“原子吸收光谱”实验教学的探讨与改进

原子吸收光谱法是《仪器分析》课程中重要的仪器分析内容,它广泛用于各个领域中微量及痕量元素的分析。在中药学领域更是中药重金属及有害元素测定的主要方法,是检测药材重金属及有害物质残留的主要手段。文章结合多媒体教学和实验教学两方面探讨原子吸收光谱在中药学学科实验课程中的现状,就目前存在的问题提出可改进的方法。在改进的方法之上尝试对原子吸收实验教学内容优化,提高学生学习自主性。

多花黄精中果聚糖产物的抗疲劳与改善肠道菌作用研究

目的研究多花黄精精制多糖的结构特征并探究其抗疲劳及改善肠道菌作用,为以多花黄精精制多糖为功能性成分的产品开发提供理论依据。方法采用PMP柱前衍生化-高效液相色谱法、三甲基硅醚衍生化-气相色谱法等方法对多花黄精精制多糖进行化学表征;采用小鼠负重游泳试验结合生化指标评价其抗疲劳作用;采用16S rRNA肠道菌群测序研究多花黄精精制多糖的改善肠道菌作用。结果获得的多花黄精精制多糖是一种果聚糖产物,且含有少量葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)和半乳糖醛酸(GalA),其相对分子质量在0.4~285 kDa内,主要组分的分子量在3 kDa左右。与模型组比较,多花黄精精制多糖高剂量组能明显延长小鼠的力竭游泳时间(P<0.01),降低血清中BUN、UA水平,显著降低肌肉组织中LA(P<0.01)和MDA水平(P<0.05);显著提高肝脏组织中SOD(P<0.01)活性,GSH-Px(P<0.001)和CAT(P<0.05)水平。与空白对照组相比,多花黄精精制多糖低剂量组能够上调小鼠粪便微生物中益生菌伊格尔兹氏菌属(g_unclassified_f_Eggerthelaceae)和魏斯氏菌属(g_Weissella)相对丰度(P<0.05)。结论确定了多花黄精精制多糖的化学组成,并证明了该多糖具有较好的抗疲劳功效,能促进肠道中益生菌生长,为以多花黄精精制多糖作为功能性成分的产品开发提供依据。

基于经典名方的药食同源大健康产品开发应用探讨

从近年来国家的引导政策和药食同源联合经典名方的开发利弊等方面综合阐述了药食同源经典名方的发展趋势。为中医药大健康平台注入经典力量的同时融入现代化的科技研发能力,开发出适用人群广泛且易于为现代人群接受的产品。形成以中医药理论为基础、药食同源物质为原料、中医药现代化推广与应用化为目标的药食同源经典名方产品的开发策略。

石南藤镇痛活性部位筛选及其纯化

目的筛选石南藤镇痛活性部位,并对其进行纯化。方法采用阳离子树脂富集纯化活性部位,HPLC法测定墙草碱含量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测醋酸扭体小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2水平。结果墙草碱在0.0198~0.1980 mg/mL范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率为103.09%,RSD为1.75%。最优纯化工艺为取2 BV 0.4 g/mL上样液,以2 BV/h体积流量流过树脂,5 BV 70%乙醇以2 BV/h体积流量洗脱,墙草碱纯度3.52%,得率20.63%,除杂率79.37%。阳离子洗脱液部位可有效减少小鼠疼痛扭体次数,降低1L-1β、TNF-α水平(P<0.01)。结论HPLC法准确稳定,重复性好,阳离子树脂纯化效率高,操作性强,工艺简便,可用于纯化具有镇痛活性的石南藤,其镇痛机制可能与减少炎症因子的释放有关。

经典名方温经汤基准样品HPLC-Q-TOF/MS分析与指纹图谱研究

目的采用HPLC-Q-TOF/MS技术对温经汤基准样品化学成分进行表征,同时建立经典名方温经汤基准样品指纹图谱,并对其共有峰进行指认与归属。方法采用Agilent 5 TC-C_(18)(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,通过PeakView软件辅助解析,快速鉴别出温经汤基准样品中化学成分,并通过HPLC-UV及HPLC-ELSD法建立温经汤基准样品指纹图谱。结果温经汤基准样品中共分析鉴别出122个化合物,并进行相关药味归属。建立的温经汤基准样品HPLC-UV指纹图谱有19个共有峰,通过对照品比对,指认出没食子酸、芍药苷、甘草酸、甘草苷、桂皮醛、丹皮酚、阿魏酸、藁本内酯、β-蜕皮甾酮9个色谱峰;HPLC-ELSD指纹图谱有8个共有峰,通过对照品比对,指认出人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re和人参皂苷Rb_(1)。建立的HPLC-UV、HPLC-ELSD两张指纹图谱能够归属全方所有药味。结论通过UV、ELSD建立的指纹图谱方法灵敏度高,稳定性和准确性良好,全面反映了温经汤基准样品的整体特征,为温经汤基准样品质量标准的建立提供了可靠的依据。

药食同源产品研发现状、技术关键与对策

随着社会的发展与人们生活水平及健康意识的提高,现代社会医疗模式由传统治疗型向预防保健型转变,人们对药食同源类产品的需求不断升高。为了充分发挥中医药独特优势,挖掘药食同源类中药养生保健和治未病的功能,推进中医药继承创新,从我国药食同源的起源与历史沿革,药食同源相关法规政策,药食同源类产品研究现状及其关键技术、存在问题等几个方面进行了系统总结及分析,并在此基础上提出了解决上述问题的策略和建议,以期为药食同源产品的研究与开发提供参考。

基于HPLC-Q-TOF-MS、指纹图谱和含量测定的精气神口服液质量评价研究

目的建立精气神口服液HPLC-ELSD指纹图谱及其活性成分的含量测定方法。方法采用HPLC-Q-TOF-MS技术对精气神口服液化学成分进行分析,应用相似度评价对数据进行研究。采用Agilent TC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,建立精气神口服液HPLC-ELSD指纹图谱并进行含量测定。结果HPLC-Q-TOF-MS共鉴定出75个化合物;通过10批样品HPLC-ELSD指纹图谱标定了14个共有峰,通过对照品比对,共指认了斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_(1)、人参皂苷Rd、人参皂苷Rf、人参皂苷Rg_(3)8个色谱峰。为进一步控制口服液的整体质量,选取其中斯皮诺素、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re和人参皂苷Rb_(1)4个活性成分,进行含量测定,各活性成分线性关系良好,建立的方法灵敏度高,稳定性和准确度良好。结论建立的含量测定与指纹图谱同时测定的方法准确、稳定,可全面评价与控制精气神口服液的质量。

基于LC-MS分析及网络药理学研究探讨多花黄精改善炎性疲劳的效应机制

目的基于LC-MS分析与网络药理学评估多花黄精缓解炎性疲劳(Inflammatory fatigue)的有效成分与活性机制。方法通过LC-MS获得多花黄精成分信息,收集成分作用靶点信息;对比炎性疲劳的基因靶点后获取共有靶点作为多花黄精作用靶点;进行共有基因靶点GO功能富集分析及KEGG通路富集分析,最后采用促炎细胞模型验证多花黄精抗炎活性。结果LC-MS共检测到62个多花黄精化学成分,发现成分与疾病的共有靶点208个。网络药理学分析提示:N-顺阿魏酰酪胺、β-谷甾醇、11 E-十八碳二烯酸、β-D-葡萄糖醛酸和甘草素为多花黄精抗炎性疲劳重要起效成分,STAT3、MAPK3、AKT1、JUN、TP53、EGFR、CASP3、IL6可能为其关键作用靶点,而5-羟色胺能突触、钙信号通路、JAK-STAT信号和NF-κB通路是其主要的生物途径。细胞实验研究表明多花黄精具有显著的抑制LPS诱导的巨噬细胞分泌炎症因子作用,表明多花黄精具有一定的抗炎活性。结论多花黄精中较多的小分子成分可通过多种生物途径,作用于多个生物靶点改善机体炎性相关疲劳。

养生代餐粉的熟化工艺筛选与抗抑郁功能评价

目的:研究养生代餐粉的熟化工艺并对其抗抑郁功能进行评价。方法:以蒸煮、炒制、微波等方法对代餐粉的中药混合粉进行熟化,测定其理化指标、总多糖、总黄酮及体外消化特性;采用腹腔注射LPS造小鼠抑郁模型,随机分为空白组、模型组、盐酸氟西汀组及养生代餐粉组,通过悬尾及强迫游泳实验观察代餐粉对小鼠行为学的影响,并测定代餐粉对小鼠血清IL-1β、TNF-α、5-HT、NE及脑组织BDNF含量的影响。结果:经熟化处理后,最优熟化工艺挤压膨化组的水溶性指数(WSI)、吸水性指数(WAI)、离心沉淀率(SR)、分散时间、润湿时间、总多糖含量、总黄酮含量分别为34.35%、3.18 g/g、52.16%、184.12 s、195.02 s、32.2 mg/g、0.62 mg/g。表明挤压膨化对中药粉冲调性改善不如烘烤等其他熟化工艺,但可明显提高中药粉末可溶性小分子物质的含量,并显著增加活性物质含量。体外消化结果表明,挤压膨化对中药粉总黄酮释放量稍有影响,但其快消化淀粉RDS含量(63.52%)较低,慢消化淀粉SDS含量(34.14%)显著高于其他各组(P<0.05)。动物实验结果显示,与模型组比,代餐粉可明显降低小鼠悬尾及强迫游泳不动时间,下调小鼠血清IL-1β、TNF-α水平,增加5-HT、NE及脑组织BDNF含量(P<0.01)。结论:挤压膨化工艺理化指标符合产品营养吸收性好的要求,功能性成分增加较大,升糖指数低、健康养生。因此,挤压膨化是养生代餐粉的最佳制备工艺。养生代餐粉可明显改善抑郁模型小鼠的抑郁样行为及指标。

保元抗疲咀嚼片HPLC-ELSD特征图谱研究及4种功效成分的含量测定

目的建立保元抗疲咀嚼片HPLC-ELSD特征图谱和4种代表性功效成分的含量测定方法。方法采用HPLC-ELSD法,色谱柱为Agilent 5 HC C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 mL·min^(-1),蒸发光散射检测器(ELSD)蒸发温度为120℃,气体流量为1.6 SLM。结果建立了保元抗疲咀嚼片HPLCELSD特征图谱,标定了11个特征峰,并鉴定出甘草苷、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_(1)、甘草酸铵5个成分,15批样品特征图谱的相似度均>0.920。建立了保元抗疲咀嚼片中4种功效成分的含量测定方法,人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_(1)、甘草酸的含量分别为1.01~1.09 mg·g^(-1)、0.85~0.96 mg·g^(-1)、1.42~1.70 mg·g^(-1)、1.53~1.84mg·g^(-1)。结论采用HPLC-ELSD特征图谱结合多功效成分含量测定,可全面评价与控制保元抗疲咀嚼片的质量。

基于网络药理学和实验验证的甘麦大枣汤抗抑郁的物质基础及作用机制研究

目的:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析、鉴定甘麦大枣汤的主要化学成分,并在此基础上通过网络药理学及动物实验进一步对甘麦大枣汤抗抑郁的作用机制进行探讨。方法:根据采集到的质谱数据,通过PubChem数据库结合相关参考文献进行化学成分的鉴定。将鉴定出的化学成分输入SwissADME数据库,根据Pharmacokinetics、Druglikeness进行筛选。利用SuperPred和SwissTargetPrediction数据库预测筛选成分的相关靶点,同时在GeneCards、DrugBank等数据库搜索抑郁症相关疾病靶点。利用STRING数据库构建“成分-靶点”及PPI蛋白互作网络,筛选药效作用的核心靶点。采用Metascape数据库进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果:共分析鉴定了95个化合物,包括黄酮类、萜类、有机酸类、氨基酸类以及其他类。进一步筛选了12个关键活性成分,40个活性成分与疾病交集靶点,通过网络拓扑分析获得TNF、SLC6A3、MAOB等16个核心靶点;富集分析发现甘麦大枣汤抗抑郁作用通路有神经营养相关通路、内分泌相关通路、炎症免疫相关通路等;动物实验结果显示,与模型组比较,甘麦大枣汤可显著减少小鼠悬尾及强迫游泳静止不动时间、下调小鼠血浆IL-1β、TNF-α含量、上调小鼠血浆5-HT、NE水平(P<0.01)。结论:该研究初步阐明了甘麦大枣汤中的化学成分,同时整合网络药理学及动物实验探讨其发挥药效的关键成分、核心靶点、相关通路,为甘麦大枣汤的药效物质基础及作用机制研究提供了参考。

石见穿治疗小鼠肾结石的活性部位筛选及其化学成分分析

目的:阐明石见穿治疗肾结石的活性部位。方法:采用系统溶剂提取法提取石见穿,分为3个部位:石油醚部位,95%乙醇部位,水部位。乙醛酸盐诱导肾结石法建立小鼠肾结石模型,采用生化分析仪检测各组小鼠血清肌酐、尿素氮水平。以苏木精-伊红(HE)染色和Von Kossa染色观察小鼠肾组织病理学形态及钙结晶沉积程度。借助超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱对活性较好的部位进行成分鉴定。结果:同等剂量下石见穿95%乙醇部位有良好的治疗肾草酸钙结石和修复肾脏损伤作用,能够显著减少小鼠肾脏草酸钙结晶。该部位的化学成分为酚酸类,黄酮类,三萜类,其中主要是酚酸类成分。结论:石见穿中酚酸类成分可能为其治疗肾结石的有效成分。

丹参总酚酸复合磷脂脂质体制备工艺研究

目的采用复合磷脂脂质体技术以氢化大豆磷脂(HSPC)和大豆磷脂(SPC)为膜材制备丹参总酚酸复合磷脂脂质体,并研究其最佳制备工艺。方法采用逆向蒸发法制备复合磷脂脂质体,测定其粒径与粒径分布,以脂质体的成型性与包封率等为评价指标,研究丹参总酚酸脂质体的制备工艺。结果磷脂与胆固醇质量比为3∶1、有机相与水相体积比为4∶1、药脂比为1∶15、磷脂质量浓度为12.5 mg·mL^(-1)时得到的丹参酚酸B与丹参总酚酸的平均包封率分别为60.08%和69.45%,其中载药量以丹参总酚酸计达2.92%。结论该复合磷脂脂质体制备方法准确可靠,工艺合理稳定。

气相色谱实验教学改革初探

气相色谱实验教学主要培养学生对精密仪器的实践操作能力,打开了学生从学到用的窗口,对学生从理论知识到实验操作的认知转化具有积极的意义。本文从教师教学及学生学习两方面分析了当前教学过程中普遍存在的共性问题。并从可操作的教学改革形式包括:丰富学习资源,加入虚拟仿真,拓宽课外应用及倡导多元化这四个方面探讨拓展教学改革内容,为气相色谱实践教学提供指导。

崩漏停对药物流产大鼠子宫出血模型的影响

目的:采用流产大鼠子宫出血模型研究崩漏停治疗在体子宫出血症状。方法:采用早孕大鼠灌服米非司酮和米索前列醇造成阴道出血模型,观察崩漏停对该模型子宫出血量的影响,同时观察大鼠的血浆凝血指标、血清雌二醇和孕酮水平变化,子宫和卵巢重量及组织学形态变化。结果:崩漏停对药物流产大鼠有促进凝血和减少子宫出血的作用,高剂量可提高血清雌二醇和孕酮水平。子宫和卵巢组织病理学检查,高剂量组的卵巢功能恢复最好,药物流产子宫内膜修复评分值高剂量组最高,但各组间没有明显差异。结论:崩漏停可减少早孕大鼠药物流产模型的子宫出血量,并有助于卵巢和子宫内膜修复。

半夏厚朴汤对顺铂所致水貂呕吐模型的作用及机制研究

目的探讨半夏厚朴汤(BXHPT)对顺铂所致水貂呕吐模型的治疗作用以及对P物质(SP)/NK1R信号的影响。方法36只水貂随机分为正常对照组,模型组,昂丹司琼组,BXHPT低、中、高剂量组(200、400、800 mg/kg),各组分别给予相应的药物连续7 d,后采用顺铂腹腔注射构建呕吐模型,测定水貂的干呕和呕吐次数,ELISA法检测水貂大脑最后区SP的含量,Western blot法测定大脑最后区NK1R、p-ERK1/2、ERK1/2的蛋白水平。结果模型组水貂干呕、呕吐次数,大脑最后区SP水平,NK1R,p-ERK1/2蛋白水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。而BXHPT组水貂干呕、呕吐次数,大脑最后区SP水平,NK1R,p-ERK1/2蛋白水平均明显低于模型组(P<0.05)。结论BXHPT可以治疗顺铂导致的水貂的呕吐,其机制可能与降低水貂大脑最后区SP/NK1R信号活化有关。

四角蛤蜊提取物中脂肪酸与甾醇成分分析

目的分析四角蛤蜊醇沉上清中脂肪酸及甾醇类成分。方法采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对四角蛤蜊醇沉上清中脂肪酸类、甾醇类成分进行分析与鉴定。结果共分离鉴定出35种脂肪酸,占总脂肪酸含量的97.74%,其中17种饱和脂肪酸的相对含量为54.52%,主要为十六烷酸、十八烷酸等;18种不饱和脂肪酸的相对含量为43.22%,主要为9-十六烯酸、6-十四烯酸、EPA等。共分离鉴定出10种甾醇,包括3种胆甾醇、3种麦角甾醇、2种豆甾醇、岩甾醇及雄甾醇各1种,其中胆甾醇含量最高为63.38%,其次为麦角甾醇20.81%与豆甾醇9.68%。结论以GC-MS联用技术分析了四角蛤蜊醇沉上清中的脂肪酸类、甾醇类成分,为四角蛤蜊资源的综合开发利用提供科学依据。

经典名方质量研究及其量值传递关键技术

古代经典名方产品研发是目前中医药行业的研究热点,根据古代经典名方复方制剂物质基准及古代经典名方中药复方制剂的申报资料要求,从药材、饮片、物质基准、制剂等层次,阐述影响经典名方质量的关键因素和影响质量量值传递的关键技术,以解决经典名方中药复方制剂批间质量差异大的难题。

壳聚糖/四角蛤蜊多糖载药微球的制备与表征

目的:以壳聚糖、四角蛤蜊多糖(MVPS)作为复合载体材料,以盐酸二甲双胍为模型药物,采用喷雾干燥的方法制备盐酸二甲双胍复合微球。方法:采用正交试验得出了载药复合微球的最佳工艺条件。利用扫描电镜,粒度分析仪以及X射线扫描仪对微球的微观结构和粒度以及物相进行了表征。结果:最佳工艺奈件为:入口温度110℃,空气流量667 m^3·h^(-1),材药比3:1,进料速度2.7ml·min^(-1)。结论:通过紫外分光光度法测定最佳工艺条件下的收率、载药量、包封率分别为(75.07±2.48)%、(22.31±0.38)%、(89.22±1.53)%,复合载药微球表面较为光滑,平均粒径为4.84μm,粒度分布范围较窄,呈正态分布;形成微球后药物以分子形式存在。

马氏珍珠贝中核苷类成分的分离富集工艺研究

目的:对马氏珍珠贝中核苷类成分进行分离富集工艺研究,以期得到纯度较高的天然核苷。方法:以马氏珍珠贝水提醇沉液中的核苷类成分为指标,采用HPLC测定含量,对大孔树脂型号、上样工艺、洗脱工艺进行考察,采用UV对纯化部位的核苷类成分进行测定。结果:根据HPLC-UV所得结果,选定大孔树脂型号为SP207、上样浓度为2.19 mg/mL、上样pH为4.6、上样流速为2 BV/h,核苷最佳上样体积为25 mL,洗脱时水洗量为2 BV,洗脱溶剂选择15%乙醇,洗脱流速选择3 BV/h,洗脱体积选择为3 BV,径高比选择1∶7。结论:经SP207纯化后,总核苷纯度为58.19%,表明该方法适用于分离富集马氏珍珠贝中的核苷类成分。