迷迭香精油纳米乳的制备研究

目的:制备迷迭香精油(Rosemary essential oil,REO)纳米乳,增强其稳定性并增加其抑菌活性。方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析REO成分,通过拟三元相图确定REO纳米乳的最佳制备工艺,以粒径和PDI为指标对其表征,采用琼脂扩散法测定其抑菌活性。结果:GC-MS分析共鉴定出45种成分,主要为烯醇类化合物;经筛选得出REO纳米乳的最佳制备工艺为:15.50%的聚氧乙烯蓖麻油,15.50%的无水乙醇,6.90%的REO以及62.10%的蒸馏水;REO纳米乳平均粒径为18.43±0.50nm,PDI为0.09±0.03;抑菌实验表明REO及REO纳米乳对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌有显著抑制作用(p<0.05)。结论:本研究成功制备REO纳米乳,稳定性好,有较好的推广前景,为REO的推广和应用提供依据。

庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱建立及7种成分含量测定

目的:建立庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱,并对7种成分进行含量测定,为庞氏安胎止血标准汤剂的质量控制和后续研究提供依据。方法:采用YMC-Triart C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,检测波长为230 nm,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》(2012年版)对10批标准汤剂进行相似度评价,并对其进行含量测定。结果:建立了庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱,相似度均大于0.97,共标定23个共有峰,指认13个共有峰,10批样品中绿原酸、异阿魏酸、甘草苷、菊苣酸、迷迭香酸、黄芩苷、木犀草素的质量分数分别为1.56~3.51 mg·g^(-1),3.43~5.28 mg·g^(-1),3.42~5.08 mg·g^(-1),0.53~0.62 mg·g^(-1),0.80~1.34 mg·g^(-1),3.51~6.24 mg·g^(-1),0.09~0.14 mg·g^(-1),方法学考察结果良好。结论:建立的庞氏安胎止血标准汤剂HPLC指纹图谱结合多成分含量测定分析方法简便易行、稳定可靠、重现性良好,可用于庞氏安胎止血汤的质量评价。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学研究连翘治疗急性肺损伤的作用机制

目的:基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析连翘的入血成分,并结合网络药理学研究连翘治疗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用机制。方法:使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立ALI大鼠模型,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定连翘的入血成分,结合PharmMapper、GeneCards和Disgenet数据库筛选连翘入血成分治疗ALI的潜在作用靶点,String平台绘制蛋白互作(PPI)网络图,Cytoscape软件做网络拓扑分析并筛选核心靶点,通过David数据库对核心靶点富集分析,使用Autodock Vina和PyMol软件对相关入血成分与核心靶点进行分子对接。结果:肺组织切片结果显示ALI大鼠模型制备成功;得到37个连翘入血成分;连翘治疗ALI核心靶点70个,涉及PI3K/Akt、MAPK和Ras等152个相关通路;agatholic acid、无梗五加苷B、连翘苷、连翘酯苷A和芦丁5个入血成分与核心靶点JAK2和JAK3分子对接的结合能均小于-4.25 kJ·mol-1,对接结果良好。结论:该研究明确了连翘的入血成分,网络药理学预测agatholic acid、无梗五加苷B、连翘苷、连翘酯苷A和芦丁可能为连翘防治ALI的主要成分,其作用机制可能与靶向JAK2和JAK3调控PI3K/Akt信号通路有关。

基于血清代谢组学探讨青翘、老翘对急性肺损伤大鼠的作用机制

目的:通过研究青翘和老翘的化学成分差异,以及二者对急性肺损伤(ALI)大鼠血清代谢组学的影响,探讨青翘、老翘治疗ALI作用机制的异同。方法:24只SD雄性大鼠适应性喂养1周后,随机取6只大鼠作为空白组,其余18只大鼠采用气管滴注脂多糖(LPS)诱导ALI模型,造模成功后,随机分为模型组、青翘组(1.5 g·kg^(-1))与老翘组(1.5 g·kg^(-1)),每组6只。青翘组和老翘组每日灌胃相应剂量药液1次,空白组、模型组灌胃等体积生理盐水,连续给药3 d。通过苏木素-伊红(HE)染色、肺组织干湿质量比(W/D)值及大鼠肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度综合评估大鼠肺组织的病理状况。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测BALF中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)鉴定并分析青翘、老翘的化学成分,并对各组大鼠血清进行代谢组学分析,结合多元统计分析,以变量重要性投影(VIP)值>1、t检验P<0.05及差异倍数(FC)≥1.5或FC≤0.5筛选青翘、老翘治疗ALI的差异代谢物。采用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库结合MetaboAnalyst对筛选出的差异代谢物进行通路分析。结果:与空白组比较,模型组大鼠肺泡腔变大,肺泡破裂,肺间质出血,支气管渗出大量中性粒细胞及红细胞,BALF中蛋白浓度和肺组织W/D值显著升高(P<0.01);与模型组比较,青翘组、老翘组的大鼠肺支气管出血减轻,BALF中蛋白浓度和肺组织W/D值显著降低(P<0.01),肺部损伤明显缓解,以青翘组效果更为明显。与空白组比较,模型组BALF中炎症因子表达水平均显著升高(P<0.01),与模型组比较,青翘组、老翘组炎症因子表达水平均显著降低(P<0.01)。成分分析结果显示,青翘中共检测出63个化学成分,老翘中共检测出55个化学成分,其中二者共有成分47个,青翘独有成分16个,老翘独有成分8个。对大鼠血清代谢组学差异进行表征,青翘和老翘分别回调了19个和12个代谢产物。代谢通路富集分析显示,青翘通过影响亚油酸代谢、苯丙氨酸代谢、甘油磷脂代谢等6条关键代谢通路发挥治疗作用,老翘通过影响亚油酸代谢、花生四烯酸代谢、鞘磷脂代谢等6条关键代谢通路发挥治疗作用。结论:青翘、老翘对ALI均具有治疗作用,以青翘效果更优,二者均可通过调控氨基酸代谢与脂质代谢对ALI起到治疗作用,但二者影响的代谢通路有所差异。