重症肌无力患者血清抗乙酰胆碱受体抗体和抗突触前膜抗体检测

目的：探讨重症肌无力（MG）患者血清抗乙酰胆碱受体抗体（AchRab）和抗突触前膜抗体（Psmab）水平与其临床特征之间的关系。方法：采用ABC—ELISA法检测186例MG患者及35例正常人血清AchRab和Psmab。结果：MG患者血清AchRab和Psmab水平及阳性率均高于对照组（P〈0．01），且2抗体水平高度相关（r=0．72，P〈0．001）。2抗体水平与MG患者的性别无关；1～14岁患者2抗体水平较低；胸腺瘤患者2抗体水平高于胸腺增生者；危象型患者高于轻型和混合型患者；手术摘除胸腺后，2抗体水平较术前下降（P均〈0．05）。结论：AchRab和Psmab与MG患者病情程度及病理类型有关，可用于MG的病情监测。

横断胸骨第2肋间小切口与胸骨正中切口行胸腺切除治疗重症肌无力的对比研究

目的比较横断胸骨第2肋间与胸骨正中切口行胸腺切除治疗重症肌无力的手术效果,以合理选择手术方式。方法回顾性分析1989年6月～2007年5月行胸腺切除术治疗633例重症肌无力患者的临床资料,根据不同的手术切口将其分为横断胸骨组(1989年6月～2007年5月,568例)和正中切口组(1989年6月～1996年5月,65例)。采用独立样本t检验分析手术时间、术中出血量、术后引流量、住院费用、术后住院时间等指标,采用χ2检验分析手术并发症、肌无力危象发生率。结果与正中切口组相比,横断胸骨组手术时间短[(71.1±14.4)min vs(110.0±11.7)min,t=8.829,P=0.000],术中出血量少[(56.4±15.7)ml vs(100.1±11.3)ml,t=9.406,P=0.000],胸腔引流时间短[(1.7±0.4)d vs(3.1±0.6)d,t=8.463,P=0.000],引流量少[(87.6±23.9)ml vs(99.9±11.2)ml,t=2.213,P=0.033],住院费用低[(11833.0±2167.2)元vs(15333.0±4141.4)元,t=2.594,P=0.017],术后住院时间短[(8.6±1.1)d vs(12.2±3.0)d,t=4.503,P=0.000],手术切口短[(7.9±1.2)cm vs(17.3±4.8)cm,t=7.911,P=0.000],切口感染发生率低[0%(0/568)vs 6.2%(4/65),P=0.000],胸骨裂开发生率低[0%(0/568)vs 7.7%(5/65),P=0.000],肺部感染发生率低[0%(0/568)vs 3.1%(2/65),P=0.010],手术后住院期间肌无力危象发生率低[8.8%(50/568)vs 16.9%(11/65),χ2=4.417,P=0.036]。2组术后第1年、第2年、第3年完全缓解率差异无显著性[21.8%(52/238)vs 19.5%(8/41),χ2=0.113,P=0.737;28.2%(67/238)vs 26.8%(11/41),χ2=0.030,P=0.862;31.9%(76/238)vs 31.7%(13/41),χ2=0.001,P=0.977]。结论横断胸骨第2肋间切口胸腺切除术治疗重症肌无力安全性好,手术时间短,创伤小,术中出血量少,胸腔引流和住院时间短,住院费用低,能降低术后肌无力危象和手术并发症的发生率,美观,而且横断胸骨组能取得正中切口组手术同样理想的治疗效果,值得临床推广。

新的重症肌无力外科临床分型和分期的应用

目的:总结作者提出的新的重症肌无力(MG)临床分型和分期方法在外科治疗中的应用价值。方法:收集1998年1月至2007年12月收治的410例MG患者的病历资料,分3组,分别按作者提出的临床分型和分期方法(观察组,280例)、Osserman分型(对照1组,60例)和美国重症肌无力协会临床分型(对照2组,70例)进行术前分型,按所选分型方法指导手术适应证及时机的选择,均行胸腺(瘤)切除并前纵隔脂肪清扫术,比较术后肌无力危象的发生率以及手术死亡率,比较发生肌无力危象患者的术前分型和分期。结果:观察组术后危象的发生率为8.6%,对照1组为20.0%,对照2组为18.6%,与对照1、2组比较,观察组术后危象发生率明显降低(χ2=6.817和5.923,P均<0.05)。观察组发作/进展期患者肌无力危象发生率为23.2%(22/95),远高于稳定/缓解期的1.1%(2/185),差异有统计学意义(χ2=39.037,P<0.001)。3组患者手术死亡率均为0。结论:作者提出的MG临床分型和分期方法可指导手术适应证及时机的选择,有效降低术后肌无力危象的发生率。

横断胸骨第二肋间小切口胸腺切除治疗重症肌无力引流管位置的对比研究

目的探讨横断胸骨第二肋间小切口胸腺切除术治疗重症肌无力不同位置置引流管的优缺点。方法 195例行胸腺切除术的MG患者,其中67例在两侧纵隔胸膜完整的情况下施行横断胸骨第二肋间小切口旁置纵隔引流管,88例纵隔胸膜破裂口较大者施行单侧腋中线第七肋间置胸腔引流管及40例两侧纵隔胸膜完整者施行剑突下置纵隔引流管。结果手术时间42～100(72.5±17.6)min,术后引流30～140(89.8±30.6)mL,48h内全部拔引流管,术后摄胸片未见明显胸腔积液或纵隔积液。切口Ⅰ/甲级愈合。术后随访1～12个月,胸骨愈合均满意,无"鸡胸"等畸形。结论施行横断胸骨第二肋间小切口旁置纵隔引流管手术操作简便、安全、创伤小,值得临床推广。

胸心外科教学模式探索研究

总结分析胸心外科理论教学、临床实践教学、医患关系疏导三个方面经验与不足,探讨胸心外科的教学模式,并通过更新教育理念、丰富教学内容、灵活运用教学多种手段、强化基础技能、全面分析案例、培养科研创新能力、增强处理医患关系等改进措施,着力培养有医学理论基础扎实、病例综合分析能力强、临床经验丰富、具有科研创新及病患心理疏导能力的复合型人才。

胸腔镜胸腺切除治疗重症肌无力30例临床分析

目的探讨胸腔镜胸腺切除术治疗重症肌无力的临床价值。方法回顾分析2012-01—2014-07行胸腔镜胸腺切除术治疗重症肌无力30例患者的临床资料。结果所有患者均在电视胸腔镜下顺利完成,无1例中转为开胸手术,术后有效率83.3%。结论电视胸腔镜微创外科技术治疗重症肌无力具有创伤小、恢复快等特点,值得临床推广。

改良法与传统法治疗食管癌颈部吻合口瘘的对比分析

目的比较应用改良法与传统法治疗食管癌单纯左颈部吻合口瘘的临床特点。方法回顾性分析2009年1月至2013年1月食管癌术后并发单纯左颈部吻合口瘘的患者,分别采用改良法和传统法处理,进行对比分析。结果采用改良法治疗单纯左颈部吻合口瘘患者35例,痊愈率为100%,平均愈合时间8.37d。采用传统法治疗单纯左颈部吻合口瘘患者25例,痊愈率为100%,平均愈合时间16.08d。经两独立样本的t检验,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用改良法治疗食管癌单纯左颈部吻合口瘘与采用传统法相比,可明显缩短愈合时间,值得推广。

EGFR、CTEN和E-cad在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、CTEN蛋白(CTEN)和E-钙粘附蛋白(E-cad)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测EGFR、CTEN和E-cad在36例正常肺组织和82例NSCLC组织中的表达,并分析其与NSCLC的浸润、转移及预后的关系。结果 EGFR,CTEN和E-cad在82例肺癌组织中的阳性率分别为58.5%(48/82)、69.5%(57/82)和28.1%(23/82),在正常组织中的阳性表达率分别为13.9%(5/36)、0.0%(0/36)和100%(36/36),差异均有统计学意义(P<0.05);EGFR、CTEN和E-cad在NSCLC组织中的表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05);NSCLC中EGFR与CTEN表达呈相关性(r=0.530,P<0.001),而E-cad与EGFR和CTEN表达呈相关性(r=0.499,P<0.001;r=0.333,P=0.001);多因素Cox回归分析显示,CTEN表达水平可作为NSCLC预后的独立因素(P<0.05)。结论 EGFR、CTEN和E-cad可能在NSCLC的发展、浸润、转移中起一定的作用;同时对预测NSCLC的预后具有一定的意义。

重症肌无力患者胸腺增生组织中11000条带的蛋白质组学分析

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11000差异(异常)条带的蛋白质组成。方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫组化法比较20例MG胸腺增生组织和10例正常对照组织中4.1R蛋白的表达水平。结果:MG患者胸腺增生组织中目标条带的阳性率为72.7%(8/11),该条带由(30±6)个蛋白点组成,质谱分析显示有16个高表达差异蛋白点,其中3个蛋白得到鉴定,分别为4.1R蛋白、自整合抑制因子1和胆碱乙酰转移酶。免疫组化结果显示,与正常对照组的(0.98±0.18)相比,MG患者胸腺增生组织中4.1R蛋白表达水平为(1.55±0.46)明显增高(t=3.054,P=0.016)。结论:MG胸腺增生组织11000条带由多个蛋白点构成,这些蛋白主要功能涉及细胞骨架的组成、细胞内信息传递和乙酰胆碱合成等。

未折叠蛋白反应相关因子GRP78、ATF6和XPB1在人食管鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的了解食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中未折叠蛋白反应(UPR)相关因子GRP78、ATF6、XPB1的表达情况,探讨UPR激活在ESCC发生和发展中的作用。方法选取经手术切除确诊的ESCC癌组织、正常食管黏膜组织各99例,应用免疫组化SP方法检测GRP78和ATF6的蛋白表达情况;应用RT-PCR方法分析XBP1两种不同的亚型(非剪接型XBP1-u和剪接型XBP1-s)的分布情况。结果 GRP78和ATF6在ESCC组织中阳性率分别为67.7%和62.6%,而正常食管组织中阳性率分别为37.4%和35.6%,差异均显著(P<0.05);ESCC中GRP78和ATF6表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移均有相关性(P<0.05)。RT-PCR结果显示,XBP1-s基因在ESCC和正常食管组织中均有表达,分别为0.446±0.033和0.217±0.018,差异显著(t=60.6153 P<0.05);XBP1-s基因在ESCC组织中表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移均有相关性(P<0.05);而XBP1-u基因在两组细胞中的表达差异不显著(P>0.05)。结论在ESCC细胞中,由于UPR被激活,ATF6信号转导通路和IRE1依赖的XBP1剪切机制被活化。UPR与ESCC的发展、浸润、转移相关,也许能对ESCC诊疗提供新思路。

重症肌无力患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶和烟碱型乙酰胆碱受体的表达

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺组织中胆碱乙酰转移酶(CHAT)和烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的表达。方法:采用免疫组化方法检测胸腺增生(20例)、胸腺瘤(10例)、胸腺萎缩(10例)及10例正常胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达情况。结果:不同胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白的表达差异有统计学意义(F=16.271,15.083,P<0.001)。与正常胸腺和胸腺萎缩组织相比,胸腺瘤和胸腺增生组织中CHAT蛋白的表达增高(P<0.05);胸腺瘤组织中nAChR蛋白表达低于胸腺增生组织(P<0.05);胸腺萎缩组织中nAChR蛋白的表达也低于正常对照组(P<0.05)。结论:胸腺组织中CHAT和nAChR蛋白表达水平的改变可能是MG的发病机制之一。

重症肌无力胸腺组织蛋白质组双向电泳方法的建立

目的:建立和优化重症肌无力(MG)胸腺组织蛋白质组双向电泳技术方法。方法:提取MG患者(n=3)增生型胸腺组织蛋白,以固相pH梯度胶条做第一向等电聚焦电泳,SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳为第二向。在以上过程中分别对蛋白提取、等电聚焦程序(A、B、C、D)和凝胶染色方法等各个实验环节进行控制和优化,利用PDQuest7.1.1软件分析获得的二维凝胶图像。结果:①采用一步法提取胸腺组织蛋白质,第一向等电聚焦采用7cmIPG胶条,聚焦程序选择B,硝酸银染色。3例标本重复4次,共获12幅二维凝胶图像。随机选取1例标本的2幅图像,利用软件对2幅中的蛋白点进行匹配,匹配率为82.1%;3份样品共12幅凝胶图像的对比,获得3个共同存在的标志蛋白点,相对分子质量和等电点分别为:A点(82700,7.0)、B点(50700,5.76)和C点(33300,5.02)。②进一步优化上述实验条件,选择1例标本,采用两步法提取胸腺组织蛋白质,选用17cmIPG胶条,聚焦采用程序D,考马斯亮蓝染色,获得的二维凝胶图像与一步法(其他条件相同)比较。一步法可检测到蛋白质点326个,两步法可检测到562个蛋白点。结论:①建立了MG胸腺组织蛋白质组提取的方法。采用两步法可以更有效地提取胸腺组织蛋白质组。②利用优化后的实验方法,获得了MG胸腺组织蛋白二维凝胶图像,为开展MG胸腺组织蛋白质组学研究打下了基础。

人胃癌组织中C-Met与骨桥蛋白的表达

目的探讨胃癌组织中C-Met与骨桥蛋白的表达情况,以及2者的表达与胃癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测60例(男36例,女24例;组织类型肠型35例,弥漫型25例;TNM分期Ⅰ、Ⅱ期28例,Ⅲ、Ⅳ期32例;高分化16例,中分化26例,低分化18例;无浆膜浸润24例,有浆膜浸润36例;无淋巴结转移19例,有淋巴结转移41例;无远处转移21例,有远处转移39例)胃癌组织中C-Met与骨桥蛋白的表达。结果60例胃癌组织中C-Met与骨桥蛋白表达的阳性率分别为66.7%(40/60)、73.3%(44/60),C-Met与骨桥蛋白的表达与肿瘤组织类型、临床病理分期、浸润深度、淋巴结转移程度及有无远处转移有关(P<0.05)。胃癌组织中C-Met与骨桥蛋白的表达呈正相关(rs=0.533,P<0.05)。结论C-Met与骨桥蛋白与胃癌侵袭转移密切相关,能够作为反映肿瘤的生物学特性评估预后。

重症肌无力患者胸腺细胞Bcl-2表达的研究

目的探讨重症肌无力(myastheniagravis,MG)的发病机制,为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法用机械分离法、淋巴细胞分离液获取19例MG患者和11例正常对照组胸腺细胞悬液,接种于培养板中,分别加入雌、孕激素作为特异性刺激组,未加内分泌激素作为空白对照组,培养72h后收获细胞。采用流式细胞术分别检测MG患者和正常对照组胸腺细胞及雌、孕激素培养前后胸腺细胞的Bcl-2表达。结果MG患者胸腺细胞Bcl-2表达率比正常对照组显著增高,2者相比有统计学意义(P<0.01);雌、孕激素培养组MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达率比空白对照组显著降低,分别比较差异有统计学意义(P<0.05),雌激素培养组与孕激素培养组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论MG患者胸腺细胞Bcl-2表达升高,可能参与调控胸腺细胞凋亡,其表达异常可能是MG发病的一个重要因素;雌、孕激素抑制MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达,提示体内雌激素、孕激素水平变化与MG患者病情变化有一定联系。

重症肌无力患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库的构建及分析

目的:构建重症肌无力(MG)患者胸腺组织抑制性消减cDNA文库,分析MG胸腺差异表达基因。方法:分别从6例正常和6例MG患者胸腺组织中分离出mRNA,逆转录合成cDNA,行抑制性消减杂交,将得到的差异表达基因进行T-A克隆,构建cDNA文库,并进行序列分析。应用实时荧光定量PCR检测20例MG患者、10例正常对照胸腺组织中GSTM3和KPNA5 mRNA的表达。结果:共获得125个阳性克隆;Blast同源性检索共得到27个差异表达基因;MG患者GSTM3、KPNA5基因表达量(0.671±0.097和0.712±0.080)高于正常对照胸腺(0.582±0.047和0.571±0.018),差异有统计学意义(tGSTM3=5.458,P<0.001;tKPNA5=2.755,P=0.010),与消减文库结果一致。结论:成功建立了MG胸腺组织抑制性消减cDNA文库。

22例重症肌无力合并胸腺瘤的手术治疗体会

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)合并胸腺瘤患者的围手术期处理方法及手术治疗效果。方法对本院2006-03～2008-03接受手术治疗的22例重症肌无力合并胸腺瘤患者的临床资料进行回顾性分析。采用改良Os-serman标准分为:Ⅰ型9例,Ⅱa型5例,Ⅱb型7例,Ⅲ型1例,手术切口采用胸骨正中切口。手术均行胸腺瘤、胸腺脂肪组织切除及纵隔脂肪组织清扫。结果 22例无手术死亡,3例术后早期发生MG危象,经气管切开、辅助呼吸等抢救治疗治愈。结论完善围手术期处理措施,减少MG危象的发生,手术治疗重症肌无力合并胸腺瘤可获得良好的疗效。

重症肌无力患者胸腺切除术后危象36例抢救体会

目的:总结MG患者胸腺切除术后危象的抢救体会。方法与结果: 36例重症肌无力患者术后发生危象,给予口服抗胆碱酯酶药物、肾上腺皮质激素及呼吸机支持等治疗。治愈 28例,自动出院 5例,死亡 3例,均死于长期严重肺部感染、全身衰竭。结论:运用综合治疗措施可显著降低重症肌无力术后危象的病死率。

增生型胸腺组织重症肌无力相关蛋白的鉴定研究

目的筛选出增生型胸腺组织重症肌无力(myasthenia gravis,MG)相关蛋白,并对其作出鉴定。方法分别利用异体MG患者血清、正常人血清和自身免疫病患者血清为第一抗体,与电泳转移到硝酸纤维素膜上的蛋白点孵育,做Western Blot-ting试验;然后在利用双向电泳技术获得的参考凝胶上挖取MG组特异显色点所对应的蛋白质点,经胰蛋白酶胶内酶切,对所得多肽混合物进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,得到肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprinting,PMF)数据,登陆http://prospector.ucsf.edu/ucs fhtml4.0/msfit.htm网站,用MS Fit程序在NCBInr.10.13.2004数据库检索,鉴定蛋白质。结果Western Blotting试验共获得5个MG特异显色点,编号为2、4、6、7、9;经质谱分析得到5个蛋白质PMF图谱,数据库检索这些蛋白分别为:2号蛋白点isopeptidaseT、4号蛋白点importin beta subunit和6号蛋白点SOUL protein。7号和9号蛋白点未能得到确认,需要更换检索条件或进行蛋白质测序才能进一步认定。结论运用蛋白质组学和Western Blotting研究方法,共获得5个MG相关蛋白,得到鉴定的三个蛋白分别为2号蛋白点isopeptidaseT、4号蛋白点importin beta subunit和6号蛋白点SOUL protein。

重症肌无力危象32例集束化治疗的临床观察

目的探讨重症肌无力危象患者集束化治疗的有效措施。方法总结分析本院2005-07-2011-07收治重症肌无力危象患者32例的发病诱因、处理措施,总结出有利于防治重症肌无力危象发生的集束化治疗方法。结果本组32例,均未发生护理并发症;好转29例;因经济原因放弃治疗而自动出院2例;死亡1例,因长期的重症肌无力危象症状不能改善,并伴有严重的肺部感染,最终发生全身多脏器器官功能衰竭而死亡。结论重症肌无力危象,是重症肌无力患者死亡的主要原因。对发生重症肌无力危象的患者及时采取集束化治疗,包括进行有效的呼吸支持、严密观察病情变化、做好围术期管理、合理、准确用药、应用敏感抗生素预防感染、维持内环境稳态、加强营养治疗、选择合适的手术时机、做好人工气道管理、加强心理护理及基础护理、加强健康教育、重视预防工作等集束化治疗方法是促进重症肌无力危象患者康复,改善其生存质量,提升其生存能力的有效防治措施。

23例重症肌无力合并胸腺瘤的外科治疗

目的总结重症肌无力合并胸腺瘤外科治疗的临床特点。方法对23例行外科手术治疗的重症肌无力合并胸腺瘤患者的临床资料进行回顾性分析。结果重症肌无力合并胸腺瘤23例,全组完全切除率82.6%,临床Ⅰ、Ⅱ期完全切除率100%,Ⅲ期完全切除率63.6%。全组无围手术期死亡病例。术后病理中AB型胸腺瘤和胸腺癌的比例较低,分别为8.7%和4.3%,B1和B3型胸腺瘤的比例则相对较大,均为26.1%。术后控制重症肌无力的有效率为89.5%,胸腺瘤复发或转移率仅5.3%。结论重症肌无力合并胸腺瘤患者行胸腺瘤、胸腺及周围脂肪切除术能有效控制重症肌无力症状。胸腺瘤都有外侵可能,重症肌无力患者一旦发现合并胸腺瘤,若病情允许,均需尽早手术切除。