壁虎醇提物诱导人喉癌细胞Hep2凋亡的实验研究

本文研究了壁虎乙醇提取物(GEE)诱导Hep2细胞凋亡的作用。采用噻唑蓝比色法(MTT)检测了GEE对Hep2细胞增殖的抑制作用,发现GEE可呈剂量-时间依赖性的抑制Hep2细胞的增殖,GEE作用24、48、72 h后其IC50值分别为336.858、237.949、188.991μg/mL。Hoechst 33258荧光染色后在显微镜下可观察到Hep2细胞发生了典型凋亡的形态学变化;利用Western blot法证实在Hep2细胞中GEE可诱导caspase-3和抑制VEGF蛋白的表达。这些结果表明GEE可能是通过上调Caspase-3和下调VEGF蛋白的表达诱导Hep2细胞的凋亡。

壁虎醇提取物对小鼠肾包膜下移植H22肝癌的抑制作用

目的研究壁虎乙醇提取物(GEE)在肾包膜下移植H22肝癌小鼠中的抗肿瘤作用。方法建立肾包膜下移植H22肝癌模型,连续腹腔注射GEE 6 d后,计算抑瘤率、胸腺和脾脏指数;观察各瘤组织的病理学变化并检测血清中白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果 GEE高、中、低组抑瘤率分别为81.08%、72.67%、54.18%;各用药组中肿瘤组织有不同程度的坏死且GEE能降低血清中IL-6和升高TNF-α蛋白的含量。结论升高TNF-α和降低IL-6蛋白的表达可能是GEE发挥抗肿瘤作用的两种途径。

壁虎粗多肽诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的机制研究

目的:体外实验研究壁虎粗多肽(Gecko Crude Peptides,GCPS)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的机制。方法:采用MTT法检测GCPS对肝癌细胞HepG2增殖的影响;采用Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变,western-blot检测BAX和BCL-2蛋白的表达,观察壁虎粗多肽对人肝癌细胞凋亡的影响。结果:GCPS可以抑制肝癌细胞HepG2增殖,作用呈浓度和时间依赖性,其IC50为1.2 mg/mL;在GCPS的作用下,HepG2呈凋亡形态学改变,且GCPS(1.6 mg/mL、0.8 mg/mL)可以降低bcl-2的表达,升高蛋白bax的表达。结论:GCPS对HepG2细胞有增殖抑制作用,诱导其凋亡是其作用机理之一。

壁虎粗多肽对3种消化道肿瘤细胞的体外抑制作用

目的探讨壁虎粗多肽(GCPS)对消化道肿瘤细胞体外增殖的抑制作用。方法用不同浓度(0.375、0.75、1.0、1.5、3.0 mg/mL)的GCPS处理食管癌细胞EC109、肝癌细胞HepG2和胃癌细胞MGC803,于24、48、72 h后倒置显微镜下观察细胞形态变化,并使用MTT法观察GCPS对3种人消化道肿瘤细胞增殖的影响。结果与空白对照组比较,在倒置显微镜下可观察到GCPS作用24、48、72 h后的细胞形态有不同程度的改变。MTT法结果显示GCPS具有抑制人消化道肿瘤细胞增殖作用,且作用呈浓度和时间依赖性;48 h后GCPS作用于上述3种细胞的IC50为1.1、1.2和1.6 mg/mL。结论壁虎粗多肽可抑制HepG2、EC109和MGC803这3种消化道肿瘤细胞增殖。

龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长抑制及抗血管生成的分析

目的探讨龙胆苦苷对H22肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及抗血管生成机制。方法右腋皮下注射H_(22)细胞悬液建立H22肝癌小鼠模型,并随机分为模型组、龙胆苦苷低、高剂量组(50 mg/kg、100 mg/kg)及环磷酰胺组(20 mg/kg),每组10只;另选取10只健康小鼠,作为正常组;给药14 d后,检测体重、瘤重、抑瘤率、胸腺指数、脾指数、血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)含量及瘤组织碱性成纤维生长因子(b FGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平。结果与H22肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠体重无明显变化(P>0.05),而瘤重明显降低(P<0.01),其抑瘤率分别为30.43%及42.93%;与H22肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠胸腺指数、脾指数及血清IFN-γ、IL-2含量明显升高(P<0.05或P<0.01),而瘤组织b FGF、TGF-β、VEGF、p-PI3K及p-Akt表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长及血管生成均有抑制作用,该作用与提高免疫力,增加血清IFN-γ、IL-2含量及抑制PI3K/Akt信号通路的活化有关。

前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9及其抑制剂在动脉粥样硬化中的作用研究进展

动脉粥样硬化(AS)严重威胁着人类的生命健康。低密度脂蛋白胆固醇通过促进泡沫细胞的形成及炎症反应在AS的发生、发展中发挥重要作用。低密度脂蛋白受体(LDLR)是负责清除血液中低密度脂蛋白(LDL)的主要分子之一。前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(PCSK9)能够通过多种途径促进LDL介导的AS的发生和发展,其已被证实是治疗AS的重要靶点,目前已有多种类型的PCSK9抑制剂应用于AS的临床治疗或临床试验研究。本文综述了PCSK9的分子调节机制及其在AS中的作用,以及靶向PCSK9抑制剂的研究进展。

复方心脉佳对巨噬细胞炎症相关因子caspase-1和白细胞介素-1β表达的影响及其机制

目的探讨复方心脉佳对巨噬细胞炎症相关因子caspase-1和白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响及其机制。方法将对数生长期RAW264.7细胞随机分为对照组和体积分数0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组,应用细胞计数试剂盒检测复方心脉佳孵育24 h时各组细胞存活率。将对数生长期的RAW264.7细胞随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和低、中、高剂量复方心脉佳组,对照组细胞正常培养不加任何刺激剂和药物,LPS组加入1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h,低、中、高剂量复方心脉佳组分别加入体积分数1.0%、2.5%和5.0%的复方心脉佳预孵育12 h,随后加入1 mg·L^(-1) LPS处理4 h;应用Western blot检测5组细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量,实时荧光定量聚合酶链反应法检测对照组、LPS组、高剂量复方心脉佳组细胞中caspase-1前体、IL-1β前体及核转录因子κB(NF-κB)mRNA相对表达量。将对数生长期THP-1细胞随机分为对照组、联合刺激组和低、中、高剂量复方心脉佳组,对照组细胞正常培养不加任何刺激剂和药物,联合刺激组细胞给予1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h后再加入10μmol·L^(-1)尼日利亚菌素孵育1 h,低、中、高剂量复方心脉佳组分别加入体积分数1.0%、2.5%和5.0%的复方心脉佳预孵育12 h,然后加入1 mg·L^(-1) LPS孵育4 h后再加入10μmol·L^(-1)尼日利亚菌素孵育1 h;应用Western blot检测各组细胞培养液上清液中caspase-1和IL-1β相对表达量。结果对照组与0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%复方心脉佳组RAW264.7细胞存活率分别为(100.00±2.43)%、(102.25±2.76)%、(102.05±2.76)%、(100.63±3.32)%、(94.17±2.05)%、(83.62±3.46)%、(79.44±9.60)%。低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体蛋白相对表达量显著低于对照组和LPS组(P<0.05),对照组与LPS组RAW264.7细胞中caspase-1前体蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);LPS组和低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中IL-1β前体蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05),低、中、高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于LPS组(P<0.05);高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于低、中剂量复方心脉佳组(P<0.05),中剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体蛋白相对表达量显著低于低剂量复方心脉佳组(P<0.05)。LPS组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体和NF-κB mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),高剂量复方心脉佳组RAW264.7细胞中caspase-1前体、IL-1β前体和NF-κB mRNA相对表达量显著低于LPS组和对照组(P<0.05)。联合刺激组和低、中、高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.05);低、中、高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著低于联合刺激组(P<0.05);高剂量复方心脉佳组THP-1细胞上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量显著低于低、中剂量复方心脉佳组(P<0.05);低剂量复方心脉佳组与中剂量复方心脉佳组THP-1细胞培养上清液中caspase-1和IL-1β蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方心脉佳可能通过调控NF-κB信号通路而降低巨噬细胞中炎症相关因子caspase-1和IL-1β的表达和释放,其抗动脉粥样硬化功效可能与抗炎作用有关。

胞葬作用影响动脉粥样硬化的分子机制研究进展

动脉粥样硬化(AS)斑块增大、坏死核心形成及斑块破裂是心脑血管疾病的主要病理基础。胞葬即吞噬细胞将凋亡、死亡、受损或衰老的细胞吞噬、降解的过程,对维持组织平衡、消除炎症、免疫防御具有重要的作用。胞葬功能缺陷导致的斑块内细胞凋亡及坏死细胞清除障碍是推动AS进展的关键因素。本文就巨噬细胞介导的胞葬在AS发生过程中的分子机制研究进展进行阐述,以期为该疾病的防治提供新的思路。