固体脂质纳米粒作为核酸疫苗载体的效应研究

文章模拟低密度脂蛋白制作阳离子固体脂质纳米粒,并评价其作为核酸疫苗载体的实用性。利用改进的溶剂乳化法成功制备LDL样固体脂质纳米粒(SLN)。SLN组成成分为胆固醇油酸酯(47%,W/W),甘油三酯(2%,W/W),DOPE(9%,W/W)、未酯化胆固醇(12%,W/W)、DC-胆固醇(30%,W/W)。结果表明,固体脂质纳米粒的平均大小为(98.96±0.24)nm,表面zeta电位为(+177±14.14)m V。相比聚乙烯亚(PEI),SLN在同等浓度下表现出相当微弱的细胞毒性。在最佳质量比值条件下,SLN和p EGFP-C2载体复合物(8.4??1)对体外培养细胞的转染能力得到大幅度改善,相比单用p EGFP-C2载体转染时强约10倍。以(p Shuttle-H1-荧光素酶sh RNA)/SLN复合物处理转荧光素酶基因的人肺腺癌细胞PC9时,复合物成功抵达细胞内并通过si RNA干扰途径显示出实质性的荧光素酶基因沉默现象。试验合成的LDL样阳离子固体脂质纳米粒颗粒大小均匀、表面正电荷稳定、细胞毒性甚微,可与p EGFP-C2真核表达载体结合,有效转染到细胞内。

浅谈布鲁氏菌减毒活疫苗的研究进程

布鲁氏菌病是布鲁氏菌感染而发生的严重的人畜共患病。不仅给畜牧业带来巨大的经济损失,人如果感染也引起顽固的病程。一直以来人畜共患病的控制大部分依赖于动物疾病的控制,而动物布鲁氏菌病是通过疫苗接种和大量屠杀患畜来加以控制的。可是,到现在还没有足以控制本病的高效疫苗,想控制好布病似乎不太可能。以往的研究结果提示减毒活疫苗接种是目前为止预防布鲁氏菌再度感染的最佳方式。长期以来牛型布鲁氏菌菌种19(S19)作为疫苗在家畜中使用,但开始被发现伴随一些副作用。S19△vjbR基因剔除菌种相比它的祖先在免疫性不受损的前提下消除了副作用,与微型胶囊技术相结合后有望成为人布鲁氏菌病疫苗。当然,人用疫苗的安全性和免疫效率可以在非人灵长类动物模型中检测。往后的研究还得继续寻找与疫苗的更高安全性、更多灵活性有关的基因群进行重组实验,才能使生产疫苗多一些被有关部门批准和许可的可能性。

纳豆多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠的肝肾抗氧化能力的影响

为了阐明纳豆多糖对小鼠肝和肾抗氧化能力的影响和最适作用浓度。用昆明种小鼠以环磷酰胺(80mg/kg)造成免疫低下动物模型,然后以纳豆多糖(200,500mg/kg)灌胃2周。试验中进行了一般症状的观察及体重变化的测定,测定了脏器指数,进行了肝肾的抗氧化特性的检查。试验结果表明,与对照组相比纳豆多糖高剂量组(500mg/kg)、低剂量组(200mg/kg)小鼠肝肾中的丙二醛(MDA)含量明显降低(P<0.05),且纳豆高剂量组和低剂量组比对照组肝、肾组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活力明显升高,纳豆多糖对小鼠肝肾产生抗氧化效果的合适剂量为200mg/kg。

东北黑熊不同基因组DNA模板来源的比较研究

文章主要探讨使用黑熊毛发作为试验材料替代其他生物样品进行遗传多样性研究的可行性,筛选满足试验需求的最佳使用量。以延边白头山制药有限公司养熊场的4头成年东北黑熊为试验材料,分别5次拾取2头黑熊铁笼内散落的带有毛囊的50、100根毛发,对麻醉的2头黑熊抽取全血3 mL以及皮下结缔组织1 g,并分别采用不同方法提取基因组DNA。以微卫星位点ABB12和UT35为引物,设置20、50、100 ng·μL-13种模板浓度进行PCR扩增。结果显示,采用50 ng·μL-1的模板浓度均可获得较好的PCR产物,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增基因具有较好的分辨效果。毛发DNA、血液DNA和组织DNA的PCR产物数量和质量并无明显差异。毛发数量与所提取的DNA浓度有一定关系。利用15个毛发DNA的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,均可观察到清晰的条带。研究结果进一步证明毛发DNA可作为东北黑熊遗传多样性研究的试验材料。

蓝莓粗多糖对自由基的清除作用及其抗溶血性

为研究蓝莓粗多糖的抗氧化作用,通过蓝莓粗多糖对羟自由基和DPPH自由基的消除作用以及对联苯三酚自氧化的抑制作用试验,检测了不同浓度、不同温度和不同作用时间对抗氧化性的影响,以及其抗溶血性.结果表明:随着多糖浓度的升高,其对羟自由基和DPPH自由基的清除能力增强,且50%清除率所对应的质量浓度(IC50)分别为2 mg/mL和0.5 mg/mL;蓝莓粗多糖体外抗氧化最适处理温度为40℃,最适处理时间为30 min;蓝莓粗多糖在体外37℃下不引起红细胞的溶血,安全性良好.

延边地区圈养黑熊基因DNA中部分微卫星位点的探讨

本研究采用分光光度法及琼脂糖凝胶电泳比较从黑熊组织、血液以及毛发中提取的黑熊基因组DNA,发现提取的DNA浓度及纯度均可满足后续试验的需要。其中毛发DNA提取方法具有高灵敏度、操作简单、非损伤等特点,有助于开展珍稀濒危物种和性情凶猛动物的遗传特性研究。本文还根据文献中黑熊的11个微卫星位点设计并合成引物,进行了不同引物PCR最佳反应条件的筛选。对黑熊DNA基因组PCR扩增结果发现其中10对引物能扩增出较明显的扩增带,为后续的黑熊亲子鉴定及遗传特异性分析实验提供了有价值的资料,为其亲权概率的准确性提供了良好的参考依据。

软枣猕猴桃蛋白酶提取液的体外亚硝酸盐清除和抗氧化活性初探

为了研究软枣猕猴桃蛋白酶提取液的抗氧化性能和它对亚硝酸盐的清除作用。本实验测定不同浓度的软枣猕猴桃蛋白酶提取液对亚硝酸钠和DPPH的清除能力。并向蛋白酶提取液中添加了一定浓度的抗坏血酸和丁羟基茴香醚,测定它们之间协同作用的抗氧化性能和清除亚硝酸盐能力。试验结果表明,软枣猕猴桃蛋白酶提取液的抗氧化性能和对亚硝酸盐的清除能力都与浓度呈正相关。软枣猕猴桃蛋白酶提取液可有效清除亚硝酸盐,并具有一定的抗氧化能力。

藜芦提取物的体外DPPH自由基清除作用和对PC9肺癌细胞增殖的影响

目的探讨藜芦（Veratrum nigrum）提取物对DPPH自由基清除作用和对人体肺癌细胞系PC9细胞增殖的影响，比较藜芦的水提物与醇提物的作用差异。方法DPPH自由基清除法和CCK-8细胞毒性检测法。结果藜芦水提物和醇提物在10mg／ml时体外DPPH清除率分别为52．3％和42，8％。在体外培养的条件下能明显抑制PC9细胞的增殖，并且呈浓度依赖性，而水提物只在高浓度时有抑制作用。结论藜芦提取物具有DPPH自由基清除作用，并且对PC9细胞的体外增殖有明显的抑制作用。

生物技术专业课题组活动的实践探讨

参考国内外实践教学的先进经验，总结了两年来的生物技术专业学生的课题组活动情况。通过规范课题组活动制度，丰富活动的内容，加强实践教学管理，加强和学生的交流，建立了行之有效的循序渐进的实验技能培训模式，对培养学生动手能力，改变“眼高手低”的状况有积极的实践意义。

和龙膨润土的不同饲喂量对小鼠的繁殖和体重的影响

本试验是在饲料中添加不同比例的膨润土，对小鼠进行了生长饲喂试验和Ｆ０代两胎繁殖试验，结果表明，添加１％和３％的膨润土与其它组相比，小鼠增重、仔鼠出生重、出生存活率和哺育存活率等差异极显著（Ｐ＜０．０１）或差异显著（Ｐ＜０．０５），且３％尤为明显．母鼠怀孕率、妊娠率在添加１％、３％膨润土时也明显高于其它两组．

浅谈如何搞好市县长任期经济责任审计

在干部管理监督机制中引入审计监督制度 ,是党和国家在新时期对领导干部权力实施有效监督和制约的一项重要举措。充分认识市县长任期经济责任审计的重要意义 ,抓住审计的重点 ,把握审计的关键 ,有利于全面推进市县长经济责任审计工作。

市县长任期经济责任审计的重点和关键

市、县长作为一个地区的行政首长，其管辖范围、职责权限的特殊性决定了其审计内容更为复杂，审计范围更为广泛，难度也就更大。因此，在市、县长经济责任审计时要突出重点，要紧紧抓住财政民歧审计这个基础，把市、县长经济责任审计与财政同级审、决算审计结合起来。对预逄内资金审计要细化，对预算外资金、专项资金量大的部门可以作个案抽查，重点检查收支管理情况。此外，在审计中还要重点检查一些领导干部盲目追求“政绩”而留下的各种包袱和债务。市、县长经济责任审计是财政审计的深化，财政审计的“人格化”。具体操作中应着生怪下几个内容。

塑料排水板排水固结法在路基软土施工中的应用

道路工程中经常遇到软土路段,其特点是含水量大、孔隙比大、压缩系数高、强度低,非常不利于施工和满足使用功能所具备的力学性能。通常的处理方式有塑料排水板排水固结法、砂井加固法、土工织物铺垫法、换土法、水泥搅拌桩加固法。根据不同的工程概况,选择合理的处理方式,既能有效达到设计目的满足功能需求、方便施工,又能降低造价。通过某道路软土段加固实例,分析对比了水泥搅拌桩和排水板法的区别、利弊,为类似工程合理选择加固方案提供参考。

东北黑熊养殖群体6个微卫星基因座遗传多态性研究

利用微卫星标记研究东北黑熊养殖群体的遗传多态性,及时掌握养殖群体的相关遗传信息,为今后黑熊的人工繁殖及育种、保种工作奠定基础。本研究选取了黑熊的6个微卫星基因座(MSUT2、MSUT4、UT3、UT35、UT36、UT38)对115头东北黑熊进行了遗传检测,利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行DNA分型以及ABI 3730遗传分析仪进行基因大小的判读,计算了6个微卫星位点的等位基因频率、多态信息含量(PIC)、杂合度等值。结果表明:东北黑熊养殖群体的6个微卫星座位共检测到51个等位基因,平均为8.5个;6个微卫星基因座的平均多态信息含量为0.641 9,其中5个微卫星基因座的PIC>0.5,6个微卫星基因座的平均观察杂合度、平均期望杂合度分别为0.529 9、0.641 7。数据证明,6个微卫星标记均具有高度多态性,可用于东北黑熊的遗传多样性分析。

9个微卫星基因座在东北黑熊养殖群体中的遗传多样性研究

选取了黑熊的9个微卫星基因座(ABB1、ABB3、ABB4、ABB5、ABB6、ABB7、ABB10、ABB11、ABB12)进行遗传多样性研究。结果:东北黑熊养殖群体的9个微卫星座位共检测到60个等位基因,平均为6.67个;9个微卫星基因座的平均多态信息含量为0.589 7,其中6个微卫星基因座的多态信息含量(PIC)>0.5,9个微卫星基因座的平均观察杂合度、平均期望杂合度分别为0.536 3、0.625 2。由此证明,9个微卫星标记均具有高度多态性,可用于东北黑熊的遗传多样性分析。