犬皮肤肿瘤3例

对送检的3例犬的病例样品分别进行了病理学诊断。通过甲醛固定、石蜡切片、H.E.染色后进行显微镜观察以及结合相关病理学知识,初步判定为非亲上皮性淋巴瘤、肥大细胞瘤和组织细胞瘤。非亲上皮性淋巴瘤表现为在真皮深层和皮下组织形成无包膜的片层聚集物或由相对单一形态细胞组成的血管周围结节性聚集物。肥大细胞瘤可见胞浆颗粒、嗜酸性粒细胞增多、胶原溶解,甲苯胺蓝染色后瘤细胞的胞浆内出现特有的紫红色颗粒。组织细胞瘤则有一个"顶部厚重"的结构,瘤细胞侵入表皮内呈弥漫性的增生。

黄芩苷诱导大鼠气管上皮细胞Mx1和PKR表达的研究

为了研究黄芩苷能否诱导大鼠气管上皮细胞表达抗病毒蛋白,以体外培养的大鼠气管上皮细胞(tracheaepithelial cells,TECs)为模型,采用Western Blotting方法检测了不同质量浓度(10、20、30μg/mL)和不同时间段(6、12、24h)黄芩苷诱导TECs表达抗病毒蛋白(AVPs)Mx1和PKR的量。结果表明,黄芩苷在3个浓度梯度和3个时间段均可以诱导TECs分泌抗病毒蛋白Mx1和PKR;并在30μg/mL,24h时使TECs所产生的抗病毒蛋白最高。这一结果为体外筛选诱导TECs表达抗病毒蛋白的中药有效成分提供了参考,为进一步研究中药抗病毒机理提供了实验依据。

内质网应激偶联炎性反应研究进展

内质网是真核细胞蛋白合成和折叠的主要细胞器,当内质网内蛋白合成或折叠负担增加,引起未折叠或错误折叠蛋白增多时,可激活内质网几条特定信号通路,启动未折叠蛋白反应,这对维持细胞稳态有重要意义。越来越多研究表明,多种炎性反应疾病与内质网应激有密切联系。一方面,内质网应激引起的未折叠蛋白反应可以诱发或者抑制炎症,另一方面,炎性反应也能影响蛋白折叠,从而促进或缓解内质网应激。2型糖尿病、肿瘤和动脉粥样硬化等多种重大疾病的病理机制都涉及内质网应激与炎性反应的相互作用,对该问题的深入研究不仅能加深人们对这些疾病发病机制的理解,也有助于相关药物的研发。

结核分支杆菌复合群DNA分型研究进展

1882年首次分离到结核分支杆菌病原体以来,已知结核分支杆菌复合群(MTBC)包括人结核分支杆菌、牛分支杆菌、非洲分支杆菌、田鼠分支杆菌等,是在全球范围内具有重要影响的人兽共患病病原体,但近年对它们的研究还远远不够。MTBC在核苷酸水平约有99.9%的相似度,已有Spoligotyping分型、MIRU-VNTR分型等一系列的分子生物学技术用于基因组DNA指纹图谱研究,其中基于全基因组分析的分型方法最为可靠。随着DNA测序技术的进步,MTBC菌株全基因序列数据不断丰富,基于全基因组分析的分型方法在不断增多。论文对MTBC的基因组分型技术进行总结并提出展望,以便于进一步研究基因组多样性对基因功能和宿主免疫识别等的影响,进而为防控这类病原体提供依据。

结核病牛多重耐药非结核性分枝杆菌的分离鉴定

为了调查分析目前牛群中结核病的实际感染状况,试验采用组织病理学筛查,菌株分离,16S rRNA、hsp65和rpoB三基因分析鉴定,抗结核常用药物的药敏测定等方法对某大型屠宰牛场屠宰牛的结核感染状况进行了研究。结果表明：从1 576头屠宰牛中筛选出11个疑似结核菌感染样本,经培养最终获得8株分枝杆菌分离株,分别命名为G46、F90、F20、FJ、Y28D、Y28P、5S、Y5,其中G46、F90、F20、FJ、Y28D、Y28P为偶发分枝杆菌,5S为鸟结核分枝杆菌,Y5为M.conceptionense并且M.conceptionense首次从牛中分离鉴定;16S rRNA鉴定所有菌株均为结核分枝杆菌属,hsp65和rpoB序列分析比对鉴定G46、F90、F20、FJ、Y28D、Y28P与偶发分枝杆菌的相似性为100%,5S和Y5与鸟结核分枝杆菌和M.conceptionense的相似性为100%;除菌株F20外,其余菌株表现出多重耐药性。说明目前牛群中结核病感染状况不容乐观,需要重视。

屠宰牛肝脏和肺脏组织的病理学观察

肝脏和肺脏及肺门淋巴结是牛的重要实质器官,也是屠宰后检验的重要脏器之一。发生的病变能够反映出屠宰牛机体的健康状况。为了更好地了解目前屠宰牛的健康状况,本调查是对某屠宰牛场的屠宰牛进行2个月龄大体病变观察和持续采样,对样品制作病理组织切片,进行显微镜观察。结果目前屠宰牛的肝脏和肺脏组织病变比率较高,占总屠宰量的比率分别达到4.89%(77/1576)和12.5%(197/1576),在一定程度上表明屠宰牛的健康状况不容乐观。本试验的结果可为屠宰牛尤其是肉用淘汰奶牛的检疫规范和监管措施的改进提供参考。

PrP106-126神经毒性多肽对原代神经元造成病理性损伤

目的系统地研究PrP106-126神经毒性多肽对原代神经元造成的损伤。方法使用出生24 h内的SD乳鼠分离培养原代神经元,经过PrP106-126处理后,利用免疫印迹技术检测凋亡相关蛋白的变化;利用透射电镜观察功毒后原代神经元亚细胞结构的变化情况;利用流式细胞仪检测细胞活性;利用免疫荧光技术观察细胞凋亡情况。结果随着PrP106-126刺激原代神经元的时间延长,抑制凋亡蛋白的表达量不断下降,促凋亡蛋白的表达量不断升高;透射电镜显示,经过多肽刺激的原代神经元的细胞器结构有不同程度的损伤,细胞胞浆内出现大小不等的单层或多层空泡结构;TUNEL细胞凋亡检测和Annexin V-FITC细胞活力检测试剂盒的检测结果都表明,经多肽刺激后,原代神经元的细胞活力显著下降,并有大量神经元发生凋亡。结论 PrP106-126神经毒性多肽激活促凋亡信号通路,造成细胞内的平稳紊乱和超微结构损伤,诱导原代神经元发生凋亡,为朊病毒疾病研究模型的建立提供全面可靠的证据。

干扰素-γ诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞表达细胞黏附因子-1和干扰素-γ受体α

目的以体外培养的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(RIMMVECs)为研究对象,探讨干扰素-γ(IFN-γ)对于体外培养的RIMMVECs表达细胞黏附因子-1(ICAM-1)和IFN-γ受体α(IFN-γRα)的影响。方法体外分离培养RIMMVECs,用不同浓度的IFN-γ对所培养的RIMMVECs进行诱导,通过荧光定量RT-PCR法和流式细胞术,从mRNA和蛋白水平检测活化后的RIMMVECs表达ICAM-1和IFN-γRα的情况。结果浓度为20μg/L和40μg/L的IFN-γ可以激活RIMMVECs,在mRNA和蛋白水平均能提高ICAM-1的表达,并且6 h时达到高峰;20μg/L的IFN-γ刺激RIMMVECs后,可使其上调表达IFN-γRαmRNA,但是蛋白表达量却随着刺激时间逐渐降低;而40μg/L的IFN-γ刺激RIMMVECs 2 h后,IFN-γRαmRNA达到峰值,6 h之后,其表达量呈下降趋势,IFN-γRα蛋白浓度也随之逐渐降低;10μg/L的IFN-γ对于ICAM-1和IFN-γRα的表达无影响。结论 IFN-γ可能是通过影响微血管内皮细胞(MVECs)表面IFN-γRα分子和ICAM-1的表达,从而调控和参与细胞免疫反应和炎症反应。

三种炎症因子在致炎大鼠乳腺组织中的表达

为探明在酯多糖（LPS）致炎的大鼠乳腺中,黏附因子-1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）表达分布的变化。取产后5 d乳房注射LPS致炎大鼠的乳腺组织,及LPS致伤的体外培养大鼠乳腺MVECs（Microvascular Endothelial Cells）,采用免疫组化方法检测ICAM-1、TNF-α和IL-1β的表达。结果表明：LPS处理大鼠乳腺后4~24 h内,乳腺组织切片试验和体外培养大鼠乳腺微血管内皮细胞（Rat MammaryMicrovascular Enclothelial Cells,RMMVECs）试验中ICAM-1和IL-1β的表达逐渐增强,TNF-α在乳腺组织切片试验中6 h表达显著增强,之后则逐渐减弱。在体外培养RMMVECs中-α表达逐渐增强。表达部位主要在乳腺上皮细胞和血管内皮细胞,IL-1β在腺泡腔中的白细胞中也有表达。由此可见,LPS处理大鼠乳腺后ICAM-1、TNF-α和IL-1β这三种细胞因子均参与了乳腺炎症过程中的免疫反应。

内质网应激诱导的生存与凋亡机制

内质网是细胞内重要的细胞器。未折叠蛋白或错误折叠蛋白在内质网内的大量堆积能够引起内质网应激反应(ERS)。内质网通过激活未折叠蛋白反应(UPR),暂停早期蛋白质的合成,减少未折叠蛋白或错误折叠蛋白在内质网内的聚集,从而恢复细胞的正常生理功能,保护细胞。但如果内质网应激反应持续进行或无法缓解,则会引起促凋亡因子的产生,最终导致细胞凋亡。

REST缓解由PrP106-126毒性多肽诱导的原代神经元死亡

为检测神经元限制性沉默因子(REST)蛋白过表达或干扰对由PrP106-126毒性多肽引起的原代神经元死亡的影响,首先通过脂质体转染法将已经构建好的pCMV-HA-REST质粒转染原代神经元,或利用靶向REST的小干扰siRNA技术干扰原代神经元中REST蛋白的表达。用PrP106-126毒性多肽刺激构建好的REST过表达或干扰的原代神经元,利用Annexin V-FITC试剂盒检测细胞活性;利用TUNEL和Hoechest试剂盒,在激光共聚焦显微镜下直接观察细胞凋亡情况;在透射电镜下观察原代神经元亚细胞结构的变化和损伤情况;使用JC-1线粒体膜电位试剂盒检测线粒体膜电位的改变,同时检测凋亡相关蛋白FOXO1、细胞色素C以及Caspase-3的变化情况。结果显示,受到多肽刺激后,REST的过表达可减轻由毒性多肽引起的神经元死亡、神经元空泡化、细胞器损伤,抑制线粒体膜电位的改变,维持促存活蛋白FOXO1的表达,阻止线粒体向胞浆中释放细胞色素C以及Caspase-3的激活。相应地,干扰REST后,可加剧毒性多肽对神经元的损伤并抑制FOXO1的表达。这表明REST蛋白的过表达可缓解由PrP106-126毒性多肽引起的神经元死亡,对神经元起保护作用,为进一步阐释REST对朊病毒及相关神经退行性疾病引起的病理性损伤的治疗作用和神经保护机制提供依据。

结核分枝杆菌感染相关microRNA的研究进展

microRNA是一类广泛存在真核生物中的长度约为22 nt的非编码小分子RNA,其主要是通过与靶基因信使RNA的特异性位点结合,使得靶基因降解或翻译受阻。microRNA可以调控许多生物学过程,如细胞分化、细胞增殖、细胞凋亡、细胞代谢、细菌感染和免疫等多个生理和病理过程。结核病是一种由结核分枝杆菌引起的人畜共患慢性呼吸道传染病,由于它已成为公共卫生防控的难题,深入研究结核病的感染和发病机制显得尤为迫切。有研究表明,microRNA与结核分枝杆菌感染的发生和发展相关,深入研究两者的关系,可为结核病的诊断和治疗提供新的理论支持。因此,笔者综述了结核分枝杆菌感染相关的microRNA的研究进展,希望为结核病的预防、控制和治疗提供新的思路。

REST缓解由PrP106-126毒性多肽诱导的原代神经元突触和神经纤维的损伤

为了检测REST蛋白过表达或干扰对由PrP106-126毒性多肽引起的原代神经元纤维的影响,本试验通过免疫荧光技术和免疫印迹方法分别检测受PrP106-126刺激后的原代神经元中REST表达的变化情况。通过脂质体转染方法将已经构建好的pCMV-HA-REST质粒转染进入原代神经元,或利用靶向REST的小干扰siRNA技术干扰原代神经元中REST蛋白的表达。用PrP106-126毒性多肽刺激转染了REST过表达或干扰质粒的原代神经元,利用免疫印迹检测突触后蛋白PSD-95的变化情况;利用免疫荧光观察突触后蛋白和神经纤维的损伤情况。结果显示,受到多肽刺激后,REST从神经元的胞浆向胞核转移的同时表达量也逐渐增加,24h时达到顶峰,之后缓慢减少。生理情况下,过表达REST促进突触后蛋白PSD-95的表达;病理情况下,REST的过表达减轻由毒性多肽引起的突触损伤、神经纤维断裂。相应地,干扰REST后,加剧毒性多肽对神经纤维的损伤。结果表明,REST蛋白的过表达缓解PrP106-126毒性多肽对原代神经细胞造成的病理性损伤,为进一步阐释REST对朊病毒及相关神经退行性疾病引起的病理性损伤的治疗作用和神经保护机制提供了理论依据。

开展型号标准化工作的体会

详细介绍了该厂在型号研制中是如何开展标准化工作的。其中综述了型号研制中标准化工作的重要性 ;提出了标准化工作应贯穿型号研制工程始终的原则 ;

航空工业企业如何应对加入WTO——加强企业标准化建设,练好企业自身内功

指出了我国加入WTO后,航空工业企业面临着国内、国际竞争的严酷形势,由此设想了几点对策:企业应从加强内部标准化建设入手,利用网络为产品研制提供最新的国际标准、技术动态和准入规则等信息;建立一支系列产品和厂内专业通用零部件研制队伍,实现产品及部件模块化设计;长期不懈地进行“三大规范”的编制工作,打好企业的技术基础等。