耐高渗青春双歧杆菌的筛选及发酵工艺优化

为解决青春双歧杆菌在生产中发酵密度低的问题,该文测定了94株青春双歧杆菌的耐渗能力,同时评价了耐高渗菌株耐渗能力的遗传稳定性,最后通过解析培养基底物和发酵工艺探究了耐高渗菌株的最适发酵条件,从而提高其生产中的发酵活菌数。筛选得到两株最高可耐受1400 mOsm/kg的菌株CCFM1302和CCFM1066,其最优氮源为复合氮源(胰酪蛋白胨和酵母浸粉FM528以质量比1∶1复合),最优碳氮比分别为(2.71±0.23)∶1和(2.53±0.11)∶1。以达到完全抑制渗透压为发酵终点推算底物最适浓度,进一步优化微量元素的添加量,得到最优培养基:复合氮源21.0 g/L、葡萄糖57.0 g/L(CCFM1302),复合氮源22.4 g/L、葡萄糖56.5 g/L(CCFM1066);此外添加MgSO_(4)·7H_(2)O 0.25 g/L,半胱氨酸1 g/L、吐温801 mL/L。恒pH 5.5培养至稳定期发酵液活菌数可达(1.82±0.08)×10^(10)CFU/mL和(1.70±0.03)×10^(10)CFU/mL。该文筛选到可产业化的两株青春双歧杆菌,并优化其高密度发酵工艺,对生产和应用都具有重要意义。

青春双歧杆菌冻干保护剂筛选及高密度冻干工艺优化

为了探究青春双歧杆菌最适冻干保护剂配方,提高工业化生产效率,作者对不同糖与蛋白质类保护剂对双歧杆菌冻干保护特性、不同结构的糖类保护剂复配及其与蛋白质复配的保护效果进行研究,同时测定复合保护剂添加其他小分子物质对冻干存活率的影响,最后优化冻干前菌泥干物质与冻干保护剂的比例,以实现高密度冻干。研究结果表明,糖(醇)类保护剂对青春双歧杆菌的保护效果普遍高于蛋白类冻干保护剂,且四糖以下小分子糖的冻干保护效果较好,其中山梨糖醇和棉籽糖效果最优,二者复配(质量比1∶1)后冻干存活率提高到56%左右;将其与蛋白质、抗坏血酸、谷胱甘肽、微量元素等小分子复配,不会提高对菌体的冻干保护效果;考虑到实际应用,将山梨糖醇、棉籽糖与乳清蛋白以质量比3∶3∶2复配以提高菌粉的疏松度;菌泥与保护剂以干物质质量比1∶1.2混合,样品干物质总质量分数为25%时,青春双歧杆菌的冻干存活率达到(77.08±5.20)%。

Blautia producta的安全性评价

从健康小鼠粪便中分离到Blautia producta D4,前期研究发现B.producta D4可以缓解右旋糖酐硫酸钠导致的结肠炎和脂多糖诱导的全身性炎症。该文从基因层面、溶血性、抗生素耐受性和体内急性毒性等方面评估了菌株的安全性。结果发现,B.producta D4的大部分毒力基因与铁离子摄取和调控有关,无致病性;D4在血琼脂平板上无溶血现象,对链霉素、新霉素、四环素、氨苄青霉素、阿莫西林、甲氧苄啶、氯霉素、利福平和万古霉素敏感,对卡那霉素、红霉素、克林霉素和环丙沙星具有抗性;连续灌胃14 d 10^(9)CFU和10^(10)CFU的D4菌株,对小鼠的体重、摄食、饮水和器官指数均无影响,血常规、代谢和肝功能相关指标与空白组无显著差异,脏器形态组织正常、无病变。综上,初步表明B.producta D4是安全的,未来仍需进一步研究其他的安全特性,为功能性肠道菌的开发与利用提供理论依据和支撑。

协同发酵对发酵乳中益生菌活菌数及酸乳品质的影响

益生菌因能够改善肠道健康而逐渐被应用于发酵乳中,但由于部分益生菌在牛乳中生长缓慢、难以凝乳,因此益生菌发酵乳的产业化受到限制。通过复合菌种的协同发酵法能够实现益生菌发酵乳的制备,但无法保障功能性益生菌的高活菌数。该研究以2株功能性益生菌——罗伊氏乳杆菌CCFM1175和副干酪乳杆菌CCFM1176为研究对象,以发酵乳pH、酸度及活菌数变化为参考,筛选适宜与益生菌协同发酵的发酵菌株,制备益生菌发酵乳,并测定其贮藏特性及感官品质变化。结果表明,通过与保加利亚乳杆菌5L6的协同发酵,罗伊氏乳杆菌CCFM1175和副干酪乳杆菌CCFM1176在发酵乳中的产酸速率及活菌数显著增加,发酵12 h后滴定酸度分别为(68.17±0.42)°T、(62.51±0.84)°T,活菌数分别为(8.24±0.05)lg CFU/mL、(8.61±0.08)lg CFU/mL,实现快速凝乳及高活菌数。同时,协同发酵法有效改善了发酵乳的后酸化现象并提高持水力,制备得到的益生菌发酵乳具有良好的贮藏特性及感官评价。该研究解决了2株功能性益生菌在发酵乳中难以凝乳或发酵速率较慢的问题,为促进功能性益生菌在发酵乳产业中的有效应用提供参考。

菊苣、陈皮、鸡内金、山楂和余甘子对胃动力障碍大鼠的改善作用研究

该文采用大鼠胃动力障碍模型,研究了菊苣、陈皮、鸡内金、山楂和余甘子等5种药食同源食物的促胃动力效果,主要测定了胃排空率、胃酸、蛋白酶、胃液、血清饥饿素、胃泌素、酪氨基酶受体基因(c-kit)和干细胞因子的转录水平等指标,观察胃窦组织切片。结果发现菊苣、山楂和余甘子能显著提高胃排空速率(P<0.05),菊苣和陈皮显著降低胃游离酸的浓度和排出速率(P<0.05),山楂显著提高胃蛋白酶活性和排出量(P<0.05),鸡内金显著提高了胃蛋白酶排出速率和胃液量(P<0.05)。另外,菊苣、山楂显著提高血清饥饿素含量(P<0.05),余甘子显著提高血清胃泌素含量(P<0.05),菊苣对胃底腺层有修复作用并能显著上调c-kit的转录水平。综上,菊苣、山楂和余甘子对胃动力的促进效果较好,具有开发成促消化食品的潜力。

植物乳植杆菌CCFM1296及后生元对小鼠透明质酸和衰老的影响

衰老伴随着透明质酸(hyaluronic acid,HA)的流失,从而出现皮肤衰老、眼花、关节疼痛和记忆衰退等症状,该研究拟探讨口服不同植物乳植杆菌活菌和制备的后生元对体内HA的调控作用和抗衰老作用。通过皮下注射500 mg/(kg·d)D-半乳糖诱导衰老小鼠模型,并每天分别灌胃5×10^(9)CFU/kg植物乳植杆菌CCFM1295、CCFM1296、CCFM1297活菌(CCFM1295-L、CCFM1296-L、CCFM1297-L)和500 mg/kg剂量的后生元(CCFM1295-D、CCFM1296-D、CCFM1297-D),9周后检测小鼠皮肤、关节、脑、眼的HA含量,并对HA合成相关酶水平进行了定量,并检测小鼠中与衰老相关的血清生化指标、皮肤水分和弹性以及抗氧化水平。结果显示,在灌胃植物乳植杆菌小鼠中,仅有CCFM1296-L和CCFM1296-D促进了皮肤、关节、眼的HA含量并促进了组织中HAS2 mRNA的表达水平,CCFM1296-D同时还上调了脑中HAS2 mRNA的表达水平,HAS2是HA生物合成的关键酶之一,其表达水平可能影响HA的水平。同时CCFM1296-L和CCCFM1296-D增加了胆碱酯酶(cholinesterase,CHE)活性并降低了血清C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)水平。CCFM1296-L还能够增加皮肤水分和皮肤弹性,并提高皮肤组织的CAT、GSH-Px和T-AOC活力,增加其防御能力。总之,植物乳植杆菌CCFM1296能够通过上调HAS2 mRNA的表达水平增加组织HA含量,从而帮助机体起到抵抗衰老的作用。

基于底物消耗规律优化乳酸乳球菌增殖发酵工艺

为了提高乳酸乳球菌发酵生物量,该文首先筛选了最优碳氮源,分析了乳酸乳球菌偏好利用的氮源特征,定向制备了酪蛋白肽,进一步分析酪蛋白肽的添加对菌株增殖的影响;然后通过测定菌株生长速率被抑制时的碳氮消耗比和耐渗透压能力确定了初始发酵培养基的碳氮源添加比例和添加量。结果表明,葡萄糖是乳酸乳球菌的最佳碳源,酪蛋白肽和酵母浸粉FM 803以1∶2的质量比复合为最佳氮源,进一步优化微量元素的添加量和恒pH分批培养策略,得到最优培养基和培养工艺。乳酸乳球菌CCFM 1093的最优培养基:葡萄糖137 g/L、复合氮源53 g/L、MgSO_(4)·7H_(2)O 0.043 g/L、MnSO_(4)·H_(2)O 0.03 g/L、吐温-801 mL/L;乳酸乳球菌CCFM 1032最优培养基:葡萄糖106 g/L、复合氮源51 g/L、MgSO_(4)·7H_(2)O 0.043 g/L、MnSO_(4)·H_(2)O 0.03 g/L、吐温-801 g/L,活菌数分别可达到(1.01±0.06)×10^(12)CFU/mL和(9.78±0.38)×10^(11)CFU/mL,是MRS培养基静置培养的12.6倍和12倍。该研究结果将会显著提高乳酸乳球菌的工业生产效率。

透明质酸与鼠李糖乳酪杆菌CCFM1259复配拮抗幽门螺杆菌感染的临床功效评价

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种常见的致病菌,在我国Hp的感染率超过了50%,严重影响了国民生活质量。已有的研究表明,鼠李糖乳酪杆菌CCFM1259能够拮抗Hp,改善胃部健康,且透明质酸(hyaluronan,HA)是一种能够在人体内发挥重要生理功能的线性糖胺聚糖。该文通过Hp感染动物模型筛选对Hp具有拮抗效果的HA,并将其与CCFM1259复配,探究复配物在动物及临床上拮抗Hp的效果。动物实验结果表明,高分子质量HA(100~150 wDa)具有较好拮抗Hp作用,且高分子质量HA或复配物均能够显著降低感染小鼠体内Hp定殖量,减轻小鼠因Hp感染引起的胃部炎症。临床研究共有48名受试者全程参与。受试者每天2次服用HA或复配物,持续4周。临床试验结果表明,HA和复配物干预不影响受试者血常规及血液生化相关指标,提高了受试者Hp转阴率和有效率,其中复配物的效果优于单独使用HA。以上研究结果表明,高分子质量HA与鼠李糖乳酪杆菌CCFM1259组合物能够有效拮抗幽门螺杆菌感染,且不会对受试者产生不利影响。

乳酸菌代谢保护剂中糖产酸对冷冻保护的影响

真空冷冻干燥是乳酸菌菌粉制备的关键技术手段,在冻干前须将菌泥与保护剂混匀并进行预冻。文中系统研究了菌泥与保护剂混匀过程中的代谢产酸情况,及产酸引起的pH值降低对预冻的影响。测定了不同菌泥添加保护剂后在室温和冷藏温度下的产酸速率,以及不同pH值下冷冻后菌株的存活率,分析了不同pH值条件下冷冻对菌株ATP酶、β-半乳糖苷酶、乳酸脱氢酶及细胞膜完整性和流动性的影响。结果表明,菌泥与保护剂混合后,室温环境下的产酸速率很快,可在短时间内将菌悬液的pH值降至4.0。而pH值降低确实会对冷冻菌株的存活产生影响,pH值在降至4.0时,菌株冷冻存活率显著降低。低pH值条件下的冷冻,会损伤ATP酶、β-半乳糖苷酶及降低细胞膜的流动性,是导致冷冻存活率降低的原因。因此,为提高真空冷冻干燥的菌株存活率,首先须控制菌泥与保护剂混合时的温度和时间,确保预冻阶段乳酸菌无损失。

高产胞外多糖的植物乳杆菌直投发酵菊芋泡菜的研究

采用自主研发的高产胞外多糖的植物乳杆菌直投式泡菜发酵剂制备菊芋泡菜,研究其发酵过程中泡菜液pH、总酸、活菌数、维生素C、氨基酸态氮和可溶性固形物含量的变化,同时探讨菊芋主要成分菊粉对植物乳杆菌生长的影响,并测定该菌胞外多糖的产量。结果表明,菊粉可促进植物乳杆菌的生长,37℃培养24 h,该菌胞外多糖产量高达471 mg/L。与自然发酵相比,直投发酵的菊芋泡菜各项指标均优于自然发酵,其泡菜液pH达到3.46、总酸含量达到0.36%,活菌数保持在4.3×108CFU/mL、维生素C含量为16.92%、氨基酸态氮含量为0.033%、可溶性固形物含量达到15%。得到的菊芋泡菜酸度适宜,呈诱人乳白色,活菌含量高,且富含植物乳杆菌胞外多糖,为老少皆宜的益生泡菜产品。

植物乳杆菌发酵苹果汁及菌体活性保持

为实现植物乳杆菌在苹果汁中的发酵增殖及低温贮藏期间的活性保持,测定苹果汁先后添加无机盐、营养因子和微量元素后菌株的增殖浓度,并比较发酵果汁在添加不同保护剂后4℃冷藏期间的活菌数。发现KH2PO4、柠檬酸钠、酵母粉和MnSO4是植物乳杆菌在苹果汁中发酵增殖的关键因子,其添加量分别为5、7、5和0.05g/L时菌株发酵12h活菌数达(3.4±0.2)×10^9CFU/mL,且抗性糊精更有利于菌体的活性保持。发酵结束离心收集菌体,以不同浓度的抗性糊精为保护剂制备粒径大小不同的海藻酸钠微胶囊,测定其在果汁中冷藏期间的活菌数。结果表明,抗性糊精浓度为200g/L,粒径为4mm的微胶囊显著提高植物乳杆菌在发酵苹果汁中的活性保持,冷藏21d后存活率达(81±3.1)%。该研究解决了植物乳杆菌在发酵苹果汁高密度增殖的难题,且为含活性菌发酵果蔬汁的研发提供了指导方法。

微滤膜偶联生物反应器制备泡菜发酵剂

采用自主研发的微滤膜偶联生物反应器制备泡菜用液体发酵剂,直接用于泡菜发酵。研究表明,通过生物反应器可控制乳酸菌培养过程中的pH、温度、溶氧量和追加营养物质的时间,植物乳杆菌在生物反应器内恒定pH培养12 h后活菌数达到5～8×109 CFU/mL;选择中空纤维膜膜滤的操作条件为蠕动泵转速50 r/min,压力0.15 MPa,对菌悬液进行膜滤浓缩1 h可得到4 L活菌数为2～3×1010 CFU/mL的浓缩菌液。浓缩菌液稀释5 000倍作为泡菜用发酵剂,直接用于泡菜发酵。室温条件下发酵3 d得到优质泡菜,比自然发酵短2 d。此微滤膜偶联生物反应器结构简单、使用方便、自动化程度高、适用于工业化大规模连续生产泡菜发酵剂。

无机液晶的研究进展

无机液晶稀少且具有特殊的光、电、磁等性质。综述了过去和近年来无机液晶的研究进展,全面总结了无机液晶的3种最基本中间相——向列相、层状相和柱状相的研究成果,探讨了无机液晶的应用,同时指出了无机液晶研究和发展的几个方向。

高强度自润滑涂层PM304的制备

通过高能球磨与粉末冶金技术制备高强度自润滑PM304涂层,PM304涂层相对密度达到93%、抗拉伸强度达47MPa,相比等离子喷涂制备的PS304涂层,相对密度与抗拉伸强度明显提高。并且,涂层中的自润滑成分尺寸细小且分布均匀,其中Cr2O3粒子尺寸为100nm左右,BaF2/CaF2粒子为1μm左右。

四川老卤泡菜基本理化指标及特征菌群分离鉴定

以8份四川老卤泡菜样品为研究对象,对其理化指标和风味物质进行测定,发现老卤泡菜的pH值平均为3. 59,总酸含量平均为12. 47 mg/g,总糖含量平均为31. 17 mg/g,NaCl含量平均为4. 46 g/100 g,总氮含量平均为0. 17 g/100 g,渗透压在434～2 238 mOsm/kg。GC-MS分析发现,老卤泡菜的挥发性风味物质主要是烷烃和酯类,包括甲基环戊烷、柠檬烯、乙酸乙酯等;主要的非挥发性风味物质包括乳酸、丙二醇、甘油、琥珀酸、草酸、甘露醇、γ-氨基丁酸和果糖等,其中甘露醇和γ-氨基丁酸是主要的活性物质。从8份老卤泡菜样品分离到36株菌,分别为植物乳杆菌32株、布氏乳杆菌2株和耐乙醇片球菌2株,这3种菌是老卤泡菜的特征菌群,对泡菜发酵具有重要作用。

发酵乳杆菌的生长限制性因素分析及高密度培养工艺优化

为提高发酵乳杆菌的增殖浓度,对其高密度发酵培养基成分及培养工艺进行优化以提高其活菌数。结果表明,酵母粉复合大分子肽的蛋白胨是发酵乳杆菌的最适氮源,缓冲盐在恒pH培养时对菌株生长无促进作用,Mn^(2+)和Mg^(2+)均是发酵乳杆菌的限制性微量元素。另外,中性条件下酸根的积累不会对发酵乳杆菌有特异性毒害作用,其生长主要是受到渗透压的抑制。以菌株生长速率被抑制时的碳氮消耗比作为培养基中的碳氮源比例,基于菌株生长速率被抑制时的渗透压确定碳氮源的添加量。进一步优化恒pH分批培养和恒pH自动反馈补糖培养工艺,得到各菌株的最优培养策略:发酵乳杆菌FXJCJ6-1、发酵乳杆菌FGDLZR161、发酵乳杆菌CCFM422分别在恒pH 6.0、5.5、5.5分批培养时,活菌数分别达到(1.3±0.1)×10^(10)、(1.1±0.1)×10^(10)、(9.5±0.5)×10^(9 )CFU/mL,较在MRS培养基静置培养时的活菌数提高了3.1、3.8和4.6倍。该研究结果的应用将显著提高发酵乳杆菌的工业化生产效率。

一种米曲霉耐盐蛋白酶的纯化及酶学性质分析

采用硫酸铵沉淀、Q-HP阴离子交换柱和Superdux 75凝胶柱等技术,从酱油大曲中纯化得到一种耐盐蛋白酶,经飞行时间质谱鉴定为钙蛋白酶RIM13,属于一种半胱氨酸蛋白酶。该蛋白酶的最适温度为50℃;最适pH值为6.5;稳定温度为40℃;稳定pH值为7.0;Mn^(2+)促进蛋白酶活力,Fe^(3+)、Fe^(2+)、Cu^(2+)、Ca^(2+)、K^+、Na^+抑制蛋白酶活力,以上金属离子对蛋白酶二级结构也产生不同程度的影响;米氏常数K_m为2.43 g/L,最大反应速率V_m为103.09 mg/(L·min)。在5、10 g/100 mL和15 g/100 mL的NaCl质量浓度条件下,蛋白酶保留的酶活力分别为77.22%、54.39%以及41.15%。该蛋白酶在高盐度环境下保持较高的酶活力,因此具有潜在的工业应用价值。

复合益生菌制剂对人体肠道菌群组成的调节作用

为了研究复合益生菌制剂对人体肠道菌群的调节作用,该实验招募到15名健康志愿者,连续服用4周的复合益生菌制剂。干预前后收集志愿者的粪便样品,通过16S rDNA扩增子测序技术分析干预前后粪便中肠道菌群组成的变化。其结果表明:复合益生菌制剂干预4周后,人体肠道菌群的Shannon指数和Evenness指数不变(p>0.05);在门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度增加;在属水平上,除乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)的相对丰度增加以外,复合益生菌制剂干预对柯林斯菌属(Collinsella)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、多尔氏菌属(Dorea)和真细菌属(Eubacterium)等肠道内产氢气细菌的相对丰度也产生影响。由此认为,该复合益生菌制剂具有调节肠道菌群组成的作用,能够提高肠道内一些有益菌的丰度。

诺丽果控温发酵过程中理化性质和活性物质的变化规律

采用密封静置发酵的方式生产诺丽发酵果汁。选择p H值、可溶性固形物、有机酸等理化指标,总糖、总酚、环烯醚萜等活性物质及挥发性物质探究诺丽果发酵过程中的理化指标和活性物质变化情况。研究发现,诺丽果发酵具有阶段性。前60 d,p H值、总酚含量逐渐下降,总滴定酸度、可溶性固形物含量逐渐上升,多糖和环烯醚萜含量呈波动变化。发酵60 d后,诺丽果汁性质稳定。随发酵时间延长,己酸、辛酸等特征风味物质无变化,2-甲基丁酸等刺激性风味物质增加,丁酸甲酯等果香风味物质减少。因此,建议缩短发酵时间,保证产品品质。

我国网络反腐机制存在的问题及规范化分析

我国网络化发展迅速,自媒体也成为现代社会领域的重要话题,而网络反腐就成为了当前社会中反腐工作的重要突破,为推进我国政府廉政建设有着重要的意义。网络反腐就是通过网络传播来检举贪污腐败案件,促进政府进行反腐监管,能够在公众的监督下处理相关案件。然而,我国反腐机制却受到较多环境因素的影响,导致反腐机制出现了不规范,甚至不能发挥正面促进作用,这就要求我国政府及相关部门开展规范化的网络反腐机制建设,从而促进我国反腐工作的开展。