中药巴戟天中抗抑郁活性成分的研究

从中药巴戟天中，分到５个抗抑郁活性成分。经化学及波谱学方法，分别鉴定为琥珀酸、耐斯糖、ＩＦ－果呋喃糖基耐斯糖以及菊淀粉型六聚糖和七聚糖。以上均首次从巴戟属植物中得到。

文冠木中活血成分的化学研究

以家兔体外血小板聚集抑制活性为指标,对文冠木进行了活性成分的系统追踪。分离得到5种活性成分,用化学及光谱解析方法分别鉴定为杨梅素（myricetin,X1）、dl-白蔹素（dl-ampelopsin,X6）、（-）表儿茶精（epicatechin,X6）、（-）表没食了儿茶精（epigallocatechin,X9）和槲皮素(quercetin,X13)。

假轮枝链霉菌 Streptomyces pseudoverticillus产生的Elaiophylin类新细胞周期抑制剂及细胞凋亡诱导剂Ⅱ.化学结构及生物活性(英文)

通过 X-线晶体结构解析及光谱学数据分析 ,将从假轮枝链霉菌 Streptomyces pseudoverticillus发酵物中分得的三个elaiophylin类化合物分别鉴定为 elaiophylin(1)、11- O- monomethylelaiophylin(2 )和 efomycin G(3)。化合物 1～ 3在高浓度区均有很强的细胞毒作用 ,而在低浓度区均呈很好的细胞周期抑制和细胞凋亡诱导活性 ,系

菊淀粉型低聚糖类的~1HNMR及^（13）CNMR研究

本文应用二量子滤波１Ｈ－１ＨＣＯＳＹ，１Ｈ－１３ＣＣＯＳＹ及远程１Ｈ－１３ＣＣＯＳＹ等二维核磁共振技术，结合与类似物的化学位移值比较，分析归属了菊淀粉型低聚糖（１～４）的１ＨＮＭＲ及１３ＣＮＭＲ信号。

假轮枝链霉菌Streptomyces pseudoverticillus生产的Elaiophylin类新细胞周期抑制剂及细胞凋亡诱导剂Ⅲ .化学结构及NMR研究(英文)

通过波谱及X 线晶体结构分析 ,将从假轮枝链霉菌Streptomycespseudoverticillus发酵物中分得的 3个elaio phylin类化合物分别鉴定为elaiophylin(1)、11 O monomethylelaiophylin(2 )和efomycinG(3) ,并利用 2DNMR技术对化合物 1～ 3的1H及13C NMR进行了详细解析 ,为今后该类新化合物的结构研究提供了有用的。

文冠木中五种黄酮类成分的NMR研究

应用~1H—^(13)C co(?)y,~1H—^(13)C long(?)ange cosy等二维核磁共振技术,对文冠木中具有血小板聚集抑制活性的5种黄酮类成分的~1H—及^(13)C—NMR信号做了明确归属。

拓展微生物药源活性新菌株资源的新方法探索

在药源微生物活性产物研究中,分离得到的绝大多数菌株往往因无活性而被大量闲置或被选择销毁,造成前期投入的极大浪费和菌株资源开发利用效率严重低下。因此,如何将大量无活性菌株有效转化成活性菌株从而拓展药源微生物资源已成为重要研究课题。本课题组近几年一直在探索开展海洋来源无活性野生菌株的活性化转化与新产活性产物研究,并在无活性放线菌和真菌相关研究中取得了较好进展。本文简要归纳介绍包括尚未详细报道的新近进展在内的部分研究结果。

密脉鹅掌柴的化学成分及其抗肿瘤活性

目的 阐明民间用于癌症治疗的密脉鹅掌柴Schefflera venulosa的化学成分及其抗肿瘤活性。方法 用小鼠乳腺癌ts FT2 10细胞的流式细胞术筛选模型,确定抗肿瘤活性部位;利用Sephadex L H- 2 0、硅胶等柱色谱,分离活性部位的化学成分;根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的化学结构,用流式细胞术和SRB法初步评价化合物对ts FT2 10和K5 6 2细胞的抗肿瘤活性。结果 从密脉鹅掌柴活性部位分离鉴定了9个化合物:2 -羟基- 3苯胺羰基- 1-偶氮苯基-萘( )、大黄酚( )、2 ,6 -二甲氧基对苯醌( )、正十六烷酸( )、正十八烷酸( )、正二十六烷酸( )、4 ,2 2 -二烯- 3-酮豆甾烷( )、5 ,2 2 -二烯- 7-酮- 3β-羟基豆甾烷( )和β-谷甾醇( ) ;活性测试结果表明化合物 、对K5 6 2细胞有增殖抑制活性,其IC50 值分别为5 2 .5 0和2 5 .5 0μg/m L ,化合物 对在30μg/m L的低浓度对ts FT2 10细胞具有细胞周期G2 /M期抑制活性,而在10 0 μg/m L 的高浓度时却呈现显著的细胞周期G2 /M期抑制和细胞凋亡诱导活性。结论 化合物 为新天然产物,中文俗名为80 8猩红(80 8Scarlet) ,除β-谷甾醇外,其余均系首次从密脉鹅掌柴中分离得到。化合物 的抗肿瘤活性为首次发现,化合物 ～ 为该植物抗肿瘤活性成分为首次报道。

海洋放线菌S1001中抗肿瘤活性成分的研究

一株来源于海泥的放线菌S1001发酵产物具有致细胞坏死活性，本文采用溶剂萃取、硅胶柱层析及制备HPLC等分离手段对该菌株发酵产物的活性部位进行了活性追踪分离，共分离得到8个化合物，通过理化性质及波谱学手段,鉴定其结构分别为4，，5，7-三羟基异黄酮（1）,4-（2，4-二羟基苯酰胺基）苯甲酸（2），环（甘氨酸-丙氨酸）（3），环（甘氨酸-脯氨酸）（4），环（亮氨酸-酪氨酸）（5），环（缬氨酸-亮氨酸）（6），环（缬氨酸-异亮氨酸）（7）,环（苯丙氨酸-甘氨酸）（8）,并用SRB法初步评价了化合物1～8的抗肿瘤活性，结果表明化合物4、5和7在10μmol／L浓度时对K562细胞表现出了一定的抑制活性。

蔓荆子活性成分vitexicarpin诱导K562细胞凋亡的机制

目的 探讨vitexicarpin对人癌细胞增殖的抑制活性及其抗癌机制。方法 以SRB法进行细胞毒测定,观察细胞的形态学变化并用流式细胞术分析癌细胞的凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞的DNA梯带,以Westernblotting法进行蛋白质检测。结果 Vitexicarpin对K562等 4种人癌细胞表现了较强的增殖抑制活性。处理后的K562细胞表现出典型的凋亡形态特征、出现了剂量依赖性增加的亚二倍体峰并呈现出典型的DNA梯形条带;PARP和caspase- 3被剪切、胞浆中细胞色素c增高、Bcl 2表达减少、Bax表达未见明显变化。结论 Vitexicarpin通过激活线粒体调控的凋亡通路诱导K562细胞凋亡。

巴戟天中菊淀粉型低聚糖类单体成分对小鼠的抗抑郁作用

应用小鼠悬尾法，５－羟色胺酸诱发小鼠甩头法，阿扑吗啡诱导小鼠刻板行为法以及小鼠全脑单胺递质含量测量法等，综合评价巴戟天中的菊淀粉型低聚糖类四种单体成分的抗抑郁药理作用．实验结果表明它们在不影响小鼠自发活动的剂量下，显著缩短小鼠悬尾抑郁模型的不动时间，并兴奋５－羟色胺能神经系统，对多巴胺系统也有一定影响．其中两个单体，可使小鼠脑内的去甲肾上腺素和５－羟色胺及其代谢物羟５－吲哚乙酸显著升高，但羟色胺５－羟吲哚乙酸比值无明显变化．

海洋微生物抗肿瘤活性菌株的分级组合筛选

为探索如何快速获取活性菌株的筛选模式 ,组合使用海虾生物致死法和tsFT2 10细胞的流式细胞术筛选模型 ,对从青岛前海和胶州湾潮间带海泥、动植物样品中分离的 162株海洋微生物 ,进行了抗肿瘤活性的分级组合筛选。经海虾生物致死法一级初筛 ,得到活性菌株 5 8株 (LC50 <5 0 0 μg/mL) ,阳性率为 3 5 .8%。对初筛有效的 5 8株菌利用流式细胞术筛选模型进行二级复筛 ,得到对tsFT2 10细胞有各种活性的活性菌株共 2 5株 ,阳性率为复筛菌株数的 43 .1%、初筛菌株总数的 15 .4% ,其中 ,诱发细胞坏死伴有凋亡诱导活性的菌株 7株 (占总菌株的 4.3 % ) ,具有细胞周期抑制活性的菌株 18株 (占总菌株的 11.1% )。该分级组合筛选模式与流式细胞术筛选模型的单独筛选模式相比 ,无漏筛 ,具有成本低、速度快、宜于大规模筛选等特点。

海洋来源的放线菌3295代谢产物的结构鉴定及抗肿瘤活性(Ⅰ)

目的 对海洋来源的放线菌3295代谢产物中的抗肿瘤活性成分进行分离和鉴定。方法 利用细胞周期抑制为抗肿瘤活性指标,采用Sephadex LH-20,硅胶和HPLC等柱色谱技术对3295活性菌株发酵物进行活性追踪分离,根据理化性质和光谱方法进行化学结构鉴定,用流式细胞术评价化合物的抗肿瘤活性。结果与结论从其代谢产物中分离得到1个具有抗肿瘤活性的化合物Ⅰ,结构鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate);化合物Ⅰ对小鼠乳腺癌温敏型tsFT210细胞具有G0／G1期细胞周期抑制作用。

薯蓣皂苷的次皂苷元B体外诱导人慢性髓系白血病细胞K562凋亡的研究

背景与目的:我们从福州薯蓣的根茎中首次分离得到薯蓣皂苷的次皂苷元B(P.B),并发现P.B能够显著抑制多种人肿瘤细胞的增殖。本研究的目的在于探讨P.B是否通过诱导细胞凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用。方法:采用荧光及透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;库尔特全自动颗粒粒度分析仪分析药物引起K562细胞体积大小分布的变化;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带,流式细胞术检测细胞凋亡时的变化。结果:10μmol/LP.B处理K562细胞24h时,细胞产生典型的核内染色质凝结、核片段化、细胞体积缩小及凋亡细胞表面膜出泡等形态学特征。10μmol/LP.B分别处理K562细胞6、12及24h时,能够使细胞产生明显的DNAladder和体积变化,呈一定的时效关系,并且亚G1峰的凋亡细胞随作用时间的延长而增加,分别为6.12%(6h)、35.6%(12h)和45.7%(24h)。结论:P.B可能通过诱导K562细胞凋亡而发挥其抗K562细胞增殖的作用。

海洋放线菌H2003代谢产物中环二肽成分及其抗肿瘤活性的初步研究

海洋来源放线菌H2003发酵产物的粗提物对小鼠乳腺癌细胞tsFT210具有明显的细胞毒活性。为了发现其抗肿瘤活性成分,采用活性跟踪的分离方法,经多次硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及高效液相色谱分离,从菌株H2003发酵液中分离得到了7个环二肽化合物。经核磁共振光谱、质谱和旋光分析,其结构分别鉴定为cyclo(L-Leu-L-Pro)(1),cyclo(D-Val-L-Pro)(2),cyclo(Gly-L-Leu)(3),cyclo(L-Pro-L-Try)(4),cyclo(Gly-D-Phe)(5),cyclo(Gly-L-Pro)(6)和cyclo(L-Ala-L-Phe)(7)。其中化合物1通过SRB法测试表现出弱的抗肿瘤活性,系首次报道。

中药苏木提取物诱导K562细胞凋亡的研究

目的:探讨中药苏木提取物诱导人类慢性髓性白血病K562细胞株的凋亡作用。方法:采用MTT法检测苏木提取物对K562细胞增殖抑制作用;荧光显微镜观察细胞形态变化;库尔特全自动颗粒粒度分析药物引起K562细胞体积大小的分布变化;琼脂糖凝胶电泳测定DNAladder及流式细胞术检测细胞周期变化。结果:25μg/ml苏木浸膏能明显诱导K562细胞凋亡,产生凋亡细胞所具有的典型形态学及生化学特征,同时对K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用呈一定的浓度依赖性。结论:中药苏木提取物能诱导细胞凋亡,抑制癌细胞增殖呈一定的浓度依赖关系。

用核糖体工程技术二次开发海洋微生物菌株资源的研究

经对无活性的海洋来源放线菌B3054进行链霉素抗性筛选，获得了一株具有抗肿瘤活性的链霉素抗性突变株SY-1。从该突变株的发酵物中分离得到了4个活性化合物，其中1个为新天然产物。对该菌株突变前后的rpsL基因（编码核糖体蛋白S12）进行分析未发现发生突变，提示突变位点可能在核糖体的另外亚基上。实验结果表明，核糖体工程技术可用于无活性菌株资源的二次开发利用。

放线菌野生株代谢功能的核糖体工程改造与新产抗肿瘤活性产物研究

目的利用核糖体工程技术,改造放线菌次级代谢功能,筛选获得抗肿瘤活性突变株,并对突变株新产活性产物进行研究。方法以海洋来源无活性放线菌野生株HLF-39和HLF-43为出发菌,通过单菌落挑选与平板划线培养,分离纯化链霉素抗性突变株,通过摇床液态发酵和发酵提取物乙酸乙酯萃取样品的抗肿瘤活性筛选,获得抗肿瘤活性突变株;采用活性跟踪与微量预试先导-放大实验制备组合的实验模式,与原始菌样品对照比较,在快速确定差异活性斑点基础上,组合各种色谱技术,分离纯化突变株新产抗肿瘤活性产物;根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;采用MTT法测评抗肿瘤活性。结果链霉素对HLF-39和HLF-43的最低抑菌浓度分别为3和10mg·L-1。经抗性筛选,得到对链霉素产生抗性的HLF-39突变株28株、HLF-43突变株204株。在所得突变株中,3株HLF-39突变株和14株HLF-43突变株有抗肿瘤活性,100mg·L-1样品对K562细胞的抑制率大于20%;其中,4株分别对11、100、200和300mg·L-1链霉素产生抗性的HLF-43突变株CHS-21101、CHS-210010、CHS-220002和CHS-230001活性显著,100mg·L-1样品对K562细胞的抑制率分别达59.5%、50.0%、44.1%和59.6%。从CHS-21101发酵物中分离得到2个该突变株新产抗肿瘤活性产物,并分别鉴定为环(4-羟脯-亮)二肽(1)和phencomycin(2)。化合物1和2对K562细胞呈抑制活性,100mg·L-1抑制率分别为33.9%和21.4%。结论利用核糖体工程抗性筛选技术,从2株无活性放线菌野生菌株成功筛选得到17株具有抗肿瘤活性的链霉素抗性突变株,从其中1株发酵物中分离鉴定了2个该突变株新产抗肿瘤活性产物。用核糖体工程技术改造无活性放线菌野生株的次级代谢功能,可筛选获得活性突变株并提供深入研究新产活性产物,从中筛选新药及其先导结构,从而拓展药源放线菌活性菌株新资源。

深海来源淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性

目的阐明来自深海海水的淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性。方法采用活性跟踪分离模式,利用各种色谱技术分离纯化代谢产物;根据理化和波谱数据结合部分化合物的甲醇解反应鉴定化合物结构;采用MTT法测试抗肿瘤活性。结果从淡紫拟青霉ZBY-1发酵产物中分离鉴定了9(11)-去氢过氧化麦角甾醇(1)、过氧化麦角甾醇(2)、(22E,24R)-5α,6α-环氧-3β-羟基麦角甾-22-烯-7-酮(3)和脑苷脂A(4)、B(5)、C(6)、D(7)等7个化合物。化合物1～3对人癌细胞K562、MCF-7、HL-60、BGC-823有较强抑制作用,IC50在9.5～59.6 mg/L之间,而4～7对上述4种癌细胞均无抑制活性。结论本文是有关深海来源淡紫拟青霉代谢产物的首篇研究报道。化合物1～7为首次从淡紫拟青霉产物中分离得到,其中1和3首次从拟青霉属、3还首次从真菌中分离报道。化合物1对K562和BGC-823细胞以及3对上述4种癌细胞的抑制活性亦属首次测试报道。

海洋来源白浅灰链霉菌中环二肽类化合物的分离与结构鉴定

为了寻找新的抗肿瘤活性化合物,采用硅胶、SephadexLH20柱色谱和高效液相色谱,从白浅灰链霉菌Streptomycesalbogriseolus(A2002)中分离得到3个环二肽;利用理化及波谱学方法鉴定其结构分别为环(丙氨酸缬氨酸)[cyclo(AlaVal),1],环(丙氨酸脯氨酸)[cyclo(ProAla),2]和环(脯氨酸酪氨酸)[cyclo(ProTyr),3]。