绝经后类风湿关节炎女性骨吸收与放射学进展相关

目的探讨绝经后类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者骨代谢指标与疾病活动指标、骨矿物质密度(bone mineral density,BMD)和放射学进展的相互关系。方法本研究共募集了68例绝经后RA患者。血清检测指标包括红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)和抗环胍氨酸肽抗体(CCP)。同时检测了钙、维生素D、骨碱性磷酸酶(BAP)和β胶原特殊序列(β-crosslaps)的水平。采用双能X线骨吸收仪(DXA)测量腰椎和左股骨颈的BMD(g/cm2)。DAS28和Sharp评分分别用于计算疾病活动度和放射学进展评估。运用Spearman相关分析对临床血清标记和疾病指标的相关性进行分析。结果纳入患者的异常BMD比率为94.12%,其中29.41%(20/68)为骨量减少,而64.71%(44/68)为骨质疏松。ESR、CRP和DAS28之间显著相关(P<0.05),均提示疾病活动。血清β-crosslaps水平与任一疾病活动指标均无相关性(p均>0.05),但与Sharp评分呈正相关(r=0.776,P=1×10-6)。结论绝经后RA患者骨量减少及骨质疏松现象突出,可能与疾病活动和/或关节结构破坏有关。β-crosslaps是与放射学进展相关而与疾病活动无关的有价值的血清标记。

珠海丽珠乙型肝炎酶联免疫吸附试验试剂盒性能评价

目的对珠海丽珠公司生产的乙型病毒性肝炎(简称乙肝)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(以下简称"珠海丽珠试剂盒")进行性能验证,为实验室选用合适的方法和试剂提供依据。方法参考美国临床实验室标准化研究所EP15-A2标准,采用重复性代替精密度,以乙肝标志物的阳性、阴性符合率和一致率分别作为批内重复性精密度和批间重现性精密度评价指标;选取2015-2016年卫生部临检中心感染性血清学标志物A室间质评物进行准确性验证;将已知浓度的高值质控品用阴性患者新鲜血清作梯度稀释后进行检出限验证;以罗氏电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测结果为标准,对灵敏度、特异度及总符合率进行验证,同时,对ELISA、胶体金免疫层析法(GICT)和ECLIA检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的灵敏度、特异度等进行比较。结果珠海丽珠试剂盒的批内重现性精密度符合率、批间重现性精密度一致率、准确度符合率均为100%。HBsAg、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)的检出限分别为1.33IU/mL、30.00mIU/mL、2.00NCU/mL、4.00NCU/mL、0.44NCU/mL。珠海丽珠试剂盒检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的灵敏度、特异度、总符合率及约登指数均达到较高的水平。ELISA检测HBsAg的灵敏度优于GICT。结论珠海丽珠试剂盒具有较高的精密度、灵敏度及特异度,能够满足临床检测的质量要求。

非小细胞肺癌早期诊断的潜在生物标志物:血浆miRNA-23a和miRNA-451

目的研究血浆中miRNA23-a及miRNA-451作为潜在生物标志物在非小细胞肺癌(NSCLC)中早期诊断的价值。方法选取本院50例NSCLC病例和50例健康对照,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定组织和血浆中miRNA23-a及miRNA-451的表达水平,分析miRNA23-a及miRNA-451在组织和血浆中的表达差异及相关性。同时使用受试者工作特征曲线(ROC曲线)和线下面积(AUC)评估miRNA23-a、miRNA-451及CEA在NSCLC中的诊断能力。通过瞬时转染技术,在NSCLC细胞系A549中分别抑制miRNA-23a和miRNA-451的表达,使用qRT-PCR检测SPRY2 mRNA及MIFmRNA的表达水平。结果miRNA-23a及miRNA-451在NSCLC组织中的表达与吸烟状态、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期显著相关(P<0.05)。与对照组相比,miRNA-23a在NSCLC患者的肿瘤组织和血浆中显著升高,而miRNA-451明显低于对照组。这2种miRNA的水平在肿瘤组织与血浆中表现出相同的表达趋势,呈高度相关。ROC分析显示,miRNA-23a和miRNA-451较之传统的肿瘤标志物CEA,AUCROC、灵敏度和特异度均显著高于后者(P<0.05)。当miRNA23-a及miRNA-451联合检测时,AUCROC/灵敏度/特异度均得到改善,分别为0.900/78%/86%。在NSCLC细胞系A549中分别抑制miRNA-23a和miRNA-451的表达后,SPRY2 mRNA及MIFmRNA表达水平显著升高。结论miRNA-23a和miRNA-451可用作NSCLC早期诊断的候选标志物,这2种标志物联合检测对NSCLC诊断更有效。

血清HE4、CYFRA21-1、NSE、Pro-GRP联合检测在女性肺癌中的诊断价值

目的探讨血清人附睾蛋白4(HE4)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NES)、胃泌素释放前体(Pro-GRP)在女性肺癌诊断中的价值。方法选取该院100例女性肺癌患者作为研究对象,100例女性肺部良性疾病者和100例女性健康体检者作为健康对照组,测定血清HE4、CYFRA21-1、NES、Pro-GRP水平,并进行相关的统计分析。结果肺癌患者血清HE4、CYFRA21-1、NES、Pro-GRP水平显著高于肺部良性疾病与健康对照组(P<0.05),肺部良性疾病组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)。血清HE4表达水平在不同肺癌分期及不同病理类型中差异无统计学意义(P>0.05)。经受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析可知,HE4、CYFRA21-1、NES、Pro-GRP诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.927、0.758、0.652、0.799,最佳临界值分别为63.38pmol/L、2.05ng/mL、14.05ng/mL、58.50pg/mL,灵敏度分别为88.0%、80.0%、60.0%、71.0%,特异度分别为96.0%、73.0%、87.0%、89.0%,HE4明显优于其他3个检测项目。HE4、CYFRA21-1、NES、Pro-GRP联合检测,亦可提高肺癌诊断灵敏度,为89.0%,但特异度有所下降,为88.0%。结论女性肺癌患者中血清HE4水平升高显著,可用作肺部良恶性疾病鉴别诊断的候选标志物,HE4、CYFRA21-1、NES、Pro-GRP联合检测对诊断女性肺癌有较高的灵敏度,适用于临床中女性肺癌普查。

纳米二氧化硅经鼻黏膜染毒对大鼠睾丸毒性的机制研究

目的:利用蛋白质组学技术研究纳米二氧化硅颗粒对SD雄性大鼠生殖系统的损伤机制,为深入了解纳米材料的毒性效应及机制提供科学依据。方法:采用鼻腔滴入纳米二氧化硅分散液方式对SD雄性大鼠进行染毒,设置为纳米二氧化硅组;同时经鼻腔滴入生理盐水设置为生理盐水对照组。两组于4周后断颈处死并取睾丸组织。利用荧光差异双向电泳(2D-DIGE)联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术筛选并鉴定出差异表达蛋白,Western blot验证差异蛋白。结果:共筛选并鉴定出9个差异表达的蛋白,分别是GRP78、HSP7C、KNT1、HSP72、ALBU、STIP1、PDIA1、ALDR和GDIR1;并经Western blot验证了PDIA1和HSC70表达水平变化与2D-DIGE实验结果一致。结论:本研究发现纳米二氧化硅作用后大鼠睾丸组织中凋亡相关蛋白PDIA1和HSC70发生异常变化,初步阐明了二氧化硅染毒导致大鼠生殖毒性的细胞凋亡分子机制,为预防纳米二氧化硅毒性奠定基础。

microRNA在肥胖相关肾病发生的临床应用

目的:分析microRNA在肥胖相关肾病(糖尿病肾病)发生中的作用。方法:以肥胖相关性肾病db/db小鼠为观察组(18只),以db/m小鼠为对照组(18只),两组小鼠均为周龄,采用实时定量PCR对小鼠8、12、16周时肾组织中microRNA(miR-215)表达情况进行动态监测,使用Westernblot法测CTNNBIP1的mRNA表达,并以双荧光素酶报告确证microRNA对CTNNBIP1的作用。结果:对照组小鼠CTNNBIPl、miR-215表达未随周龄增加出现明显差异,观察组小鼠miR-215表达随周龄增加上升、CTNNBIPl表达随周龄增加下降,P<0.05;组间比较miR-215、CTNNBIPl表达有差异,P<0.05;4组荧光素酶相对活性低于1、2、3组,4组荧光表达强度低,P<0.05。结论:miR-215可能通过调控CTNNBIPl靶基因表达,从而参与肥胖相关性肾病的形成。

唇腭裂在胎儿期发育异常的染色体核型和微阵列分析

目的探讨染色体G显带和微阵列分析(chromosomal microarray a-nalysis)在唇腭裂发育异常胎儿的结果关系。方法回顾性研究200例孕妇资料的产前诊断、胎儿染色体G显带和微阵列分析的关系,这些孕妇资料均为产前超声筛查发现胎儿期存在唇腭裂。唇裂根据嘴唇裂开类型不同分为3组,分别是唇裂(上唇部不同程度的裂开)、腭裂(腭裂存在软组织畸形,可伴骨组织缺损和畸形)和唇裂合并腭裂(整个上唇直至鼻底都会裂以上唇裂伴有牙槽嵴裂和腭裂为特征的先天性畸形),同时,又根据结构或者超声指标异常方面分为单纯组和合并组。将这200例病例进行微阵列分析和染色体G显带分析,通过用x^2检验比较唇腭裂在胎儿期发育异常与染色体核型之间的关系。结果(1)染色体检测出异常的有67例,异常率为33.5%(67/200)。数目异常57例占85.07%(57/67),21-三体28例占41.79%(28/67),18-三体18例占26.87%(18/67),13-三体8例占11.94%(8/67),性染色体异常3例占4.48%(3/67);结构异常10例占14.93%(10/67),在结构异常中的平衡易位2例占2.99%(2/67),不平衡易位8例占11.94%(8/67)。(2)唇裂85例,染色异常19例,异常比例为22.35%(19/85)。腭裂36例,染色体异常15例,异常比例占41.67%(15/36)。唇裂合并腭裂79例,染色体异常33例,异常比例占41.77%(33/79),多组x^2检验的两两比较,差异无统计学意义(x^2=2.211、2.864、2.658,P=0.105、0.110、0.108)。单纯组97例中检出胎儿染色体异常26例占26.80%(26/97),合并组103例中检出胎儿染色体异常41例占39.81%(41/103),两组差异有统计学意义(x^2=4.115,P=0.045)。结论染色体的异常与胎儿唇裂、腭裂及唇裂合并腭裂的关系非常密切。唇裂、腭裂及唇裂合并腭裂三者差异不大,如果超声检查合并了其他结构异常或者超声软指标的问题,建议进行介入性的产前诊断检查。

结直肠癌组织lncRNA CRNDE、miR-181a表达变化及其与患者临床病理特征的关系

目的探讨结直肠癌组织长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)、微小RNA-181a(miR-181a)表达变化及其与患者临床病理特征的关系。方法选择结直肠癌组织与癌旁正常组织各91例份,采用RT-qPCR法检测lncRNACRNDE、miR-181a表达,并分析二者表达的关系及其与患者临床病理特征的关系。结果与癌旁正常组织比较,结直肠癌组织lncRNACRNDE相对表达量明显升高,miR-181a相对表达量明显降低(P均<0.05)。结直肠癌组织lncRNA CRNDE、miR-181a相对表达量与肿瘤临床分期、组织分化程度有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位及淋巴结转移无关(P均>0.05)。结直肠癌组织lncRNACRNDE相对表达量与miR-181a相对表达量呈明显负相关关系(r=-0.632,P<0.05)。结论结直肠癌组织lncRNACRNDE表达升高、miR-181a表达降低,二者共同参与结直肠癌的恶性进展。

代谢综合征及其相关指标与结直肠腺瘤发生的关系

目的探讨代谢综合征及其相关指标与结直肠腺瘤发生的关系。方法回顾性分析2014年1月至2015年6月间在香港大学深圳医院接受结肠镜检查的289例患者临床资料，其中130例结肠镜检查未发现异常（正常组）；159例经病理证实为结直肠腺瘤（腺瘤组）。比较两组患者代谢综合征相关指标（包括体质指数、腰围、臀围、血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、胆固醇）的水平，并分析代谢综合征及其相关代谢性疾病与结直肠腺瘤发生的关系。结果两组患者在性别、年龄、吸烟史、长期饮酒史、规律运动、结直肠癌家族史及长期服用非甾体类抗炎药物史方面的差异均无统计学意义（P〉0．05）。与正常组相比，腺瘤组患者的体质指数大[（23．5±3．2）kg／m^2比（22．7±2．8）kg／m^2，t=1．97，P=0．050]，腰围长[（83．4±10．3）cm比（79．6±13．8）cm，t=2．46，P=0．015]，血清高密度脂蛋白[（1．3±0．3）mmol／L比（1．2±0．3）mmol／L，t=2．03，P=0．044]及胆固醇水平高[（5．4±1．O）mm0L／L比（5．0±1．1）mmol／L，t=2．39，P=0．018]；而两组患者臀围、腰围臀围比、空腹血糖及甘油三酯水平的差异均无统计学意义（均P〉O．05）。代谢综合征[69．8％（37／53）比51．7％（122／236），P=0．017]、超重或肥胖[65．1％（56／86）比50．7％（103／203），P=0．025]、高血压[67．3％（37／55）比52．1％（122／234），P=0．046]及高胆固醇血症[66．7％（64／96）比49．2％（95／193），P=0．005]患者结直肠腺瘤发生率明显更高。结论代谢综合征患者发生结直肠腺瘤的风险增加，其机制可能与血清胆固醇和高密度脂蛋白水平升高所致的胆固醇分解代谢增强有关。有必要加强对代谢综合征，尤其是中心型肥胖及高胆固醇血症的人群进行结肠镜筛查，以早期发现、早期治疗结直肠腺瘤。

结肠黑变病对结直肠息肉的影响

目的研究结肠黑变病对结肠息肉发生率、病理类型等的影响。方法回顾性分析自2012年8月至2015年12月在我院经全结肠镜诊断的结肠黑变病98例,组成黑变病组;随机选取结肠镜诊断无结肠黑变病252例,组成非黑变病组。比较两组一般情况、结肠息肉发病率、息肉病理类型等。结果结肠黑变病II度、III度累及全结肠的比例分别为71.0%、78.6%,高于黑变病I度的50.9%(P=0.01)。结肠黑变病组结肠息肉发现率达40.8%,远高于非结肠黑变病的23.0%(P=0.001),而且黑变病组在横结肠、降结肠、盲肠及全结肠≥3个部位发现结肠息肉的比例均高于非黑变病组,P均<0.05,但两组息肉中腺瘤的比例分别为80%、67.9%(P=0.117),差异无统计学意义。黑变病I、II、III度在息肉检出率、息肉病理类型的比较上,均P>0.05,差异无统计学意义。左半结肠为主型、右半结肠为主型、全结肠型黑变病在息肉检出率、息肉病理类型的比较上,也均P>0.05,差异无统计学意义。结论结肠黑变病患者结肠息肉发生率高,需加强对结肠黑变病患者肠镜筛查,预防结直肠癌发生。结肠黑变病的病变程度、部位对结肠息肉的检出率、病理类型无影响。

结直肠腺瘤患者人体组成特点

目的人体组成对结直肠腺瘤发病的影响尚不明确。本研究应用生物电阻抗分析(bioelectrical impedance analysis,BIA)检测结直肠腺瘤患者的人体组成,分析结直肠腺瘤的人体组成特点。方法回顾性分析2014-01-01-2015-06-01香港大学深圳医院无症状行结肠镜筛查的患者292例,依据肠镜检查及息肉病理结果分为结直肠腺瘤组158例和正常对照组134例。记录吸烟、饮酒和药物服用史等,测量身高、体质量、腰围和臀围;应用BIA检测研究对象身体组成,比较结直肠腺瘤组与正常对照组在人体组成的差别,分析人体组成对结直肠腺瘤发病的影响。结果结直肠腺瘤组腰围平均为(83.3±10.4)cm,高于正常对照组的(79.2±14.1)cm,P=0.015。在人体组成上,结直肠腺瘤组体脂率平均为(28.3±6.97)%,高于正常对照组的(26.2±6.41)%,P=0.034。结直肠腺瘤组腰臀脂肪比平均为0.91±0.065,正常对照组平均为0.88±0.059,P=0.024。结直肠腺瘤组患者体脂率超标的比例为75.9%,高于正常对照组的59.7%,P=0.003。结直肠腺瘤组腰臀脂肪比超标的比例为68.8%,正常对照组为56.7%,P=0.041。结论结直肠腺瘤患者腰围增加,人体组成以体脂率和腰臀脂肪比升高为特征。

外周血LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT1检测对非小细胞肺癌诊断价值

目的大量研究表明,长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)在体液中的异常表达可以作为非侵入性肿瘤标志物。然而,血浆中LncRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)诊断中的临床意义尚不明确。因此,本研究检测转化生长因子-β(LncRNA-ATB)和结肠癌相关转录物1(LncRNA-CCAT1)在NSCLC患者血浆中表达水平,并评估了这2种LncRNA在NSCLC中的诊断价值。方法回顾性分析2016-06-05-2017-12-25南方医科大学深圳医院招募的50例NSCLC患者、50例良性肺部疾病患者(支气管扩张12例,间质性肺炎25例,肺囊肿13例)及50名健康对照受试者资料,使用实时荧光定量PCR(real-time PCR,qRT-PCR)技术检测LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT 1在组织和血浆中的表达水平,分析其在组织和血浆中的表达差异及相关性。同时使用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)评估LncRNA-ATB、LncRNA-CCAT1及癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)在NSCLC中的诊断能力。结果 NSCLC患者组LncRNA-ATB在癌旁组织的表达量为1.290±0.464,在肿瘤组织的表达量为2.887±0.644,差异有统计学意义,t=-15.629,P<0.001。LncRNA-CCAT1在癌旁组织的表达量为1.129±0.051,在肿瘤组织的表达量为2.266±0.077,差异有统计学意义,t=-12.269,P<0.001。与癌旁组织相比,LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT1在肿瘤组织表达量均升高。LncRNA-ATB在健康对照组、良性肺部疾病组及NSCLC组的血浆中表达量分别为1.387±0.103、1.434±0.607和2.267±0.103;LncRNA-CCAT1分别为1.250±0.507、1.283±0.455和1.863±0.697。与健康对照组相比,LncRNA-ATB (Z=-0.979,P=0.328)和LncRNA-CCAT 1(Z=-0.555,P=0.579)在良性肺部疾病患者组的表达量均基本一致,差异均无统计学意义;而在NSCLC组中LncRNA-ATB(Z=-5.391,P<0.001)和LncRNA-CCAT1(Z=-5.453,P<0.001)表达量均升高,差异均有统计学意义。LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT1在肿瘤组织与血浆中表达趋势相同,且高度相关,γ值分别为0.743和0.731。与手术前相比,NSCLC患者手术后血浆中LncRNA-ATB (1.226±0.724,Z=-5.768,P<0.001)和LncRNA-CCAT 1(1.027±0.535,Z=-6.086,P<0.001)表达水平均降低,差异均有统计学意义。ROC分析显示,LncRNA-ATB的AUCROC、灵敏度和特异度分别为0.836、82%和78%;LncRNA-CCAT1的AUCROC、灵敏度和特异度分别为0.816、78%和74%;CEA的为0.711、76%和58%。这2种LncRNA的各项诊断性能均高于CEA。当2种LncRNA联合检测时,AUCROC、灵敏度和特异度分别为0.858、84%和80%,综合诊断能力得到提高。而当3种指标联合检测时,AUCROC、灵敏度和特异度分别为0.914、90%和86%,与2种LncRNA联合检测相比,诊断性能差异无统计学意义。结论 LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT1可用作NSCLC诊断的候选标志物,这2种LncRNA联合检测对NSCLC诊断更有效。