响应面法优化荔枝皮原花青素的提取工艺

为优化荔枝皮中原花青素的提取工艺,以粤西地区所产的黑叶荔枝果皮为材料,在单因素考察的基础上,根据Box-Behnken设计原理,采用Design-Expert 8.0设计软件,以原花青素得率为指标,进行响应面优化试验,并通过DPPH法评价提取物清除自由基的能力。结果表明,荔枝皮的最佳提取工艺为乙醇浓度68%、提取温度59℃、提取时间93 min、液料比20∶1,提取2次,在此条件下荔枝皮原花青素的得率为5.26%。优化后原花青素的得率有所提高,经纯化后提取物清除自由基的能力与Vc相当甚至更优。

盐酸利多卡因缓释膜的体外释放度测定

目的测定盐酸利多卡因缓释膜的质量分数及体外释放度。方法采用超高效液相色谱法（UPLC）对膜剂中的盐酸利多卡因进行快速测定;参照2010年版《中国药典》附录ⅩD第三法,采用改良的桨碟法进行释放度试验。结果 UPLC法对盐酸利多卡因的测定准确度和精密度良好,辅料不干扰药物的测定,平均回收率为99.55%,RSD为0.40%;盐酸利多卡因在20.15~503.8μg/m L范围内线性关系良好;3批自制盐酸利多卡因缓释膜24 h的累积释放率接近100%,符合一级释药模型。结论所建立的释放度测定方法准确可行,可用于该制剂的质量控制。

不同产地板蓝根中(R,S)-告依春及核苷类成分含量的比较

目的建立超高效液相色谱（UPLC）法同时测定板蓝根药材中尿苷、鸟苷、（R,S）-告依春、腺苷质量分数的方法。方法采用反相超高效液相色谱法,色谱柱为phenomenex Kinetex C_（18）柱（4.6 mm×100mm,2.6μm）,流动相为甲醇（A）-水（B）,梯度洗脱;流速为0.6 m L/min;检测波长为254 nm;柱温为30℃;进样量为2μL。结果尿苷、鸟苷、（R,S）-告依春和腺苷分别在2.058~102.9μg/m L（r=0.999 8）、2.070~103.5μg/m L（r=0.999 8）、2.043~102.2μg/m L（r=0.999 8）和2.506~125.3μg/m L（r=0.999 8）质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为99.9%、99.7%、99.4%、100.6%,RSD值分别为0.42%、1.3%、0.97%、0.88%（n=6）。结论本方法简便、快捷、重复性好,可用于板蓝根药材的质量控制。不同产地或不同生长环境下同种板蓝根中（R,S）-告依春和核苷质量分数均存在明显差异。

一测多评法测定板蓝根颗粒中4种成分的含量

目的建立同时测定板蓝根颗粒中腺苷、尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春的一测多评法。方法以腺苷为内标物,确定板蓝根中其他3种成分相对于腺苷的校正因子,通过相对校正因子(relative correction factor,RCF)对尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春进行定量,实现一测多评(计算法);同时采用外标法测定板蓝根颗粒中4种成分的含量(实测值),并比较一测多评法与外标法测定结果的差异。结果各成分相对校正因子重现性良好。尿苷、鸟苷、(R,S)-告依春按一测多评方法与外标法测定结果差异无统计学意义。结论本研究建立的一测多评法简便,测定结果准确可靠,可为板蓝根颗粒的质量控制提供参考。

千金子制霜前后对大鼠消化间期复合肌电及胃肠激素的影响

目的观察千金子制霜前后石油醚提取物对大鼠十二指肠消化间期复合肌电(IMC)活动及组织匀浆P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨制霜缓解千金子毒性的机制。方法将24只SD大鼠随机分为空白组、千金子生品石油醚提取物组和千金子霜品石油醚提取物组,每组8只。各给药组给予相应剂量(10 g原药材/kg)药液灌胃,空白组给予等量生理盐水灌胃。采用BL-420F生物机能实验系统测定千金子制霜前后大鼠十二指肠IMC慢波频率、振幅及峰电位数目;ELISA检测大鼠十二指肠组织匀浆SP和VIP含量。结果与空白组比较,千金子制霜前后均能兴奋大鼠胃肠肌电活动,十二指肠组织匀浆SP和VIP含量明显降低(P<0.01),制霜后各指标强度均小于生品(P<0.01)。结论千金子可能通过影响大鼠SP、VIP的分泌,进而影响消化道平滑肌胃肠电变化,引起胃肠道平滑肌收缩/舒张失衡,肠黏膜免疫调节紊乱,而制霜后使其水平趋于正常,从而改善胃肠道动力及胃肠道刺激性。

基于熵权法探讨不同比例川楝子与甘草配伍对化学成分溶出和肝细胞毒性影响

目的研究不同比例川楝子与甘草配伍的化学成分变化及其对肝细胞毒性的影响,优选配伍减毒的最佳比例。方法测定配伍后4种主要化学成分的含量变化,以人正常肝细胞LO2的相对存活率和形态作为肝毒性的评价指标,多元相关分析与熵权法结合优选其减轻肝细胞毒性的最佳配伍比例。结果不同比例川楝子与甘草配伍对化学成分溶出与肝细胞的毒性作用有差异;多元相关分析发现甘草苷、异甘草素、甘草酸铵与肝细胞相对存活率存在正相关关系,川楝素与肝细胞相对存活率存在负相关关系,熵权法得到川楝子∶甘草配伍比例为1∶1.5时综合得分最高。结论基于化学成分与体外肝细胞毒性实验,初步探索了甘草减轻川楝子肝毒性的物质基础和配伍比例,以期为川楝子临床用药提供一定的实验数据。

川楝子与炒川楝子标准饮片的均匀化工艺研究

目的优选川楝子与炒川楝子标准饮片的均匀化工艺。方法采用筛分法制备不同目数川楝子与炒川楝子粉末,以川楝素含量、总萜含量、颜色特征参数值、粉末径距为指标,采取积分球漫反射法测定近红外漫反射光谱,采用移动块标准偏差法多指标评价不同目数粉末均匀性,最终以综合评分法优选出饮片的最佳均匀化工艺。结果川楝子饮片的均匀化工艺为粉碎粒度80～100目,粉碎时间40 s;炒川楝子饮片的均匀化工艺为粉碎粒度65～80目,粉碎时间60 s。结论优选出的均匀化工艺合理可行、稳定可控,可为川楝子及炒川楝子饮片的均匀化技术规范制定提供参考依据。

基于表里量化关联的酒当归有效成分与表观颜色相关性研究

目的研究酒当归粉末表观颜色与其有效成分阿魏酸、多糖、醇浸出物和水浸出物含量的相关性。方法利用色度仪对酒当归粉末颜色值进行测量,采用HPLC测定阿魏酸含量,紫外-可见分光光度法对当归多糖进行定量,热浸法测定醇浸出物和水浸出物含量,采用多元相关分析与熵权法结合评价酒当归饮片质量。结果不同颜色酒当归饮片质量均符合2015年版《中华人民共和国药典》要求,但饮片内在质量存在一定差异。酒当归样品阿魏酸含量与a*(颜色红绿方向)、b*(颜色黄蓝方向)呈正相关(P<0.01),醇浸出物含量与L*(明度)、E*ab(总色值)呈负相关(P<0.01),水浸出物含量与L*呈负相关(P<0.05),多糖含量与L*呈正相关(P<0.05)。熵权法分析结果与色差测量结果一致。结论基于色差原理分析酒当归饮片有效成分含量与颜色值的相关性,同时结合熵权法评价酒当归饮片质量,可为酒当归颜色的量化及质量评价体系的建立提供参考依据。

正交设计结合体外抗凝血实验优选酒当归炮制工艺

目的优选酒当归饮片的最佳炮制工艺。方法通过正交试验设计,以炒制温度、炒制时间、黄酒用量和闷润时间为考察因素,以阿魏酸、当归多糖、浸出物(水、醇)含量和体外抗凝血时间[活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及凝血酶时间(TT)]为考察指标,采用综合评分法优选酒制当归的最佳炮制工艺。通过对比生当归饮片和酒当归饮片的APTT、PT及TT,比较当归酒制前后的抗凝血效果。结果酒当归的最佳炮制工艺为100 g当归饮片加10 mL半干型黄酒,闷润1 h,140℃炒制15 min,且酒当归饮片的APTT、PT、TT值均大于生当归饮片。结论当归酒制后抗凝血活性增强,优选出的酒当归炮制工艺稳定可行,可为其炮制工艺规范化研究提供一定的参考和依据。

基于熵权法对千金子-甘草不同配伍比例的化学成分变化及体外肝毒性研究

目的:研究甘草与千金子不同比例配伍后化学成分变化及细胞毒性作用,从化学成分及细胞毒性角度优选甘草与千金子配伍比例。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定分析不同配伍比例中千金子素L1、千金子素L2、千金子素L3、甘草苷及甘草酸铵的溶出率,用CKK-8法检测不同配伍比例的提取液对正常LO2细胞增殖的抑制作用,并用SPSS软件对各化学成分的溶出率与细胞毒性进行相关性分析,熵权法对不同化学成分客观赋权综合评价优选甘草-千金子不同配伍比例。结果:甘草-千金子以不同比例配伍后主要化学成分的溶出率及细胞毒性存在差异;由相关性分析可知千金子素L1、L2、L3与细胞相对存活率呈负相关,甘草苷、甘草酸铵与细胞相对存活率呈显著正相关;熵权法计算各成分权重由大到小依次为千金子素L1、千金子素L2、千金子素L3、甘草苷、甘草酸铵,各配伍比例综合评价得分甘草∶千金子=1∶1最高。结论:基于熵权法通过对千金子-甘草主要指标成分及其体外肝细胞毒性进行综合研究,得到最佳配伍比例为1∶1,可有效降低千金子的体外肝毒性作用,为两者进一步的配伍研究提供依据和参考。

不同包装材料对产地加工与炮制一体化肉桂饮片稳定性的影响

目的:考察不同包装材料对产地加工与炮制一体化肉桂饮片的质量稳定性的影响。方法:运用4种不同包装材料对肉桂产地加工与炮制一体化饮片进行包装,分别进行加速试验及高温、高湿、强光照射的影响因素试验,以桂皮醛、桂皮酸、挥发油和水浸出物的含量作为考察指标,考察不同包装材料对肉桂产地加工与炮制一体化饮片稳定性的影响。结果:铝箔自封袋包装较牛皮纸、聚乙烯塑料、透明光面真空袋包装具有更高的耐热性和阻隔性,可以最大程度减少肉桂有效成分损失。结论:肉桂饮片贮藏过程中应避免高温、强光照射,并注意防潮,使用铝箔自封袋包装作为肉桂的包装材料可以保证肉桂饮片的质量稳定性,可为产地加工与炮制一体化肉桂饮片的保存条件和有效期提供参考。

基于熵权法和灰色关联度法的羌活饮片质量评价研究

目的将熵权法与灰色关联度法相结合进行羌活饮片质量多指标综合评价研究。方法测定42批不同来源的羌活饮片样品中羌活醇、异欧前胡素、挥发油、醇浸出物和水浸出物5个主要指标的含量,采用灰色关联度法,以熵权法所得权重作为分辨系数(ρ),构建羌活饮片质量评价模型。结果不同来源的42批羌活饮片的相对关联度值的范围为0.2411~0.6795,不同批次的羌活饮片质量存在一定差异,实施标准化管理的可溯源饮片,测得的相对关联度较大,质量排序靠前,表明实施饮片标准化管理有利于羌活饮片质量控制;2种方法排名前5的样品为S16、S18、S17、S34、S33。结论基于熵权法和灰色关联度法所建立的新的质量评价模型可用于羌活饮片的质量评价,熵权法赋权提高了灰色关联度法的可靠性及羌活饮片质量评价的科学性。

盐酸特比萘芬乳膏的释放度考察

目的:建立盐酸特比萘芬乳膏释放度检查法。方法:采用改良的桨碟法进行盐酸特比萘芬乳膏的体外释放度试验,以超高效液相色谱法测定其释放度;并用f2相似因子法评价自制乳膏与兰美抒体外释放曲线的相似性。结果:乳膏基质及释放介质对测定无干扰,平均回收率为101.1%,RSD值为0.33%(n=9)。f2因子分别为45.5,37.8,58.7。结论:本法简便、重现性好,为建立盐酸特比萘芬乳膏的体外释放度检查法提供依据。自制乳膏中有一批与兰美抒释放行为相似。

板蓝根化学成分与抗流感病毒神经氨酸酶活性相关性的探讨

目的探讨板蓝根化学成分与体外抗流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的相关性。方法采用UPLC法建立不同产地板蓝根提取液的指纹图谱,并选取已知共有峰进行定量测定,采用试剂盒法测定药物抑制流感病毒NA活性,对化学信息和生物效应进行灰色关联分析和单因素相关分析,以探索其相关性。结果不同产地药材、不同提取方法得到的样品的化学成分量与生物效应均有一定的差异。UPLC指纹图谱各共有峰中已知峰(R,S)-告依春和尿苷与抑制流感病毒NA活性相关性较强,其中(R,S)-告依春量与生物效应显著相关。结论基于NA活性检测结果,初步明确了板蓝根化学成分量与生物效应的相关性,为板蓝根抗病毒有效成分的筛选和提取提供数据参考。

熵权赋权法的灰色系统理论在当归饮片质量评价中的应用研究

为探讨"熵权法"用于当归饮片综合评价中各指标的赋权,以熵权赋权法、灰色系统理论中的灰色关联度法以及聚类分析对当归饮片的质量进行综合评价。该研究测定了44批不同来源的当归饮片样品中阿魏酸、挥发油、多糖、醇浸出物、水浸出物、水分、总灰分、酸不溶性灰分8个主要指标的含量,采用熵权法客观赋权,以相对关联度(r_i)为测度,构建当归饮片质量多指标综合评价模型。结果显示,44批当归饮片的相对关联度值的范围为0.3019~0.6629,不同来源的当归饮片质量存在一定差别,可溯源及炮制工艺标准化的当归饮片S1~S8,测得的相对关联度大,质量排序均靠前,表明实施中药饮片生产链的系统管理有利于当归饮片质量控制;44批当归饮片的质量评价结果与传统当归道地产区及目前饮片市场主流品种相符合,且与聚类分析的结果基本一致。研究表明,基于熵权赋权法的灰色系统理论可用于当归饮片的质量评价,熵权法客观赋权提高了灰色关联度法的可靠性及当归饮片质量评价的科学性。

千金子二萜类成分及其生物活性研究进展

千金子为常见中药,含有二萜类、甾醇类、香豆素类、黄酮类、挥发油、脂肪油等丰富的化学成分和广泛的药物活性。二萜类化合物为其主要成分和活性成分,其中续随子烷二萜型和巨大戟烷二萜型两种骨架构成了千金子中的主要二萜类成分,具有致泻、抗肿瘤、抗肿瘤多药耐药、调节肠道菌群、祛斑美白等多种生物活性。通过整理、分析相关文献,全面综述了从千金子中分离出的二萜醇酯类成分及其生物活性,并对部分生物活性作用机制以及构效关系加以介绍,为千金子二萜醇酯类成分及其生物活性方面的研究提供文献参考,以期为更好地开发利用千金子提供科学依据。

基于Box-Behnken法优选红细胞膜包裹的紫杉醇仿生纳米混悬剂处方

基于红细胞的长循环及天然免疫逃逸效应,该研究构建了一种新型的红细胞膜包裹的紫杉醇仿生纳米混悬液[RBC-(PTX)NS],对其理化性质及体外抗肿瘤效果进行考察。采用超声-沉淀法制备紫杉醇纳米混悬液[(PTX)NS]及超声包膜法制备RBC-(PTX)NS。以粒径、电位、稳定性为指标,通过Box-Behnken法对(PTX)NS进行处方优化。并进一步对(PTX)NS及RBC-(PTX)NS的形态、粒径、稳定性、体外溶出及体外抗肿瘤特性进行表征。结果表明,优化所得的(PTX)NS粒径为(129.38±0.92)nm,Zeta电位(-22.41±0.48)mV;包裹细胞膜后RBC-(PTX)NS粒径为(142.5±0.68)nm,Zeta电位(-29.85±0.53)mV;透射电镜下(PTX)NS呈球形,RBC-(PTX)NS具有明显的核-壳结构;RBC-(PTX)NS在4℃下5 d保持稳定;体外溶出实验显示(PTX)NS在20 min内累积溶出度达79%,显著优于原料药溶出度(25%)(P<0.05);MTT细胞实验结果表明RBC-(PTX)NS对HepG2细胞的增殖有高效抑制作用,且具有明显的剂量依赖性。该研究探索制备的细胞膜仿生纳米制剂方法简单、重复性好,改善了PTX的溶解度,红细胞膜包裹后,RBC-(PTX)NS的稳定性提高,细胞毒作用增强,有望为PTX的纳米化给药提供新思路。

Chemical comparison of Semen Euphorbiae and Semen Euphorbiae Pulveratum by UPLC-Q-TOF/MS coupled with multivariate statistical techniques

In the present study,we aimed to assess the chemical composition changes of Semen Euphorbiae(SE)and Semen Euphorbiae Pulveratum(SEP)by UPLC-Q-TOF/MS and multivariate statistical methods.The UPLC-Q-TOF/MS method and SIMCA-P software were used to analyze the changes of chemical components of SE and SEP based on PCA and PLS-DA multivariate statistical methods.A"component-target-disease"network model was constructed by Intelligent Platform for Life Sciences of traditional Chinese medicine(TCM)to predict potential related diseases.The differences of chemical composition were significant between SE and SEP.Under positive ion mode,the amounts of Euphorbia factor L2,L3,L7a,L8,L9 and lathyrol were obviously decreased after processing.Under negative ion mode,the amounts of aesculetin,bisaesculetin,ingenol and cetylic acid were increased obviously,while Euphorbia factor L1,L4 and L5 were decreased obviously after processing,and the components of euphobiasteroid,aesculetin,lathyrol and linoleic acid among the 14 differentiated compounds were closely related to the SE-related diseases through the"component-target-disease"network model.UPLC-Q-TOF/MS technology in combination with multivariate statistical methods had certain advantages in studying the complex changes of chemical composition before and after manufacturing pulveratum of SE.It provided a basis for clarifying the toxicity-attenuated mechanisms of SE manufacturing pulveratum,and laid the foundation for its further development and utilization.