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结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性
1
作者
李雪
宁唤唤
+6 位作者
康健
徐铭泽
崔若囡
代婷
路延之
薛飒
柏银兰
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期352-358,共7页
目的探究结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性。方法采用生物信息学方法预测PhoP蛋白的B细胞和T细胞表位。将Mtb H37Rv phoP基因克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,并将重组质粒转化到E.coli BL21菌株中,经IPTG诱导表达及亲和层...
目的探究结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性。方法采用生物信息学方法预测PhoP蛋白的B细胞和T细胞表位。将Mtb H37Rv phoP基因克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,并将重组质粒转化到E.coli BL21菌株中,经IPTG诱导表达及亲和层析法纯化获得PhoP重组蛋白。用ELISA分析Mtb感染小鼠和TB患者血清中PhoP特异性抗体水平。PhoP重组蛋白经肌肉注射途径免疫小鼠,分离小鼠多抗血清,用ELISA和Western blot分别检测抗体效价和抗体特异性。分离小鼠脾细胞,用ELISpot和ELISA法分别检测分泌IFN-γ细胞频数及其分泌水平。结果经生物信息学预测发现PhoP含有24个B细胞抗原表位和11个优势T细胞表位。成功构建PhoP原核表达载体并获得纯化的PhoP蛋白。Mtb感染小鼠和TB患者血清中的PhoP特异性抗体显著升高,查准率分别为99.9%和82.5%,特异度均为100%。PhoP免疫小鼠诱导产生高水平特异性抗体,免疫小鼠脾细胞经抗原体外刺激后,IFN-γ的分泌水平和细胞频数均显著增加,IL-2和IL-10分泌水平上调。结论PhoP蛋白可诱导体液免疫应答和Th1型为主的细胞免疫。PhoP蛋白有良好的免疫原性,且具有一定的TB诊断效能。本研究为阐明PhoP在Mtb感染中的作用及其用于TB诊断奠定了一定的基础。
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关键词
结核分枝杆菌
双组分系统
PHOP
体液免疫应答
细胞免疫应答
下载PDF
职称材料
结核分枝杆菌EsxV脂质体纳米颗粒亚单位疫苗的制备及免疫学特性
被引量:
1
2
作者
白鹭
路延之
+8 位作者
宁唤唤
康亚莉
谢燕玲
康健
李雪
崔若囡
韦垠
刘月芹
柏银兰
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期4085-4097,共13页
本研究旨在制备脂质体纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)为载体的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原EsxV亚单位疫苗,明确该疫苗经黏膜免疫诱导的免疫应答水平。采用薄膜分散法制备包裹蛋白EsxV和c-di-AMP的LNP(EsxV:C:...
本研究旨在制备脂质体纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)为载体的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原EsxV亚单位疫苗,明确该疫苗经黏膜免疫诱导的免疫应答水平。采用薄膜分散法制备包裹蛋白EsxV和c-di-AMP的LNP(EsxV:C:L),并对其包封率、LNP形态、粒径、表位电荷及多相分散指数进行了检测。EsxV:C:L滴鼻免疫BALB/c小鼠,检测免疫后血清和黏膜抗体、肺或脾细胞因子转录及分泌水平、肺T细胞亚群细胞比例。结果成功获得大小均一、呈球状、带负电的EsxV:C:L LNP亚单位疫苗。与EsxV:C相比,EsxV:C:L鼻黏膜接种可诱导小鼠呼吸道黏膜sIgA水平增加,脾细胞因子IL-2分泌水平升高,提高中央记忆T细和组织驻留T细胞的比例。综上,EsxV:C:L经黏膜免疫,可诱导更强的黏膜免疫和记忆性T细胞免疫应答,可能提供更好的抗Mtb感染的保护作用。
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关键词
结核分枝杆菌
EsxV
环二腺苷酸
脂质体纳米颗粒
亚单位疫苗
原文传递
题名
结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性
1
作者
李雪
宁唤唤
康健
徐铭泽
崔若囡
代婷
路延之
薛飒
柏银兰
机构
西北大学生命科学学院
空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室
空军军医大学军事医学创新中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期352-358,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(No.82272343,No.81971560)
陕西省重点研发项目(No.2022ZDLSF01-07)联合资助。
文摘
目的探究结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性。方法采用生物信息学方法预测PhoP蛋白的B细胞和T细胞表位。将Mtb H37Rv phoP基因克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,并将重组质粒转化到E.coli BL21菌株中,经IPTG诱导表达及亲和层析法纯化获得PhoP重组蛋白。用ELISA分析Mtb感染小鼠和TB患者血清中PhoP特异性抗体水平。PhoP重组蛋白经肌肉注射途径免疫小鼠,分离小鼠多抗血清,用ELISA和Western blot分别检测抗体效价和抗体特异性。分离小鼠脾细胞,用ELISpot和ELISA法分别检测分泌IFN-γ细胞频数及其分泌水平。结果经生物信息学预测发现PhoP含有24个B细胞抗原表位和11个优势T细胞表位。成功构建PhoP原核表达载体并获得纯化的PhoP蛋白。Mtb感染小鼠和TB患者血清中的PhoP特异性抗体显著升高,查准率分别为99.9%和82.5%,特异度均为100%。PhoP免疫小鼠诱导产生高水平特异性抗体,免疫小鼠脾细胞经抗原体外刺激后,IFN-γ的分泌水平和细胞频数均显著增加,IL-2和IL-10分泌水平上调。结论PhoP蛋白可诱导体液免疫应答和Th1型为主的细胞免疫。PhoP蛋白有良好的免疫原性,且具有一定的TB诊断效能。本研究为阐明PhoP在Mtb感染中的作用及其用于TB诊断奠定了一定的基础。
关键词
结核分枝杆菌
双组分系统
PHOP
体液免疫应答
细胞免疫应答
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
two-component system
PhoP protein
humoral immune response
cellular immune response
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
结核分枝杆菌EsxV脂质体纳米颗粒亚单位疫苗的制备及免疫学特性
被引量:
1
2
作者
白鹭
路延之
宁唤唤
康亚莉
谢燕玲
康健
李雪
崔若囡
韦垠
刘月芹
柏银兰
机构
空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室
延安大学生命科学学院
西北大学生命科学学院
宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期4085-4097,共13页
基金
陕西省重点研发计划(2022ZDLSF01-07)
国家自然科学基金(81971560,82272343)
国家“十三五”重大专项(2018ZX10302302002004)。
文摘
本研究旨在制备脂质体纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)为载体的结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原EsxV亚单位疫苗,明确该疫苗经黏膜免疫诱导的免疫应答水平。采用薄膜分散法制备包裹蛋白EsxV和c-di-AMP的LNP(EsxV:C:L),并对其包封率、LNP形态、粒径、表位电荷及多相分散指数进行了检测。EsxV:C:L滴鼻免疫BALB/c小鼠,检测免疫后血清和黏膜抗体、肺或脾细胞因子转录及分泌水平、肺T细胞亚群细胞比例。结果成功获得大小均一、呈球状、带负电的EsxV:C:L LNP亚单位疫苗。与EsxV:C相比,EsxV:C:L鼻黏膜接种可诱导小鼠呼吸道黏膜sIgA水平增加,脾细胞因子IL-2分泌水平升高,提高中央记忆T细和组织驻留T细胞的比例。综上,EsxV:C:L经黏膜免疫,可诱导更强的黏膜免疫和记忆性T细胞免疫应答,可能提供更好的抗Mtb感染的保护作用。
关键词
结核分枝杆菌
EsxV
环二腺苷酸
脂质体纳米颗粒
亚单位疫苗
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
EsxV
cyclic dimeric adenosine monophosphate
liposome nanoparticles
subunit vaccine
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌双组分系统PhoP蛋白的免疫学特性
李雪
宁唤唤
康健
徐铭泽
崔若囡
代婷
路延之
薛飒
柏银兰
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌EsxV脂质体纳米颗粒亚单位疫苗的制备及免疫学特性
白鹭
路延之
宁唤唤
康亚莉
谢燕玲
康健
李雪
崔若囡
韦垠
刘月芹
柏银兰
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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