宫颈脱落细胞CircRNA 000284检测在宫颈癌筛查中的作用

目的:探讨检测宫颈脱落细胞CircRNA 000284对宫颈癌的临床诊断价值。方法:选取柳州市工人医院92例宫颈癌患者(宫颈癌组)及60例健康体检女性(对照组),进行宫颈脱落细胞中CircRNA 000284及宫颈脱落细胞高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型检测。分析在不同临床病理特征下宫颈癌脱落细胞的CircRNA 000284相对表达情况,计算CircRNA 000284与高危HPV分型检测灵敏度、特异度及符合率等指标。结果:宫颈癌患者宫颈脱落细胞CircRNA 000284相对表达量明显高于对照组(t=12.8,均P<0.01),其CircRNA 000284表达水平与FIOG分期、病理分化程度、组织浸润深度、脉管间隙浸润及淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。CircRNA 000284单一检测敏感性80%、特异性100%、诊断符合率87.3%均优于高危型HPV分型检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CircRNA 000284在宫颈癌患者宫颈癌脱落细胞中显著高表达,具有较高的临床诊断价值,有望成为宫颈癌诊疗新的生物标志物。

人中性粒细胞防御素1-3在相关疾病中的研究进展

人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)是人中性粒细胞中的一种重要机体防御素,对多种微生物具有显著的杀伤和抵御能力,其被认为与人类感染性疾病的易感性密切相关,是机体防御系统的重要组成部分。此外,HNP1-3还参与机体的免疫调节,并在肿瘤细胞抑制方面发挥重要的调控作用,在抑制多种疾病的进展方面作用重大。该研究就HNP1-3在相关疾病中的研究进展进行综述。

ISO15189体系文件管理系统的设计与实现

为解决目前实验室ISO15189体系文件人工及纸质化管理存在的不足,结合实际管理需求,提出利用软件技术从流程、文档格式、保存方式、授权、学习及考核、管理等主要方面如何实现设计及实现ISO15189体系文件信息化管理,从而达到医疗单位实验室质量管理水平提高的目的。

质量管理体系中纸质化文件控制的现状探讨

国际标准化组织（ISO）15189质量管理体系的核心与基础是质量管理体系文件。实验室认可要求中明确指出受控文件可以任何适当的媒介保存,不限定为纸质保存。而国内外临床实验室的体系文件大部分仍采用纸质打印,耗费大量纸张,占用大量的空间,耗费大量的人力资源,不便于体系的管理,给文件控制带来诸多不便。

HBV核苷(酸)类似物耐药突变及其检测技术的临床应用

目前,可供临床应用的抗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogs,NAs]包括拉米夫定(lamivudine,LAM)、替比夫定(telbivudine,Ld T)、阿德福韦酯(adefovir,ADV)、恩替卡韦(entecavir,ETV)及替诺福韦酯(tenofovir,TDF),NAs作为病毒逆转录酶抑制剂,可抑制HBV DNA复制扩增。由于HBV属于高基因变异率病毒,NAs长期治疗后,选择压力下使耐药病毒株成为优势株,影响治疗效果。因此,为防治CHB抗病毒治疗中耐药的发生,弄清楚其耐药机制及变异的监测及诊断十分必要。本文总结了近年来发现的常见突变位点,并比较了几种临床应用的突变监控及检测技术,对耐药突变进行早期、快速检测具有重要临床意义,使慢性HBV感染的监测达到最优化。

比对两台荧光定量PCR仪检测HBV-DNA结果一致性研究

目的对ABI-7300荧光定量PCR仪与DA-7600荧光定量PCR仪检测HBV-DNA的结果进行比对和偏差评估。方法参照EP-9A2文件,分别在两台仪器上检测40例患者样本(浓度分布整个线性范围),获取HBV-DNA检测数据。以ABI-7300荧光定量PCR仪作为参比仪器,DA-7600荧光定量PCR仪作为实验仪器,建立回归方程,计算其绝对偏差与相对偏差。根据ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》中扩增检验项目分析性能标准,判断偏倚是否可接受。结果 ABI-7300荧光定量PCR仪与DA-7600荧光定量PCR仪检测HBV-DNA的定量结果相对偏倚为6.6%,符合ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》中扩增检验项目实验室内分析系统定期比对的标准(系统误差绝对值小于7.5%)。结论 ABI-7300荧光定量PCR仪与DA-7600荧光定量PCR仪检测的HBV-DNA结果具有可比性,可为临床提供可接受的HBV-DNA检验结果。

ABI 7300实时荧光定量PCR仪的性能评估

目的为参加医学实验室认可和评价仪器性能,对ABI 7300实时荧光定量PCR仪的性能进行评估。方法参照美国临床实验室标准化委员会（CLSI）文件对ABI 7300荧光定量PCR仪检测HBV-DNA定量结果的精密度、正确度、灵敏度及线性进行评价。结果精密度：批内变异系数（CV批内）为2.38%-4.61%,批间变异系数（CV批间）为3.87%-5.33%,达到《医学实验室质量和能力认可准则》中基因扩增检验项目分析性能标准（CV批内〈4.8%,CV批间〈6.4%）。正确度：参加2011年卫生部室间质评结果总体平均偏倚为2.14%,符合卫生部质评要求（偏倚不超过8%）;功能灵敏度：100IU/mL检测限浓度的CV值最接近于20%,与试剂盒检出下限相符;线性：相关系数（r2）为1.0,线性关系符合要求。结论 ABI 7300实时荧光定量PCR仪各项性能指标精确,可以为临床提供快速、准确的报告。

荧光定量PCR技术在结核杆菌检测中的初步探讨

目的:探讨荧光定量PCR技术在结核病诊断中的价值。方法:应用荧光定量PCR技术对我院102例门诊及住院病人的痰、胸腔积液、尿等标本进行结核杆菌DNA检测,同时涂片镜检与培养,并对3种方法检测的阳性率进行比较。结果:荧光定量PCR阳性率为48%、涂片抗酸染色法阳性率为15%、结核培养法阳性率为14%。结论:荧光定量PCR技术较传统方法具有较高的敏感性与特异性,尤其对涂片染色与结核培养阴性的结核病具有更大的诊断价值。

高效液相色谱法与琼脂糖电泳法检测β-地中海贫血携带者HbA_2结果的比较

目的比较高效液相色谱法(HPLC)与琼脂糖电泳法检测β-地中海贫血携带者HbA2的结果,探讨二者筛查β-地中海贫血的灵敏性和可靠性。方法产前筛查疑似β-地中海贫血携带者154例,同时检测β-地中海贫血基因、HbA2。HbA2分析采用法国Sebia琼脂糖凝胶电泳系统和HPLC分析系统同时进行分析。β-地中海贫血基因诊断采用反向点杂交法进行17种常见突变基因检测,以基因诊断结果作为金标准分别对HPLC分析仪和琼脂糖电泳的HbA2结果进行评价分析。结果在154份临床样本中,基因诊断为阳性的样本为65例;以HbA2>3.5%作为诊断β-地中海贫血携带者的最佳临界值,琼脂糖电泳共筛查出57例阳性,与基因诊断符合率为87.6%;HPLC分析共筛查出63例阳性,与基因诊断符合率为96.9%;琼脂糖电泳与HPLC分析仪诊断β-地中海贫血的灵敏性、特异性分别为84.6%、97.7%、96.9%及98.9%。HPLC分析仪阳性符合率、灵敏性明显高于琼脂糖电泳,差异有统计学意义(P<0.05);而HPLC特异性也稍高于琼脂糖电泳法,但比较无显著差异(P>0.05)。结论 HPLC筛查β-地中海贫血与基因诊断有较高的符合率,是一种筛查β-地中海贫血灵敏性、特异性和准确度都较高的理想方法。

乙肝患者前S_1抗原及HBV-DNA的测定与比较

目的:探讨乙肝患者前S1抗原与HBV-DNA含量的关系。方法:用ELISA方法测定前S1抗原,用荧光定量PCR方法检测HBV-DNA含量。结果:不同两对半模式血清HBV-DNA阳性率不同,检出率以HBsAg(+)和/或HBeAg(+)、抗-HBc(+)组最高;共检出前S1抗原阳性血清65例,其中HBV-DNA检出率为82%。结论:前S1抗原与HBeAg、HBV-DNA有较好相关性;FQ-PCR检测可更准确反映HBV感染及复制情况。

新生儿耳聋基因诊断技术进展研究

耳聋是新生儿出生缺陷疾病之一,而在出生后快速、准确地完成耳聋基因筛查,明确耳聋的分子病因,并针对性地给予干预和治疗,可以有效地避免因聋致哑。近年来随着分子生物学技术的飞速发展,对耳聋基因的研究也更加深入。目前基因芯片技术、高分辨率熔解曲线分析、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术、变性高效液相色谱法、Sanger测序、高通量测序技术等均可运用于耳聋基因诊断。现就新生儿耳聋的遗传学机理和常用的耳聋基因诊断技术进行综述,旨在为临床选择最佳的耳聋诊断检测方案提供参考。

反向斑点杂交技术检测HPV基因分开型在宫颈癌筛查中的应用

目的探讨反向斑点杂交法(RDB)检测人乳头瘤病毒(HPV)基因分型,作为宫颈癌筛查手段的临床意义和价值。方法采用反向斑点杂交法检测23个HPV基因型别低危型:(HPV6、11、42、43、45)和高危型:(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4)。结果683例样本中检出HPV阳性者196例,检出率为28.69%,低危型占30.10%、高危型占54.04%、二型和二型以上混合感染占17.85%。结论持续的HPV感染与宫颈疾病的演变有关,反向斑点杂交法能较好地检出HPV感染的基因型,为临床提供较有价值实验资料,对宫颈病筛查有较大的帮助。

D-二聚体检测抗原过量现象在Sysmex CS5100血凝仪上的识别及验证分析

D-二聚体是交联纤维蛋白在纤溶酶作用下水解产生的特异性降解产物,其水平的升高反映机体高凝状态和继发纤溶亢进[1]。目前各医院实验室对D-二聚体的检测主要在全自动血凝仪上进行,其检测方法多为免疫比浊法[2]。在免疫比浊法检测中,抗原和抗体是按适当的比例结合的,而当D-二聚体浓度异常升高,则会导致抗原抗体比例失衡,出现抗原过量的现象,即HOOK效应,导致结果偏低,不能准确反映机体D-二聚体的真实水平[3]。

2型糖尿病并发血管病变的临床实验研究

目的：为探讨2型糖尿病血管并发症的发病机理，为2型糖尿病血管并发症的早期诊断、早期防治提供理论论据。方法：采用目前国际上较新的18个检测项目对121例不同类型的糖尿病(无血管病变组、微血管病变组、大中血管病变组)患者进行全面系统的检测分析、并对其中的无血管病变35例进行追踪观察。结果：18个项目对三组研究对象均有不同程度的敏感性和特异性，其中以TM、GNP-140、Ⅶ：C、SFMC、F1+2、tPA、PAI-1、PAP等8项项目敏感性和特异性较高。结论：2型糖尿病并发血管病变与血管内皮细胞损伤、血小板激活、凝血因子活性增强、纤溶系统降低等有密切关系。临床可以应用8个项目对糖尿病患者进行检测，结合临床特征，可以对糖尿病并发血管病变作出早期诊断。

反向点杂交法检测β地中海贫血在产检中的应用

目的探讨反向点杂交(RDB)法检测在产检中筛查β地中海贫血的应用价值。方法采用RDB法,检测54例临床似诊为β地中海贫血患者。结果在54例样本中,检出β地贫基因携带者17人。结论ROD法在检测β地贫中,具有高通量、特异性强、操作简便无需接触放射性等优点。

Circ_0001946靶向miR-671-5p调控Wnt/β-catenin通路对结直肠癌细胞恶性进展的影响

[目的]探讨circ_0001946对结直肠癌细胞恶性进展的影响。[方法]培养结直肠癌HCT116、SW480、Colo320、HT29细胞和正常结直肠CCC-HIE-2细胞,实时定量PCR检测circ_0001946、miR-671-5p表达量。miRcode和双荧光素酶报告实验分析circ_0001946和miR-671-5p的关系。circ_0001946、miR-671-5p在HCT116细胞中的表达量被上调或下调后,分别检测HCT116细胞生长活性、细胞凋亡率及细胞迁移能力。免疫蛋白印迹法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达及Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。[结果] HCT116 (4.76±0.47)、HT29 (2.85±0.57)、SW480 (2.75±0.62)、Colo320 (3.12±0.68)细胞中circ_0001946表达水平高于CCC-HIE-2细胞(1.24±0.09)(t=7.238、8.129、6.893、6.875,P均<0.05)。下调circ_0001946表达显著降低了HCT116细胞增殖(P<0.05)和迁移能力(P<0.05),促进了细胞凋亡(P<0.01);circ_0001946靶向miR-671-5p;circ_0001946表达被上调或miR-671-5p表达被下调后,HCT116细胞增殖和迁移能力显著上升,细胞凋亡率明显降低,Wnt/β-catenin信号通路被激活。[结论] circ_0001946靶向miR-671-5p激活了Wnt/β-catenin信号通路,促进了结直肠癌细胞恶性进展。

I-Bil、DD、cTNⅠ及Crea在血栓性血小板减少性紫癜 患者中的表达及临床意义

目的探讨血清间接胆红素(I-Bil)、肌钙蛋白Ⅰ(cTNⅠ)、肌酐(Crea)及血浆D二聚体(DD)水平在血栓性血小板减少性紫癜(TTP)患者中的表达及临床意义。方法选取2019年1月-2022年12月我院收治的TTP患者35例作为试验组,另选同期35名健康志愿者作为对照组。比较两组血清I-Bil、cTNⅠ、Crea及血浆DD水平,分析上述指标与TTP患者血小板计数的关系。结果试验组血清I-Bil、cTNⅠ、Crea及血浆DD水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组经治疗缓解后,I-Bil、cTNⅠ、Crea及血浆DD水平均逐渐下降,均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,I-Bil、cTNⅠ、Crea及血浆DD均与血小板计数呈负相关(r=-0.706、-0.664、-0.619、-0.531);试验组中病情未缓解的患者I-Bil、cTNⅠ、Crea及血浆DD水平呈持续升高趋势。结论TTP患者血清I-Bil、cTNⅠ、Crea及血浆DD水平与病情变化密切相关,对上述指标的监测有助于对TTP患者的病情判断及预后评估。

64例地中海贫血常见与罕见基因型的表型分析

目的对常见、罕见地贫基因型患者的表型分析,探讨不同基因型与表型间差异。方法采用反向斑点杂交及gap-PCR技术检测来自南宁、柳州、百色等3地区64例患者地贫基因型并进行分组。收集患者治疗史、血液学与铁代谢的生化指标。采用Kruskal-Wallis检验或Welch one-way ANOVA检验分析患者表型特征。结果检出58例常见基因型:30例β~0/β~0,28例HbH CS(α^(CS)α/--^(SEA));6例罕见基因型:3例Hb CS纯合突变,3例HbH(-α^(3.7)/--^(SEA))复合β~0/β~0。表型分析显示,β~0/β~0患者无输血生存时间最短,临床症状最重,HbH CS患者最轻,但临床表型异质性很大。Hb CS纯合突变与HbH CS患者相比,输血依赖程度与铁负荷明显重于后者。HbH复合β~0/β~0患者临床表型与β~0/β~0患者相比差异无统计学意义,但表型严重性呈下降趋势。Hb CS纯合突变、HbH复合β~0/β~0患者表型与β~0/β~0患者相似,极易误诊,需分子诊断以明确基因型。结论地贫基因型与表型存在多样性与复杂性特点,β-地贫表型重于α-地贫,α-地贫表型异质性大于β-地贫,罕见地贫表型类似β-地贫,Hb CS纯合突变表型重于HbH CS。

膜杂交技术检测HPV基因分型联合液基细胞学在宫颈癌筛查中的应用

目的采用膜杂交法对人乳头瘤病毒(HPV)进行基因分型,液基细胞学检测细胞分级,用作宫颈癌筛查手段的临床价值和意义。方法采用膜杂交法检测23个HPV基因型别(低危型:HPV6、11、42、43、45和高危型:HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4)和液基细胞学(TCT)作为宫颈癌和癌前病变的筛查。结果781例临床样本中,HPV阳性360例;占46.02%,其中单一型HPV感染中,低危型占34%、高危型占60%、二型和二型以上混合感染占6%。TCT检查≥ASCUS 184例占27%。结论本地区宫颈疾患人群中,存在较高的HPV感染率;随着TCT级别的升高,HPV感染率、特别是高危型的感染率明显升高。HPV基因分型检测是有价值的辅助诊断技术,与细胞学联合,是最佳的宫颈癌筛查的方案。