黄连素的生物学功能及治疗口腔疾病研究的进展

黄连素(小檗碱)是从黄连、三颗针、黄柏等天然药物中提取的异喹啉类生物碱,具有广泛的药理作用,能够有效地抗惊厥、抗高血压、抗肿瘤、抗抑郁、抗炎、降血脂、降血糖等。近年来,由于其丰富的生物学功能,人们逐渐发掘出黄连素用于治疗口腔疾病的潜力,研究其与龋病、根尖周炎、牙周病、口腔黏膜病、颌面部肿瘤的关系。本文就黄连素的生物学功能和其在口腔领域中的研究进展作一综述,为进一步研究黄连素在治疗口腔疾病的应用提供参考。

黄连素与戊间甲酚对粪肠球菌的体外协同抗菌效果研究

目的 研究黄连素与戊间甲酚联合使用对粪肠球菌的抗菌作用.方法 采用微量肉汤稀释法和活菌菌落形成单位(CFU)分别测定黄连素和戊间甲酚对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC);悬液定量杀菌试验和死活菌染色检测黄连素和戊间甲酚对浮游和生物膜状态粪肠球菌的杀灭效果;扫描电子显微镜观察黄连素和戊间甲酚对粪肠球菌成熟生物膜结构的影响;CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒和乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒测定黄连素和戊间甲酚对人口腔黏膜上皮角质细胞(HOK)的毒性.结果 黄连素的MIC为512μg/mL,戊间甲酚的MIC为0.0233%;悬液定量杀菌试验表明,512μg/mL黄连素或0.00233%戊间甲酚单独使用时对浮游状态粪肠球菌杀灭效果较弱,但二者联合使用时表现出协同抗菌作用;死活菌染色和扫描电子显微镜结果表明二者联合使用时对生物膜状态粪肠球菌杀灭效果较弱,但可影响生物膜结构;512μg/mL黄连素和0.00233%戊间甲酚单用(或联用)处理HOK细胞时,其存活率远大于损伤率,细胞毒性较低.结论 黄连素与戊间甲酚对粪肠球菌具有协同抗菌作用,且生物安全性较好.

RUNX1对牙髓干细胞的增殖及成骨、成脂分化的影响

目的研究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)对牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)增殖、成骨向分化、成脂向分化的作用。方法转染建携带目的基因RUNX1和绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体至DPSC 48 h后,通过荧光标记GFP和Western blot确定转染效率。过表达RUNX1后,CCK-8法和克隆形成实验检测DPSC增殖能力和克隆形成能力,流式细胞术检测DPSC细胞周期。转染沉默RUNX1的siRNA至DPSC。矿化诱导后,通过碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色,观察过表达/沉默RUNX1对DPSC成骨向分化的影响;成脂诱导后,通过油红O染色,观察过表达/沉默RUNX1对DPSC成脂向分化的影响。结果转染慢病毒后RUNX1蛋白在DPSC中过表达,荧光检测示慢病毒转染成功,稳定表达GFP蛋白的细胞均在70%以上。过表达RUNX1后DPSC细胞增殖速度增快、克隆形成能力增强、S期细胞比例增加(P<0.05)。RUNX1过表达后DPSC的碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力增强,脂滴减少(P<0.05);RUNX1敲低后DPSC的碱性磷酸酶活性和矿化结节形成能力减弱,脂滴增加(P<0.05)。结论RUNX1促进DPSC增殖和成骨向分化,抑制DPSC成脂向分化。