手及上肢先天畸形患者中约有1%存在多发畸形,致病机制复杂,表现多样,通常单一科室难以完成疾病的完整诊治及研究。多学科联合诊治模式(MDT)不仅为这部分患者的诊治带来希望,而且为手外科的教学引入了全新的模式。本文就手外科多学科联合诊治教学模式的建立与实施进行介绍。

抚顺东露天矿防排水泵站自动化改选

对抚顺矿业集团公司东露天矿泵站防排水的重要性进行论述,根据排水控制的要求,进行自动控制方面的设计。介绍了设备选型中所要考虑的问题,以及总体设计,系统功能等问题。对自动化改造工程建设的必要性及其产生的深远意义进行探讨。

NOG R167G突变致先天性指间关节黏连

目的鉴定一个中国先天性指间关节黏连家系的致病基因,为遗传咨询提供依据。方法Sanger测序对NOG及GDF5外显子区域进行测序分析。计算机模拟突变noggin-gdf5三维空间结构。C2C12细胞体外成骨诱导分化,验证突变noggin蛋白对成骨分化的抑制作用。结果Sanger测序结果显示患者均存在NOG基因(c.499C>G p.R167G)杂合错义突变。蛋白质空间结构模拟显示突变位点位于noggin与gdf5结合处。体外细胞分化显示突变蛋白体对C2C12成骨抑制作用减弱。结论NOG基因c.499C>G杂合错义突变使noggin抑制成骨作用降低,产生关节黏连的表型,是该家系的致病原因。

厚皮指症的手术治疗

目的探索采用指间关节侧方减容的方法治疗厚皮指症的临床效果。方法对15例(58指)厚皮指症患者采用指间关节侧方减容的手术方式进行矫正,使用Strickland TAM标准评价术后关节功能,采用温哥华瘢痕评分量表评价术后瘢痕情况,运用密歇根量表评价患者满意度。结果患者术后平均随访2.2年,根据Strickland TAM标准,优58指,优良率100%;VSS瘢痕评分平均1.2分;密歇根量表评分13例患者为非常满意,2例患者为满意。结论指间关节侧方减容的手术方法可有效矫正厚皮指症的外形,术后瘢痕不明显,对手指关节功能无不良影响。

GNAS新错义突变导致D/E型短指畸形

目的对我国一个短指家系进行致病基因进行鉴定。方法应用全外显子测序对该短指家系进行基因突变检测,并用Sanger测序对突变位点进行验证。结果该家系共有3名患者,均为短指表型,符合常染色体显性遗传。全外显子检测提示患者均存在GNAS基因(NM_001077488:exon13:c.A1145T:p.D382V)杂合错义突变,Sanger测序验证与全外显子结果一致。结论GNAS基因第13号外显子上c.A1145T杂合错义突变是该短指家系的致病原因。

TP63杂合突变导致先天性手足分裂畸形

目的鉴定一个手足分裂畸形家系的致病基因。方法收集患者家系临床资料,采集外周血样。采用全外显子测序技术(Whole-exome sequencing,WES)对整个外显子区域进行测序。应用染色体微阵列技术进行拷贝数变异分析。Sanger测序对突变基因进行验证。结果拷贝数变异检测芯片显示患者拷贝数没有异常变异,WES结果显示TP63基因存在杂合突变(c.956G>A;p.R319H)。Sanger测序结果与WES结果相符。结论TP63 R319H突变与该家系患者疾病表现共分离,是导致该家系手足分裂畸形的原因。

一个先天性指间关节粘连家系致病基因鉴定

目的鉴定1个先天性指间关节粘连家系的致病基因,体外验证致病位点并分析其功能意义。方法收集1个2017年9月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院患有指间关节粘连的家系临床资料,采集其外周血并提取基因组DNA,PCR扩增NOG、FGF9、GDF5外显子区段,使用一代测序技术测定外显子区段基因突变。计算机模拟noggin-GDF5蛋白复合体空间结构。体外COS-7细胞转染5μg空载质粒、野生型noggin质粒及V202G突变型质粒,每组设置3个复孔,实验重复3次,并以蛋白质印迹法检测noggin蛋白表达量。C2C12细胞体外同样转染上述质粒,进行成骨诱导分化,通过碱性磷酸酶染色、定量实验,并用qRT-PCR对成骨相关基因Col1α1、ALP及Runx2 mRNA进行定量分析,每组设置3个复孔,实验重复3次。采用Graphpad Prism 6软件对数据进行分析,组间比较采用非配对t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果先证者(1岁男性患儿)及其母亲均患有指间关节粘连。一代测序结果显示,该家系中患者均存在NOG基因(c.605T>G p.V202G)杂合错义突变,FGF9、GDF5未测及与疾病相关的突变。计算机三维结构模拟显示该位点位于noggin蛋白α螺旋处。蛋白质印迹法结果显示突变型蛋白表达量显著低于野生型。体外成骨诱导分化显示,V202G突变型蛋白抑制成骨分化作用下降。碱性磷酸酶染色定量结果显示,空白载体组碱性磷酸酶活性为(12.3±0.8)U/L,野生型质粒组为(2.6±0.3)U/L,与空白载体组相比其碱性磷酸酶活性显著降低(t=11.550,P<0.001),突变型质粒组碱性磷酸酶活性为(10.8±0.3)U/L,与空白载体组相比差异无统计学意义(t=1.830,P=0.141)。成骨相关基因mRNA表达水平定量分析,与前述结果一致,与空白载体组相比,野生型noggin组成骨相关基因ALP、Col1α1及Runx2 mRNA表达量显著降低(t=5.987、4.498、4.170,P=0.004、0.011、0.014),突变型质粒组与空白载体组相比差异无统计学意义(t=0.433、0.177、1.159,P=0.688、0.868、0.311)。结论NOG基因c.605T>G p.V202G为一新的关节粘连致病突变位点,该突变位点位于noggin蛋白α螺旋处,引起该蛋白表达量减少,从而引起指间关节粘连。