男性低生育人群精浆锌、酸性磷酸酶及血清性激素水平及意义

目的评价低生育男性群体精浆锌、酸性磷酸酶(ACP)以及血清生殖激素水平及临床意义。方法选择68例低生育男性,其中弱精子症38例、少弱精子症30例。另择66例精液质量正常的已生育男性作为对照组。检测各组精浆锌、血清生殖激素水平,并对精浆锌水平低者进行补锌治疗,比较治疗前后的精子密度、精子活率和a级精子及畸形率。结果三组精浆锌和精浆ACP水平组间比较均有统计学意义(P<0.05);弱精子症组与对照组的血清睾酮(T)、促黄体生成素(LH)有统计学差异(P均<0.05),少弱精子症组与对照组的血清促卵泡刺激素(FSH)、T、LH有统计学差异(P<0.05或<0.01)。对精浆锌水平降低的低生育男性补锌治疗后,精子畸形率无明显变化(P>0.05),精子密度、精子活率和a级精子率有显著改善(P<0.05)。结论低生育男性精浆锌水平降低与精子密度、精子活率和活力相关,与精子畸形率无关;精子活力减弱与ACP水平下降有关;血清生殖激素测定对低生育男性病因的诊断和治疗具有一定的临床意义。

COH周期中卵泡径线大小与体外受精-胚胎移植妊娠率的相关性

目的探讨体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer，IVF—ET）的COH周期中HCG注射日卵泡径线与妊娠率的相关性。方法选取480个IVF／ICSI—ET周期并根据HCG日最大卵泡径线分为：A（15～16．5mm），B（17mm），C（17～18mm），D（18．5～19．5mm）和E（≥20mm）共5组来分析HCG日的卵泡径线、获卵数、子宫内膜厚度与妊娠结局的关系。结果5组妊娠率分别为61．0％，54．5％，48．3％，40．3％，35．5％，差异有显著性（P〈0．05）；获卵数的比较差异也有显著性（P〈0．05）；5组中在年龄和HCG日子宫内膜厚度上比较差异无显著性（P〉0．05）。结论体外受精-胚胎移植治疗COH周期中，有3个卵泡径线在15～18mm时决定HCG注射可以得到较高的临床妊娠率。

RNAi下调F10基因表达对KLE细胞凋亡的影响

目的探讨小分子双链RNA对KLE细胞中F10基因的沉默效应,并确定F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响。方法采用体外转录法制备针对F10基因的dsRNA;脂质体转染KLE细胞,荧光定量PCR检测dsRNA转染KLE细胞不同时间后细胞中F10基因的表达水平;流式细胞仪检测F10基因沉默后KLE细胞凋亡的改变。结果体外转录法能制备足够的dsRNA;F10基因表达水平的检测证实转染KLE细胞的dsRNA下调了F10基因表达,20nmol/LdsRNA转染48h的效应最为显著,基因下调达到83%;20nmol/LdsRNA转染48h,KLE细胞凋亡百分率从0.36%增加至8.91%。结论体外转录制备的针对F10基因的dsRNA能特异有效沉默KLE细胞中的F10基因;F10基因的表达下调可诱导KLE细胞的凋亡。

高龄不孕女性体外受精周期中GnRH拮抗剂与激动剂应用效果比较

目的探讨在高龄不孕女性的体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)治疗周期中GnRH拮抗剂和激动剂临床应用比较。方法对63例行体外受精治疗的患者,选取63个体外受精周期并根据启动方案,分为GnRHa和GnRHanta(思则凯)两组并进行对照比较;来分析在促性腺激素(Gn)的用量、HCG日激素水平、内膜厚度以及获卵数和妊娠结局的关系。结果两组在Gn使用的时间上、HCG日LH水平上差异存在显著性(P<0.05);但在Gn的用量、HCG日E2,P水平、HCG日内膜厚度以及获卵数和妊娠结局上差异无显著性(P>0.05)。结论在正常生理状态的高龄不孕女性中,GnRH拮抗剂和激动剂方案的组间对比中临床妊娠率并无明显差异。

F10下调通过细胞色素C促进KLE细胞凋亡

目的建立F10基因表达稳定下调的KLE细胞系,探讨F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机制。方法将两条合成的寡核苷酸退火后形成的双链DNA连接到逆转录病毒载体pRetroQ上构建表达质粒pRetroQ-iF10,脂质体转染KLE细胞,嘌呤霉素筛选,获得单细胞克隆;荧光定量RT-PCR鉴定阳性克隆。流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量RT-PCR和western blot检测细胞色素C和Bcl-2表达。结果两个抗性克隆呈现F10 mRNA表达显著下调。F10基因沉默的KLE细胞克隆凋亡率较对照组增加近9倍,细胞色素C mRNA表达上调、胞浆细胞色素C表达增加,Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调。结论成功构建F10基因表达稳定下调的KLE细胞系,F10基因表达下调导致细胞凋亡;细胞色素C的释放可能是F10沉默诱导KLE细胞凋亡的途径之一。

输卵管介入再通术后受孕时机的研究

目的探讨输卵管介入再通术后最佳受孕时机。方法选择山东淄博市妇婴保健院收治输卵管不通的不孕患者635例950条输卵管行介入再通,对术后不同受孕时机进行比较。结果成功介入再通后受孕率1～4个月组与5～8个月组、9～12个月组有明显差异(X^2=82.629,P<0.05、X^2=170.08,P<0.05),以后逐渐递减,5～8个月组与9～12个月组则无明显差异(X^2=24.297,P>0.05)。前6个月受孕率明显高于后6个月(X^2=154.51,P<0.05)。前4个月输卵管妊娠率较高,以后逐渐递减,半年后明显降低。结论成功介入再通后4个月内为最佳受孕时机,我们主张前半年积极采取受孕措施创造受孕机会。

某重机枪闭锁机构与常见故障间的关系分析

针对重机枪闭锁机构常见故障,借助试验测试资料对其受力计算,对复进不击发、断壳和不抽壳等常见故障间的矛盾关系及产生根源进行了分析。即先根据枪弹、弹膛、闭锁样柱的结构尺寸及枪弹的压缩量与压力测试资料,得到不同闭锁样柱时对应的最大压缩量及压力值,再对闭锁机构进行受力分析。

降调后Gn渐增法在卵巢高反应患者超促排卵周期中的应用

目的探讨对高反应病人降调后Gn渐增法超促排卵的临床效果。方法回顾分析并比较2005年6月～2006年4月应用渐增法超促排卵方案的患者与对照组(应用其他促排卵方案)患者的多种临床指标。结果渐增组与对照组相比,在取卵日≥14mm卵泡数、获取卵子数、平均使用Gn天数及大卵泡穿刺率上有显著性差异,两组患者的妊娠率、使用Gn总量、取消周期率、卵巢过度刺激综合征发生率等方面均无显著性差异。结论Gn渐增法用于卵巢高反应病人的超促排卵治疗可在临床上试用。

自制金属冷冻板法冷冻人附睾精子的实验研究

目的:研究一种新型人精子冷冻方法对精子复苏率的影响,以探索人附睾精子、睾丸穿刺精子的最佳冷冻方法。方法:选取76例梗阻性无精子症患者的附睾穿刺(PESA)标本,按照自制金属冷冻板法和传统冷冻法分两组冷冻。采用计算机辅助精液分析系统检测冷冻前、后前向运动精子百分率,并对比两种方法对精子膜功能、DNA碎片指数(DFI)、顶体酶活性和精子畸形百分率的影响。结果:复苏后自制金属冷冻板法和传统冷冻法前向运动精子百分率[(12.0±7.5)%vs(8.0±5.1)%,P<0.05]和低渗肿胀精子百分率[(22.0±17.5)%vs(18.0±20.5)%]比较有显著性差异(P<0.05),均较冷冻前[(20.7±8.8)%和(30.0±13.5)%]显著下降(P<0.05)。自制金属冷冻板法复苏后精子顶体酶活性显著高于传统冷冻法[(75.2±9.5)μIU/10^6精子vs(55.7±8.3)μIU/10^6精子,P<0.05],均较冷冻前(120.0±10.5)μIU/10^6精子显著下降(P<0.05)。两种方法复苏后畸形精子百分率和DFI无显著差异[(98.7±8.8)%vs(98.5±9.2)%,P>0.05]和[(38.2±8.5)%vs(39.5±10.2)%,P>0.05],并均较冷冻前[(97.2±9.5)%和(30.8±9.7)%]显著升高(P<0.05)。自制金属冷冻板法和传统冷冻法冷冻复苏率[(65.2±12.0)%vs(52.3±18.0)%]有显著性差异(P<0.05)。结论:自制金属冷冻板法是一种经济高效、操作简单的精子冷冻方法且能最大限度的节约精子;复苏后可以保证较好的精子复苏率、活动力和顶体酶活性。

IVF-ET中两种不同胚胎移植装管方法的临床应用

随着现代医学技术的快速发展,体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)技术已经为大量患者解决了不孕难题,胚胎移植是该技术的重要组成部分,对IVF-ET的治疗结局有重大的影响[1-3]。胚胎移植时采用适合的胚胎移植管,由胚胎师将胚胎装入管中后,插入预先置入患者宫腔的外套管内,调整位置后将胚胎推入宫腔[4-6]。胚胎装管操作是移植的重要环节,目前国内外胚胎师存在两种不同的将胚胎装入移植管内的方法,液体充管法需用液体预先充管,移植效果稳定,是很多胚胎师一直使用的装管方法。

山东省淄博市241297名新生儿中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛查及随访结果分析

目的:分析山东省淄博市中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCADD)的发病率、表型、基因型及临床预后。方法:选择山东省淄博市2013年11月至2022年1月出生的241297名新生儿作为研究对象。采用非衍生化串联质谱法检测血游离肉碱及酰基肉碱谱进行新生儿筛查,召回初筛及复筛辛酰基肉碱(C8)不低于0.25μmol/L或合并C8/癸酰基肉碱(C10)不低于1.5的患儿,采用高通量测序进行基因检测并诊断。结果:241297名新生儿中,检出MCADD患儿6例,男性2例,女性4例,发病率约为1/40216。患儿均检测到ACADM基因2个突变位点,共检出12个突变8种突变类型,热点突变为c.449_452del(p.T150Rfs*4)和c.387+1delG,检出1个新发突变为11号外显子c.1076C>T(p.A359V),未发现表型与基因型的相关性。6例MCADD患儿中,1例出生后第4天死亡;5例随访2~60个月,均未特殊饮食治疗,生长发育、智力发育正常,常规生化指标未见异常。结论:淄博市MCADD发病率较国内其他地区高,ACADM基因热点突变为c.449_452del(p.T150Rfs*4)和c.387+1delG,发现1个新发突变c.1076C>T(p.A359V),未发现表型与基因型的相关性。早期诊断、正确治疗是减少不良预后的有效措施。

CD4^+T细胞在甲状腺自身抗体阳性患者中的比例及其对IVF-ET治疗结局的影响

目的:探究甲状腺功能正常甲状腺自身抗体阳性(ATA+)患者外周血中CD4^+T细胞的比例及其对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:选择在青岛大学附属烟台毓璜顶医院生殖医学科就诊接受IVF治疗甲状腺功能正常的患者,其中行新鲜周期胚胎移植的ATA+患者28例(ATA+组),甲状腺自身抗体阴性(ATA-)患者32例(ATA-组)。取卵日、移植第5天、移植第14天抽取两组患者的外周血采用流式细胞学的方法检测CD4^+T细胞。结果:①ATA+组的生化妊娠流产率明显高于ATA-组(P<0.05)。ATA+组的着床率、囊胚率、临床妊娠率和活产率与ATA-组比较有降低趋势,早期流产率与ATA-组比较有升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。②取卵日外周血中Th1细胞的比例在ATA+组明显高于ATA-组;移植第14天外周血中Th2细胞的比例在ATA+组显著低于ATA-组;ATA+组中Th17细胞的比例在取卵日、移植第5天、移植第14天的外周血中均显著高于ATA-组;而ATA+组中Treg细胞的比例在不同时间点外周血中均显著低于ATA-组(P<0.05)。③ATA+组中Th1/Th2比值在取卵日、移植第14天外周血中明显高于ATA-组;ATA+组中Th17/Treg比值在取卵日、移植第5天、移植第14天外周血中均明显高于ATA-组(P<0.05)。结论:ATA+患者不同时间点外周血中Th1细胞与Th2细胞、Th17细胞与Treg细胞之间的平衡被打破,使免疫反应倾向于细胞免疫应答,向加剧炎性反应方向发展,可能是导致ATA+患者IVF-ET治疗不良妊娠结局的免疫学机制之一。

甲状腺自身抗体阳性患者外周血中CD4^+T细胞特异性转录因子的表达及其对IVF-ET治疗结局的影响

目的:探究甲状腺功能正常甲状腺自身抗体阳性患者外周血中CD4^+T细胞特异性转录因子(T-bet mRNA、GATA-3 mRNA、RORγt mRNA和FoxP3 mRNA)表达量及其对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:选取在青岛大学附属烟台毓璜顶医院生殖医学科接受IVF治疗的甲状腺功能正常的患者,其中行新鲜周期胚胎移植且甲状腺自身抗体阳性(ATA^+)患者28例,甲状腺自身抗体阴性(ATA^-)患者32例。取卵日、移植第5天、移植第14天抽取患者外周血,逆转录多聚酶链反应(RT-qPCR)检测4种转录因子。结果:ATA^+组的生化妊娠流产率明显高于ATA^-组(P<0.05)。ATA^+组的着床率、囊胚率、临床妊娠率和活产率与ATA^-组比较有降低趋势,早期流产率与ATA^-组比较有升高趋势(P>0.05)。ATA^+组取卵日外周血T-bet mRNA表达量明显高于ATA^-组,移植第14天外周血中GATA-3 mRNA表达量明显低于ATA^-组,取卵日、移植第5天、移植第14天外周血中RORγt mRNA表达量显著高于ATA^-组;而FoxP3 mRNA表达量显著低于ATA^-组(P<0.05)。取卵日、移植第5天、移植第14天ATA^+组外周血中T-bet mRNA/GATA-3 mRNA和RORγt mRNA/FoxP3 mRNA比值均显著高于ATA^-组(P<0.05)。结论:ATA^+患者外周血中T-bet mRNA/GATA-3 mRNA和RORγt mRNA/FoxP3 mRNA比值在取卵日、移植第5天、移植第14天外周血中均明显增高,导致外周血中CD4^+T细胞之间的平衡被打破,可能是ATA^+患者导致IVF-ET治疗不良妊娠结局的免疫学机制之一。

经腹超声引导下夫精宫腔内人工授精35例

目的探讨经腹部超声引导下夫精人工授精的临床效果。方法收集2011年6月至2012年10月,既往有IUI周期插管困难史,再次行IUI时采用经腹部超声引导下手术35例。结果 35例患者,35个IUI周期,插管成功率100%,83%患者认为疼痛不适缓解,术后无感染发生。结论经腹部超声引导下人工授精,能确定手术插管是否成功,并能减少插管过程中发生的不良反应。

国内外铸钢件超声波探伤标准的对比分析

针对中国一重近年来合作项目大幅增加,产品在无损检测方面执行的标准复杂多样,着重介绍了我厂经常使用的国内外铸钢件无损检测标准的相同与不同点,通过对比分析研究我国铸钢件无损检测与国外同行业的差距,供无损检测人员参考。

有关加工部件残缺及硬度超声波检测的研究

超声波检测技术一般包括超声波厚度测量、超声波应力检测技术、超声波探伤技术以及超声波晶粒度检测技术等,属于一种无损检测技术。超声波探伤技术普遍采用的方法为:超声波探伤中有穿透探伤法、共振探伤发以及脉冲反射法。其中脉冲反射法的工作原理是通过检测工件硬度和缺陷部分反射的回波判断工件是否存在残缺,穿透法的工作原理是通过判断工件缺陷部分的阴影检测工件是否存在残缺,共振法的工作原理是通过判断工件产生的驻波情况检测工件是否存在残缺,同时还可以检测工件的厚度。

子宫内膜不同刺激方式对冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响

目的探究冻融胚胎移植(FET)前患者行子宫内膜机械刺激、宫腔灌注人绒毛膜促性腺激素(hCG)、宫腔灌注重组人生长激素(GH)治疗对妊娠结局的影响。方法对2018年1月—2019年8月在淄博市妇幼保健院生殖医学中心着床失败再次行FET治疗的患者共376个周期进行回顾性研究,分为A组(子宫内膜机械刺激36个周期)、B组(宫腔灌注hCG 158个周期)、C组(宫腔灌注GH 90个周期)、D组(未进行宫腔灌注治疗92个周期),比较各组患者黄体酮转化日子宫内膜厚度、着床率、临床妊娠率、早期流产率、活产率。结果A组、B组、C组、D组黄体酮转化日子宫内膜厚度分别为(9.77±1.20)mm、(10.08±1.51)mm、(9.35±1.54)mm、(9.30±1.25)mm,临床妊娠率分别为52.78%、55.70%、52.22%、36.96%,4组黄体酮转化日子宫内膜厚度、临床妊娠率比较差异均有统计学意义(F=19.012,P<0.05;χ^(2)=8.614,P<0.05)。结论着床失败的患者在FET前行子宫内膜机械刺激、宫腔灌注hCG、宫腔灌注GH可以改善子宫内膜厚度,有助于提高临床妊娠率。

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)对人类精子活力、DNA和顶体酶的保护作用

目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)及其前体物质烟酰胺腺嘌呤单核苷酸(NAM)对人类精子活力、DNA和顶体酶活性的保护作用。方法选取在我院生殖医学中心就诊的男性精液标本50例,检测其活力(PR级)、DNA碎片指数(DFI)和顶体酶活性。按照NAD/NAM的添加时机不同将每份精液均分为冻前干预组和复苏后干预组。将冻前干预组的标本均分为三份:分别加入PBS、NAD和NAM后37℃孵育30 min,检测其精子活力、DFI和顶体酶活性三项指标后加入精子冷冻保护剂冷冻大于24 h后复苏,再次检测该三项指标。复苏后干预组的标本直接加入精子冷冻保护剂冷冻大于24 h后复苏,复苏后的标本均分为三份:分别加入PBS、NAD和NAM后37℃孵育30 min,检测其精子活力、DFI和顶体酶活性三项指标。另选取男性精液标本38例,每例均分为两份,一份冷冻24 h后复苏、另一份冷冻大于两年后复苏;复苏后的标本均分为三份:分别加入PBS、NAD和NAM后37℃孵育30 min,检测其三项指标。结果精液在冷冻前加入NAD/NAM孵育后精子活力增强、顶体酶活性升高(P<0.05),DFI无明显变化(P>0.05);复苏后活力(前向运动精子百分率)明显降低(30.5%±4.5%)vs(63.3%±6.8%),精子顶体酶活性显著降低(78.2±8.5μIU)vs(135.0±8.2μIU)(P<0.05),DFI显著升高(25.5%±7.5%)vs(10.2%±8.3%)(P<0.05),但冻前NAD/NAM孵育组的精子活力显著高于对照组(38.4%±8.4%)/(36.5%±7.4%)vs(30.5%±4.5%)(P<0.05),顶体酶活性显著高于对照组(90.4±6.5μIU)/(92.5±5.8μIU)vs(78.2±8.5μIU)(P<0.05),DFI显著低于对照组(16.5%±6.8%)/(18.8%±8.7%)vs(25.5%±7.5%)(P<0.05)。复苏后干预组的精液经NAD/NAM孵育后精子活力升高(40.2%±6.3%)/(42.2%±8.8%)vs(31.2%±7.5%);顶体酶活性升高(98.5±7.6μIU)/(93.8±8.2μIU)VS(80.3±5.8μIU)(P<0.05),DFI未见明显变化(P>0.05)。冷冻大于两年后复苏组的精子活力低于冷冻24 h复苏组(24.5%±4.7%)vs(33.5%±7.4%);顶体酶活性也出现类似的变化(62.4±8.3μIU)vs(83.5±8.3μIU)(P<0.05),经NAD/NAM孵育后的精子活力和顶体酶活性提高(P<0.05),这一作用在冷冻大于两年组更加明显。结论在精液冷冻前加入NAD可对精子的活力、DNA和顶体酶活性起到很好的保护作用,且这一作用可以延续至精子复苏后,对于长时间冷冻保存的精子,NAD的保护作用更加显著。

卵巢储备功能减退和卵巢低反应患者应用重组人生长激素预处理对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

目的 探讨重组人生长激素(GH)对卵巢储备功能减退(DOR)和卵巢低反应(POR)患者在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中治疗结局的影响。方法 回顾性分析2020年1月—2021年6月在淄博市妇幼保健院生殖医学中心行IVF-ET治疗的DOR、POR不孕症患者。DOR患者分为应用GH治疗组(40个周期)和未应用GH治疗的对照组(42个周期);POR患者应用GH治疗前后进行自身对照研究(31个周期)。比较每组患者应用GH治疗后超促排卵相关参数、获卵数、受精率、优质胚胎数、优胚率、着床率及妊娠结局。结果 DOR患者GH治疗组Gn启动剂量[(270.94±54.03)U]、Gn总天数[(10.20±1.88)d]及Gn总量[(3 102.19±866.86)U]均明显少于对照组[(360.71±104.09)U、(11.02±1.85)d及(4 148.21±1 452.18)U],人绒毛膜促性腺激素(HCG)日子宫内膜厚度[(10.85±1.98)mm]显著厚于对照组[(8.60±3.76)mm],差异均有统计学意义(χ^(2)=4.87、2.00、3.98及3.42,均P<0.05)。DOR患者GH治疗组受精率(84.93%)显著高于对照组(70.14%),无可利用胚胎率(0.00%)显著低于对照组(23.81%),差异均有统计学意义(χ^(2)=13.81、8.74,均P<0.05)。POR患者GH治疗后可利用胚胎数[(2.19±1.62)个]、优质胚胎数[(1.45±1.39)个]及优质胚胎率(36.89%)均显著高于GH治疗前[(1.00±1.05)个、(0.29±0.59)个及10.47%],无可利用胚胎率(3.23%)显著低于GH治疗前(38.71%),差异均有统计学意义(χ^(2)=3.40、4.29、18.32及11.78,均P<0.05)。结论 DOR和POR患者应用GH预处理可以改善IVF-ET的治疗结局,减少周期取消率。