基于CRISPR/Cas13a系统建立大口黑鲈弹状病毒检测方法

为了建立一种灵敏度高、特异性强并且适合现场诊断的大口黑鲈弹状病毒(Micropterus salmoides rhabdovirus,MSRV)检测方法,研究基于CRISPR-Cas13a系统并结合多酶恒温核酸快速扩增(MIRA)技术建立了一种MSRV的检测方法。实验对MSRV序列进行多重序列比对分析后,针对MSRV衣壳蛋白(CP)基因的特异性区域设计两个靶点,并通过体外转录成特异性的crRNA,同时设计合成MIRA引物序列实现目标序列的等温扩增,最后结合Cas13a蛋白、crRNA、恒温扩增体系构建检测体系,并从高效crRNA的选择、反应温度、ssRNA报告探针浓度和Cas13a与crRNA的浓度比四个方面优化了反应体系,并采用最优检测体系对大口黑鲈样本进行检测验证。结果显示,在20μL检测体系中加入200 nmol/L Cas13a、100 nmol/L crRNA1、100 nmol/L crRNA2及500 nmol/L ssRNA报告探针,在37℃的情况下能够获得最佳的检测效果。并且该检测体系可以检测到102 fM的MSRV病毒,具有良好的特异性和灵敏性,此外检测结果可直接通过紫外灯照射直接观察。研究基于CRISPR/Cas13a系统结合等温扩增MIRA技术建立的MSRV检测方法,可在室温下且不需要昂贵的仪器进行MSRV病毒检测,检测结果可以肉眼直接观察,能在多种场合下使用,研究结果为检测MSRV提供了有效方法。

含酰胺基Gemini阳离子表面活性剂的合成

Gemini型表面活性剂分子是由2条疏水链、2个亲水基和1个间隔基组成,间隔基在靠近极性基团的部位将2个疏水基连接起来[1].亲水基可以是阴离子型（如磺酸、羧酸基等）,也可以是阳离子型（如季铵盐等）.

盲人模拟体验对新护士情操教育的影响

介绍了盲人模拟体验对新护士情操教育的影响,选择分配到医院的新护士60名,运用盲人模拟体验进行教学,通过小组讨论、发放问卷调查等方式,有助于强化新护士情操教育,让其真正体会患者的疾苦,充分理解人文关怀的内涵,促进新护士从课本知识向人性化服务的转化。

县级区域教育政策存在的问题与建议

县级区域教育政策是指县级教育行政部门依据国家教育政策并结合当地实际所制定的教育政策,县级区域教育政策在制定与执行中存在系列问题,要解决这些问题,必须完善区域教育系统、整合原有的组织机构、加大培训力度,提高教育行政机关的政策水平。

腹腔镜术后遗漏腹腔内肿瘤3例教训分析

本文报道腹腔镜胆囊切除术后遗漏的3例腹腔内恶性肿瘤,指出对上腹不适患者,尤其老年患者警惕消化道恶性肿瘤的可能性,应做必要术前检查。

序贯性健康教育在胃癌手术治疗中的应用

目的:通过序贯性健康教育为胃癌患者创造安全的围手术期环境。方法:采用面对面口授及发放书面资料形式,对209例胃癌患者分入院时、入院第2天、术前等5个时段进行健康教育。结果:患者掌握了围手术期知识并能积极配合,平均住院13.5d,在院无死亡病例,均康复出院。结论:序贯性健康教育能保证手术的顺利进行,减少了术后并发症。

课堂引入何拒流行文化

前苏联著名教育家苏霍姆林斯基认为：“控制注意力的问题。是教师工作中最精细的而且是研究得还很不充分的领域之一。”本文就笔者多次参加的会教比赛和观摩活动中设计的引入为例，谈流行文化应用于课堂引入中所起到的意想不到的效果。

新时期高校图书馆服务理念探讨

高校图书馆是大学生获取知识、积累知识、接受文化熏陶的第二课堂,从传统意义上说,图书馆文明、高效的工作和服务是读者及时获取信息资源的重要保证。

浅谈网络信息技术在高校图书馆中的应用

本文从网络信息技术在现代图书馆建设中的重要地位和关于加快图书馆信息化建设的几点思考出发,探讨了关于图书馆信息网络化建设的问题。

一种可取的用工形式——平顶山矿务局农民包工队情况的调查

1984年6月中下旬,我们对平顶山矿务局农民包工队(以下简称包工队)进行了调查。调查结果表明:包工队是一种适合煤矿特点的可取的用工形式,是可以在煤矿企业中大量推广的。一、基本情况 1973年,平顶山矿务局由于生产发展较快,感到劳动力不足,但又没有招工指标,因此,开始试用包工队。到1983年。

音乐——启迪智慧的金钥匙

开发学生的思考能力,使他们具有丰富的音乐的印象,对于培养他们对音乐印象的发散变换的能力具有重要意义。因此,在教学中设法激发学生听赏音乐的兴趣,激励学生对所听音乐发表独立的感受与见解,通过多种形式引导学生积极参与音乐体验,为学生树立终生学习和享受音乐的目标奠定基础是音乐教学的使命。

水胶体敷料在CVC穿刺部位的应用

目的探讨水胶体敷料在CVC穿刺部位的应用效果。方法选取行颈内静脉置入CVC患者160例,80例行颈内静脉置入CVC患者的穿刺部位采用水胶体敷料(研究组),选择同期行颈内静脉置入CVC患者80例穿刺部位采用优韧宁敷料(对照组),比较2组导管静脉炎、穿刺部位皮肤情况、异物感和疼痛情况。结果研究组导管静脉炎、穿刺部位的皮肤情况、异物感和疼痛情况与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论水胶体敷料贴膜明显优于传统优韧宁贴膜方式。

张连三办矿采访记

五月中旬,我们来到河南省煤乡——禹县,了解当地群众办矿的情况。县煤炭局负责同志热情向我们介绍了农民张连三退休后帮助乡村办矿的苦乐,我们特意采访了他本人。在一个风和日丽的上午,我们和县煤炭局的同志一起来到鸠山乡官庄大队官庄一队。这个队地处山沟,交通不便,经济落后。