奶牛乳房炎3种主要致病菌三重PCR检测方法的建立

金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌是引起奶牛乳房炎的三种常见致病菌,本研究根据金黄色葡萄球菌的nuc基因、大肠杆菌的16S-23SrRNA基因和蜡样芽孢杆菌的hblA基因,设计合成3对特异性引物,通过单纯PCR和多重PCR体系和条件优化,建立奶牛乳房炎主要致病菌三重PCR检测方法,并对50份临床乳房炎乳样分别用传统细菌学培养法和三重PCR方法进行对比检测。结果:建立的三重PCR方法能对同一样品中的3种病原菌以及与沙门氏菌等其他6种细菌的DNA模板进行扩增,均无交叉反应。对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌的检测灵敏度分别为0.1pg/uL、0.01pg/uL、0.1pg/uL。该PCR方法对50份临床乳房炎乳样检测结果,表面该方法的检出率比传统培养法的高。

奶牛GPR109A基因SYBR GreenI实时荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立奶牛G蛋白偶联受体109A基因(GPR109A)的实时荧光定量PCR检测方法,为开展奶牛产后脂类代谢紊乱及酮病发生机理研究奠定基础。【方法】根据Gen Bank中奶牛GPR109A基因和β-actin基因(内参基因)的m RNA保守序列设计合成两对引物,以奶牛肝脏组织c DNA为模板,PCR扩增目的基因后与载体连接构建重组质粒,以SYBR Green I实时荧光定量PCR进行扩增,绘制标准曲线,并对其特异性、敏感性、重复性等进行检验。【结果】GPR109A基因和β-actin基因的实时荧光定量PCR标准曲线方程分别为y=-3.309x+10.92(R2=0.9985)和y=-3.289x+9.794(R2=0.9997),扩增效率分别为101.0%和100.0%。特异性试验结果显示,GPR109A基因和β-actin基因的溶解曲线峰单一,无引物二聚体和非特异性扩增产物生成;敏感性试验结果显示,线性扩增范围广,可检测到1.8×102个拷贝的GPR109A基因;重复性试验结果显示,各扩增反应的变异系数(CV)小于或等于1.7%。【结论】基于GPR109A基因建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR具有操作简便、敏感性高、特异性强和重复性好等特点,可用于牛源性GPR109A基因表达量的快速检测和定量分析。

链球菌性乳房炎LAMP可视化检测方法的建立

目的应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,建立一种简便、快速检测链球菌性乳房炎致病菌的方法。方法本研究根据链球菌属细菌的特异性基因(tuf),设计一套LAMP引物,优化反应条件,进行特异性和敏感性实验。结果通过反应条件优化,该方法在水浴锅中1 h内即可完成全部反应,反应结果肉眼即可判定。对链球菌检测的敏感性最高达到52 fg/μL,是普通PCR方法的10倍,且与其它常见乳房炎致病菌无交叉反应。结论本研究成功建立了链球菌性乳房炎LAMP可视化检测方法,该法特异、快速、灵敏,操作及结果判定简便,设备要求低,适合基层兽医临床应用。

血浆钙·磷·抗氧化水平与水牛子宫脱垂病因的关系

[目的]探究奶水牛子宫脱垂的病因。[方法]选取53头奶水牛进行产前血浆钙、磷、丙二醛(MDA)和总抗(TAC)水平检测,根据分娩后是否发生子宫脱垂分为子宫脱垂组(M)和健康对照组(UM),并分析血浆中钙、磷及氧化/抗氧化水平与奶水牛子宫脱垂发生的关系。[结果]M组奶水牛产前1周和分娩当天的血浆钙、磷含量和氧化/抗氧化水平显著低于UM组。M组奶水牛TAC水平从产前3周到分娩当天均显著低于UM组,而MDA水平显著高于UM组。[结论]奶水牛产后子宫脱垂的发生与产前体内钙、磷水平不足和总抗氧化能力下降、过氧化产物积聚有关。

兽医内科学双语教学课程调查问卷的启示

双语教学是我国高等教育的要求,也是当前高校教育改革的热点和重点。文章以广西大学《兽医内科学》双语课程教学实践为研究点,通过问卷调查的形式了解同学们在双语教学存在的问题和提出的建议,从而为今后进一步更好地实施双语教学奠定基础。

酮病复方制剂的应用效果研究

为了解酮病复方制剂(KTP)对荷斯坦奶牛酮病的治疗效果,本研究经临床和实验室检查筛选,选取广西某牛场16头荷斯坦奶牛,酮病组奶牛8头,临床健康奶牛8头作为对照组,按照治疗方案,对酮病奶牛每天灌服400mL KTP治疗,连续5天,对照牛不做处理。结果表明,在治疗前,酮病组血酮含量极显著高于对照组,血糖含量极显著低于对照组(p<0.01),酮病组的血酮含量在治疗后极显著低于治疗前,血糖含量极显著高于治疗前(p<0.01)。治疗后两组牛血糖、血酮差异不显著(p>0.05),KTP对奶牛酮病具有显著的治疗效果。

酮病复方制剂对奶牛酮病抗氧化性能的影响研究

[目的]研发治疗奶牛酮病的新方法、新药物,从抗氧化性能方面揭示广西大学动物科学技术学院临床实验室自主研发的酮病治疗复方制剂——"酮康"对奶牛酮病的疗效。[方法]2013年6月,采用改良水杨醛比色法检测广西南宁某规模化奶牛场围产期奶牛46头,其中9头为酮病牛,并将其分为治疗组(6头)和阳性对照组(3头),另从37头中选取6头与治疗组奶牛体况相似、胎次相近、产奶量接近的奶牛作为健康对照组。试验期间,治疗组每天灌服"酮康"400 ml,连续治疗5 d,阳性对照组、健康对照组均不灌服。分别采血检测试验前后奶牛各抗氧化酶活性(CAT、GPX、MDA、SOD、TAC、VE)。[结果]治疗后治疗组奶牛血酮含量明显降低,血糖明显上升,SOD和GPX的活性明显升高,差异极显著(P<0.01)。CAT活性明显低于对照组,差异显著(P<0.01)。MDA含量稍有下降,差异不显著(P>0.05),虽稍低于健康对照组和阳性对照组,但差异也不显著(P>0.05)。VE含量明显低于健康对照组,差异极显著(P<0.01),而对照组治疗后VE含量均比治疗前高。治疗组在治疗后TAC和CAT活性均低于阳性对照组,差异极显著(P<0.01)[结论]"酮康"对降低酮病奶牛的血酮含量、提高血糖含量和改善抗氧化性能的作用明显,效果良好。若不进行治疗和科学的饲养管理,酮病将持续伤害奶牛。

“新农科”背景下《兽医专业英语》教学改革与探索

《兽医专业英语》是农业高等院校动物医学专业本科教学的专业课,本文以天津农学院《兽医专业英语》课程教学改革为例,多角度分析了《兽医专业英语》教学过程中存在的不足之处。结合“新农科”建设背景,以“立德树人”为根本,以培育卓越兽医新才为目标,对该课程的教学方法和考核模式提出改革举措,以期为提高农林高校《兽医专业英语》课程的教学质量提供参考。

《兽医流行病学》课程思政元素有机融入改革与实践

立德树人是高校课程思政的根本任务和育人核心。农科课程思政的重要任务是培养服务乡村振兴,知农、爱农的社会主义现代化农业的建设者。本文通过探索《兽医流行病学》课程思政建设,分析该课程思政教育的现状和目的,结合兽医流行病学课程各部分教学内容,深入发掘思政教育元素,并提供课程思政实施的途径,旨在促进专业知识和思政教育的有机融合,为动物医学专业课程思政提供参考。

高pH值软包装竹笋罐头杀菌工艺的初探

通过对卧式杀菌锅进行热分布和1 kg高p H值竹笋软包装样品热穿透的试验,结果显示,杀菌锅温度分布不均匀,存在冷点;样品实际杀菌值F_0<F_安,杀菌效果偏低。对卧式杀菌锅蒸汽扩散管、水泵和样品本身特性进行了改造优化,最终选定杀菌锅在21 min内升至(117±1)℃,在此温度下,保持恒温39 min,恒温结束后在15 min内冷却至室温,并经过温度验证,其杀菌F0值均达要求,可以作为该产品的杀菌公式。