芦荟水提液的除杂浓缩

采用膜分离技术对芦荟水提液进行除杂、浓缩,以提高芦荟多糖的纯度。试验比较了微滤膜10 K和微滤膜20K的除杂效果,选用更合适的微滤膜20K:可使芦荟多糖透过率高达97.6%、杂质截留率达17.8%;比较了纳滤膜MWC和纳滤膜GMC的浓缩效果,选用更合适的纳滤膜MWC:芦荟多糖截留率高达98.3%,浓缩液芦荟多糖的纯度达73.6%。

负载化疗药物的外泌体对肝癌的靶向治疗研究

目的:在小鼠肝癌皮下瘤模型中探究肝癌靶向肽介导负载甲氨蝶呤(MTX)的肝癌细胞来源外泌体(tumor-derived exosome-TEX)的抗肿瘤效果及不良反应。方法:利用超速离心法收集负载MTX的小鼠肝癌细胞来源的外泌体(TEXMTX);利用外泌体特异锚定短肽CP05将肝癌靶向肽SP94修饰在TEXMTX表面,活体成像检测靶向肽修饰的TEXMTX能否高效靶向肝癌组织;通过尾静脉注射荷瘤鼠,评估该靶向肽修饰的TEXMTX的抑瘤效果,同时检测治疗后各组小鼠血生化指标及组织形态学染色,评估该药物生物安全性。结果:负载MTX并不影响外泌体的基本结构和形态特征;SP94可将TEXMTX高效靶向运输到肿瘤部位;在皮下抑瘤实验中,与PBS组相比,SP94-CP05-TEXMTX能够显著抑制小鼠肝癌皮下瘤的生长(t=5.811,P<0.01),与MTX组和TEXMTX组相比,SP94-CP05-TEXMTX组肿瘤体积也显著减小(t=2.573、3.152,均P<0.05);血生化指标和病理指标显示,与PBS组相比,MTX组和TEXMTX组小鼠血清谷草转氨酶水平显著升高(t=7.084、5.260,均P<0.05)。与MTX组和TEXMTX组相比,SP94-CP05-TEXMTX组小鼠谷草转氨酶水平显著下降(t=6.241、4.955,均P<0.05);SP94-CP05-TEXMTX组与MTX组相比,小鼠血清肌酸激酶水平也显著下降(t=5.073,P<0.05)。结论:肝癌靶向肽修饰的TEXMTX可将MTX靶向运输到肝细胞癌组织,有效抑制肿瘤生长,提高化疗药物的生物安全性。

小鼠外周血细胞观察综合性实验在医学细胞生物学实验教学中的应用

医学细胞生物学实验教学作为医科院校开设的重要基础实验课程,对于不同细胞的观察是深入开展该实验课程的基础和前提,针对医科院校培养方针和实验改革的需求,以实验小鼠外周血为观察对象,采用血涂片的制备和血细胞的形态观察结合流式细胞术分析不同血细胞的大小、颗粒度、比例以及分群情况综合性实验融入实验教学实践中,有助于学生更深入全面的了解细胞类型和形态特征,掌握新的实验技能,对于培养观察能力、综合分析能力,提高实验教学质量和学生的综合素质具有重要意义。

流式细胞术应用于医学细胞生物学实验教学改革和探索

医学细胞生物学在基础医学发展中起到举足轻重的作用。流式细胞术近年在生物医学研究中取得突破性进展。而医学细胞生物学实验作为医科院校开设的重要基础实验课程之一,针对医科院校培养方针和实际需求,将流式细胞术引入实验教学实践中,更新教学内容及深化教学改革,促使学生掌握流式细胞术的实际应用,开拓科研思维,培养具有综合素养的医学人才。

不同来源外泌体对肝癌生长及转移的影响研究

目的 在肝癌原位移植瘤小鼠模型上系统评估不同来源的外泌体对肝癌生长、转移及免疫微环境的影响,为肝癌临床免疫治疗提供新的思路.方法 采用超速离心法分别获取小鼠肝癌细胞Hepa1-6及肝癌原位移植瘤小鼠（接种原位瘤后3周）血清来源的外泌体,并通过透射电子显微镜鉴定外泌体的形态.将9只接种原位瘤1周后的C57BL/6小鼠随机分为3组（每组3只）,分别尾静脉注射120μl PBS（对照组）、Hepa1-6细胞来源的外泌体（1μg/μl）（TEXcel组）、肝癌原位移植瘤小鼠血清来源的外泌体（1μg/μl）（TEXserum组）,每周注射1次,连续注射3周.末次注射后第4天处死小鼠,剖取肝癌组织和肺组织,测量肝癌组织的体积;蛋白质印迹法（Western Blot）检测肝癌组织中程序性细胞死亡蛋白-1配体（PD-L1）的表达;免疫组化染色检测肝癌组织中CD3＋、FoxP3＋T淋巴细胞的浸润情况;苏木素-伊红染色检测肝癌肺转移情况.结果 Hepal-6细胞来源的外泌体和肝癌原位移植瘤小鼠血清来源的外泌体直径均在100 nm左右,呈均一的囊泡状,且具有完整的膜结构.与对照组相比,Hepa1-6细胞来源的外泌体对肝癌生长及肺转移具有一定的抑制作用;而TEXserum组与对照组无明显区别.Western Blot检测结果显示,与对照组相比,TEXcel组和TEXserum组肝癌组织中的PD-L1蛋白表达均明显上调.免疫组化染色结果显示,与对照组相比,TEXcel组和TEXserum组肝癌组织中FoxP3＋标记的调节性T细胞（Treg）浸润数无明显变化,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;但CD3＋标记的T淋巴细胞浸润数明显减少,差异均具有统计学意义（均P〈0.05）.结论 Hepa1-6细胞来源的外泌体对肝癌生长和肺转移具有一定的抑制作用,但对肝癌免疫微环境无明显调控作用;而肝癌原位移植瘤小鼠血清来源的外泌体能促进肝癌生长、肺转移及免疫抑制微环境.Hepa1-6细胞来源的外泌体有望用于肝癌的免疫治疗研究.