漆树酸抑制组蛋白H3K9乙酰化对高果糖诱导大鼠主动脉平滑肌细胞表型转化的影响

目的 研究漆树酸抑制组蛋白H3K9乙酰化修饰对高果糖诱导血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响及其可能的机制。方法 组织块贴壁法培养SD大鼠主动脉VSMC,细胞计数试剂(CCK-8)法检测果糖对VSMC增殖的影响,确定果糖干预浓度,进一步检测不同浓度漆树酸对高果糖致VSMC增殖的影响,确定漆树酸干预浓度。采用Western-blot、免疫荧光等实验方法探究漆树酸抑制组蛋白H3K9乙酰化修饰对高果糖诱导VSMC表型转化标志蛋白和核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响。结果 果糖浓度在5~30 mmol/L干预48、72 h可促进VSMC增殖(P<0.05),其中浓度为10 mmol/L作用72 h可显著促进VSMC增殖;漆树酸以浓度依赖的方式抑制高果糖诱导的VSMC增殖。Spearman相关分析显示漆树酸浓度与细胞抑制率呈正相关(r_(s)=0.98,P<0.05),其半数抑制浓度(IC_(50))为65.34(95%CI 60.60~70.45)μmol/L。高果糖致使VSMC的收缩表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α(SM22α)、调宁蛋白(Calponin)表达减少(P<0.05),Ⅰ型胶原(ColⅠ)、纤维连接蛋白(FN)、合成表型标志蛋白骨桥蛋白(OPN)、组蛋白乙酰转移酶P300/CBP相关因子(PCAF)、组蛋白H3第9位赖氨酸乙酰化蛋白(H3K9ac)、p-NF-κBp65、NLRP3表达增加(P<0.05)。漆树酸可使α-SMA、SM22α、Calponin表达增加(P<0.05),ColⅠ、FN、OPN、PCAF、H3K9ac、p-NF-κBp65、NLRP3表达减少(P<0.05)。结论 漆树酸抑制高果糖诱导大鼠主动脉VSMC收缩表型向合成表型转化,其机制可能与漆树酸抑制PCAF介导的H3K9乙酰化修饰和NF-κB/NLRP3表达有关。

血管紧张素转换酶2激动剂对醋酸去氧皮质酮-盐敏感性高血压大鼠血压及血压变异性的影响

目的探讨血管紧张素转换酶2(ACE2)特异性激动剂乙酰甘氨酸重氮氨苯脒(DIZE)对醋酸去氧皮质酮(DOCA)-盐敏感性高血压大鼠血压及血压变异性(BPV)的影响。方法36只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为Sham组(n=10),DOCA组[n=13,DOCA 50 mg/(kg·周),皮下注射2次/周],DIZE组[n=13,DOCA 50 mg/(kg·周),皮下注射2次/周+DIZE 15 mg/(kg·d),皮下注射1次/d]。采用Softron BP-98A无创血压仪测大鼠尾动脉血压,1次/周,共8周。以血压标准差、变异系数作为BPV的指标,分别计算短时BPV(重复测量3次之间的BPV)和长时BPV(0~1、0~2、0~3、0~4、0~5、0~6、0~7、0~8周的BPV)。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定各组大鼠血浆中血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]含量。结果与Sham组比较,DOCA组大鼠尾动脉收缩压、舒张压、平均动脉压均在实验第1周时升高,脉压于第3周一过性增高、于第5周再升高,持续至实验第8周(均P<0.05)。与Sham组比较,DOCA组大鼠长时收缩压变异性从第1周时开始增高[0~1周标准差:(7.26±3.14)比(3.81±2.37)mm Hg,变异系数:(6.21±2.74)%比(3.50±2.23)%,P<0.05],长时舒张压变异性于第4周开始增高[0~4周标准差:(19.44±7.05)比(10.66±2.59)mm Hg,变异系数:(18.72±6.06)%比(12.70±4.03)%,P<0.05],长时平均动脉压变异性从第2周时增高[0~2周标准差:(11.59±4.85)比(7.44±2.57)mm Hg,P<0.05],长时脉压变异性从第5周时升高[0~5周标准差:(11.41±2.29)比(9.25±1.88)mm Hg,P<0.05],持续至第8周。与DOCA组比较,DIZE组大鼠尾动脉收缩压于第2周降低,舒张压与平均动脉压在第4周时降低(P<0.05),长时收缩压变异性于第2周时降低,长时平均动脉压变异性于第4周时降低(均P<0.05),持续至第8周。各组大鼠短时BPV差异无统计学意义(P>0.05)。与Sham组相比,DOCA组大鼠血浆Ang(1-7)含量降低[(25.10±18.52)比(59.14±18.51)ng/L,P<0.05],与DOCA组相比,DIZE组大鼠血浆Ang(1-7)含量增加[(42.61±13.70)比(25.10±18.52)ng/L,P<0.05]。结论ACE2激动剂DIZE降低DOCA-盐敏感性高血压大鼠血压、长时收缩压变异性、长时平均动脉压变异性,且对收缩压及长时收缩压变异性的影响更早,这可能与ACE2激活、血浆Ang(1-7)水平升高有关。