CatSper1在精索静脉曲张模型大鼠精子中的差异表达及左卡尼汀对其的保护作用

目的:通过制备精索静脉曲张大鼠模型,检测其附睾精子中精子特异性钙通道(CatSper1)的表达,观察左卡尼汀对大鼠精子CatSper1的影响。方法:70只雄性大鼠随机分为7组,每组10只。分别为对照组(A组),精索静脉曲张组(B组),精索静脉曲张+生理盐水组(C组),精索静脉曲张+小、中、大剂量左卡尼汀组(D、E、F组)和F+延长喂养14 d组(G组)。手术结扎部分左肾静脉制备精索静脉曲张大鼠模型,12周后,C组给予生理盐水1 ml/d,D、E、F组分别用左卡尼汀小[0.05 g/(kg·d)]、中[0.1 g/(kg·d)]、大[0.2 g/(kg·d)]剂量灌胃35 d,G组在F组基础上延长灌胃14 d;实验结束后处死大鼠,进行精子参数分析,应用RT-PCR以及Western印迹分别检测精子中CatSper1 mRNA及蛋白表达情况。结果:与A组比较,B组a+b级精子百分率、精子活率及浓度均不同程度下降(P<0.01),B组精子CatSper1 mRNA及蛋白相对表达量均明显下降(1.44±0.67 vs 0.71±0.38;1.87±0.67 vs 0.84±0.42,P<0.01)。与C组比较,应用左卡尼汀后,各组精子浓度无明显增加,a+b级精子百分率、精子活率以及精子CatSper1 mRNA及蛋白表达含量明显增高,尤其大剂量组F、G组增高更加明显(P<0.01)。与F组比较,G组延长应用2周左卡尼汀,精子CatSper1 mRNA及蛋白表达量无明显增加(P>0.05)。结论:精索静脉曲张模型大鼠精子中CatSper1表达下降,应用左卡尼汀后,CatSper1的表达量及a+b级精子百分率、精子活率明显增加。

B7-H1与B7-H4在膀胱癌大鼠及其癌旁组织中的差异表达

目的:研究膀胱原位癌组织及癌旁组织中共刺激分子B7-H1与B7-H4的表达情况,并分析二者的相关性。方法:采用N-亚硝基-N-甲基脲(MNU)溶液膀胱灌注法制备膀胱癌大鼠模型(30只),处死大鼠,获取癌组织及癌旁组织,进行病理检查;采用生理盐水溶液膀胱灌注法作为对照组(12只),处死大鼠,获取膀胱组织,进行病理学检查;采用RTPCR技术分别检测对照组大鼠膀胱组织(A组)、膀胱癌模型组癌组织(B组)及模型组癌旁组织(C组)中B7-H1与B7-H4的m RNA的表达水平,并分析二者之间的相关性。结果:30只膀胱癌模型组大鼠,28只模型制备成功,造模成功率93.3%。A组、C组B7-H1、B7-H4 mRNA表达量均明显低于B组(0.71±0.38、0.79±0.21 vs 1.44±0.67;0.84±0.22、0.92±0.31 vs 1.87±0.37),差异有统计学意义(P<0.05);C组的B7-H1、B7-H4 mRNA表达量与A组差异无统计学意义(P>0.05)。B7-H1与B7-H4 mRNA表达量呈正相关(r=0.908,P<0.05)。结论:MNU溶液膀胱灌注法可以成功制备膀胱原位癌大鼠模型;膀胱癌组织中共刺激因子B7-H1与B7-H4呈高表达;B7-H1与B7-H4在膀胱癌中的表达量呈正相关;B7-H1与B7-H4可能为膀胱癌新的肿瘤标志物和潜在治疗靶点,为临床诊治提供新的思路。

补肾益精汤对弱精症大鼠精子线粒体功能的影响及其相关机制研究

目的:研究补肾益精汤对大鼠精子线粒体呼吸功能及能量代谢的影响,并从基因水平分析其可能的相关机制。方法:随机数字表法将100只SD雄性大鼠分为正常对照组(A组)、雷公藤多苷组(B组)、生理盐水组(C组)、左卡尼汀组(D组)及补肾益精汤组(E组),每组20只。A组大鼠每日灌胃生理盐水[1 mL/(kg·d)],B、C、D、E组每日灌胃雷公藤多苷[20 mg/(kg·d)],共21 d,处死A、B两组大鼠,然后C组每日灌胃生理盐水[1 mL/(kg·d)],D组每日灌胃左卡尼汀[50 mg/(kg·d)],E组每日灌胃补肾益精汤[3 g/(kg·d)],共35 d,处死C、D、E三组大鼠。获取各组大鼠精液标本,检测精液精子运动参数、细胞线粒体呼吸控制率(RCR)及精子细胞ATP含量,同时检测各组精子细胞特异性钙通道CatSper1基因含量,分析E组RCR、ATP分别与CatSper1 RNA含量的相关性。结果:与A组比较,B组的精子密度、a+b级百分率及存活率均明显下降(P<0.01)。与C组比较,D组、E组a+b级精子百分率明显提高(P<0.01)。RCR、ATP含量及CatSper1 RNA均提高。D、E组的精子RCR分别为(4.39±0.42 vs 5.15±0.39)μmol·min^-1·g^-1,ATP含量分别为(4.02±0.50 vs 5.82±0.40)μg/g,CatSper1 RNA分别为(2.18±0.28 vs 2.64±0.28)ng/μL,差异均具有统计学意义(P<0.01)。E组大鼠的RCR、ATP含量与CatSper1 RNA均呈正相关(r=0.912、0.893,P<0.05)。结论:雷公藤多苷可成功制备弱精子症大鼠模型;补肾益精汤可明显提高弱精症大鼠的精子活动力,增加其精子呼吸功能及能量代谢,其机制可能与增加特异性钙通道CatSper1 RNA基因的表达有关。

经皮肾镜碎石术后继发肾被膜下积液的影像学表现及诊治分析

目的:探讨经皮肾镜碎石术后继发肾被膜下积液的影像学表现及诊治方法。方法:回顾分析2014年9月至2018年4月14例在本院行经皮肾镜碎石术后继发肾被膜下积液患者的影像学资料以及临床治疗方法。结果:所有患者均行一期超声引导肾被膜下穿刺引流,4例单纯引流后即治愈,2例行肾被膜下无水酒精硬化剂灌注后治愈,其余8例均行二期经皮肾镜手术,肾被膜与肾盂肾盏打通,留置肾盂造瘘管及肾被膜下引流管,先后拔除肾被膜下引流管及造瘘管后治愈。肾被膜下积液患者的影像学表现为肾脏外形增大,呈梭形、三角形或者月牙形的无回声区。顺、逆行造影均不能发现肾被膜下囊腔与肾盂肾盏相通。对14例患者分别给予穿刺引流、无水酒精等硬化剂灌注以及二期经皮肾镜手术后治愈。随访半年未见复发。结论:对经皮肾镜碎石术后继发肾被膜下积液患者可根据具体病情发展,采用单纯引流、无水酒精等硬化剂注射以及二期经皮肾镜手术治疗。