如何匡正新自由主义对我国主流意识形态的侵蚀

新自由主义自诞生之日起便具有强烈的意识形态属性,而后经过欧美国家的对内对外政策实践,更是逐步沦为美式自由资本主义及其主流价值观影响全球治理的理论工具。新自由主义思潮在我国的传播,给我国主流意识形态、传统行为观念和转型期价值理念带来严重的负面影响,我们应当加强对新自由主义的研究与批判,深刻剖析其理论本质,引导媒体舆论导向与隐性立场,加强主流意识形态建设;同时,积极化解转型期社会矛盾,增强群众的幸福感,从价值观念到政策实践上对新自由主义产生的负面影响予以匡正。

W86F/W86A突变对细菌视紫红质光循环影响的差异性分析

细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,bR)是一种光驱受体蛋白,每个活性单元由3个单体组成,每个单体由一分子视蛋白和一分子的视黄醛发色团共价结合而成,其功能为从胞内向胞外定向传输质子,利用形成的质子浓度梯度将光能转化为化学能。光照后视黄醛发色团构型发生all-trans向13-cis转变,蛋白的构象也随之发生了一系列具有稳定中间态的变化并驱动质子的定向传递。为探讨bR视黄醛键合区保守性氨基酸色氨酸86(Tryptophan 86,W86)对其光循环中间态和质子泵功能的影响,本研究采用定点突变技术将W86突变为侧链大小不同的F86和A86,通过原位紫外-可见光吸收光谱、闪光光解光谱、pH滴定、固体核磁共振等技术手段,探究W86F和W86A突变对bR光循环及质子泵功能影响差异性的分子机制。结果表明,W86F和W86A突变均造成了bR暗适应状态下视黄醛顺反异构平衡向顺式构型占优的方向移动,且W86F突变可造成反式构型的完全消失。此外,无论是W86F还是W86A突变都造成了蛋白光循环中间态的减弱且衰减延长,以及质子泵功能减弱,但影响机制各有所不同,这可能与这两个突变对视黄醛多烯链上电子云的分布以及周围残基造成的扰动程度不同有关。

类胡萝卜素发色团对光驱质子泵aR4关键残基F146功能的影响

古紫质-4(archaerhodopsin-4,aR4)是一种类似于细菌视紫红质(bacterirhodopsin,bR)的光驱质子泵蛋白,同样具有三聚结构。其差异性在于,每个单体除了由一分子视蛋白和一分子视黄醛发色团共价结合而成外,单体间还镶嵌有一个类胡萝卜素发色团菌红素(bacterioruberin),同时二者具有不同的质子传输时序。苯丙氨酸-146(phenylalanine-146,F146)和甲硫氨酸-145(methionine-145,M145)是aR4和bR视黄醛键合区处在相同位置且唯一不同的关键残基。已有研究结果表明,bR的M145F突变可影响其暗适应态下视黄醛的顺反异构平衡,而且对其光循环有着重要的影响。然而,F146在aR4中的作用尚不清楚,特别是菌红素对质子泵视黄醛键合区关键残基的作用是否存在调控尚未见报道。为此,本研究采用定点突变技术、原位紫外-可见光吸收光谱、闪光动力学光谱、酸碱滴定和固体核磁共振等技术手段,对比分析F146M和M145F单点突变对aR4和bR视黄醛键合区和光循环影响的共性和差异性。研究结果表明,F146和M145在aR4和bR中均起到维持视黄醛顺反异构平衡的作用,突变可造成键合区装配紧密程度和胞外侧氢键网络的改变,从而参与调控质子释放至胞外的过程。此外,本研究发现菌红素不仅具有稳定aR4三聚结构的作用,更重要的是对键合区关键残基F146存在调控作用,菌红素的缺失可造成F146作用的弱化。

M145F/F146M突变对光受体蛋白细菌视紫红质和古紫质4光循环的影响

古紫质4(archaerhodopsin 4,aR4)与细菌视紫质(bacteriorhodopsin,bR)同属于盐杆菌科,同源性59%,均为光驱质子泵。其功能是在光照条件下将质子由胞内泵到胞外形成跨膜质子梯度,该梯度差被膜上另外一种蛋白ATP合成酶用于ATP的合成,从而完成光能向生物能的转化。aR4和bR具有相似的光循环过程,但质子传递时序不同,aR4是先从胞内吸收质子再将质子释放到胞外,而bR恰好相反。甲硫氨酸-145是位于bR视黄醛发色团键合区的一个重要残基,对其光循环有着重要的影响,而在aR4中处在相应位置上的苯丙氨酸-146是其视黄醛键合区与bR唯一不相同的残基。因此通过定点突变,采用紫外可见吸收光谱、动力学光谱、质子泵功能检测、低温透射红外光谱等手段对比分析研究M145F和F146M单点突变对bR和aR4光循环造成的影响,有助于深入理解aR4结构与功能的关系。研究结果表明,M145F突变造成了bR光循环L的丢失和质子泵功能的减弱,而F146M突变并未对aR4的光循环造成显著影响,且突变后aR4质子释放时序没有反转,表明该位置上的残基在两个体系中的作用不尽相同。