ABO血型鉴定中人源抗体的应用与评价

目的评价ABO血型鉴定中单克隆定型试剂及人源抗-A/B在吸收放散试验中的应用。方法单克隆定型试剂及人源抗-A/B与标准A、B、O、AB 4种表型红细胞在4℃、室温、37℃条件下反应比较特异性;与A1/B细胞反应的效价、凝集时间及凝集强度评价亲和力;对29例正反定型不符的标本进行检测,评价单克隆定型试剂及人源抗-A/B在吸收放散试验中对弱抗原的检出能力。结果人源抗-A/B特异性及亲和力较低,单克隆定型试剂有交叉反应性,人源抗-A/B在吸收放散试验中可以检出大部分的弱抗原,且不存在交叉反应性。结论在ABO血型鉴定试验中,人源抗-A/B结合吸收放散试验可以作为鉴定ABO弱抗原的补充,血清学试验中选择合理的试剂及相应的方法学,才能得出准确结果,确保临床输血安全。

287例意外抗体致新生儿溶血病回顾性研究

目的 研究引起新生儿溶血病的意外抗体特异性分布情况及与临床的相关性,为临床准确诊治提供参考。方法 回顾性分析2012年1月~2022年8月送检至本实验室检测并证实的287例非ABO-HDN病例,鉴定致病意外抗体特异性;采用χ^(2)检验分析母亲既往输血史、妊娠史、意外抗体效价、患儿性别、是否合并ABO新生儿溶血病与是否换/输血治疗的相关性。结果 287例非ABO-HDN涉及6个血型系统的13种意外抗体,Rh-HDN占比为96.17%(276/287),其中抗-D-HDN为47.04%(135/287)。未合并ABO-HDN的非ABO-HDN需要换/输血治疗的比例明显高于合并组,P<0.05。意外抗体高效价组(>8)需要换/输血治疗的比例明显高于低效价组(≤8),P<0.05。而患儿的性别,母亲的既往输血史以及妊娠史与是否需要换/输血治疗(病情严重程度)之间,各组间无统计学差异。结论 了解非ABO-HDN意外抗体的特异性分布及其特性,各类因素与疾病的相关性及其临床意义,有利于及时对患儿采取必要的干预手段,减少并发症的危害。

1例骨髓增生异常综合征多次受血患者血清存在抗-M,抗-cE和抗-Jkb抗体的鉴定及配血输血策略

目的通过对临床送检的1例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)多次受血患者的抗筛阳性标本进行鉴定,探讨此类复杂不规则抗体的鉴定思路、方法及输血方案。方法鉴定标本ABO,Rh,MNS和Kidd等血型,应用2种谱细胞及筛选出的无偿献血者细胞配合吸收放散实验进行抗体筛查、复杂不规则抗体特异性鉴定,采用盐水法、凝聚胺法和间接抗球蛋白方法进行交叉配血。结果患者血型血清学结果为O,CCDee,M-N+和Jk(a+b-),其血清中检出Ig M-M,Ig G-c E和Ig G-Jk^(b)抗体,筛选M,c,E及Jkb抗原均为阴性的供血者与患者进行交叉配血,配血相合后进行输注。结论针对多次受血患者产生的复杂不规则抗体,应灵活运用灵敏度高的血清学方法,联合多种谱细胞,准确鉴定出抗体特异性,为临床提供相合的血液,有效保障输血的安全性。

陕西省稀有血型血液信息化供应平台的建立

目的 建立陕西省稀有血型血液信息化供应平台。方法 稀有血型信息化供应平台由标本接收、结果登记、供者档案和库存血液组成。首先在标本接收模块录入待检测血型的无偿献血者献血码,再登记无偿献血者每个血型系统抗原鉴定结果,保存后导入稀有血型信息化供应平台数据库。当收到非常见血型血液或稀有血型血液(缺失多个常规抗原或缺失某个高频抗原)申请时,在供者档案模块通过数据库查询相应抗原阴性的献血者及其血液状态(有无库存)并动态监测稀有血型血液库存状态。结果 建立的稀有血型血液信息化供应平台数据库中录入稀有Rh表型献血者5.060%(273/5 398),缺失多种常规抗原献血者1.540‰(51/33 010),缺失高频抗原的O型献血者病例共13例,其中Jk(a-b-)表型0.019‰(3/158 484),Di(a+b-)表型0.436‰(2/4 586),Fy(a-b+)表型4.030‰(8/1 983)保存于稀有血型实体库。结论 稀有血型血液信息化供应平台可解决临床上对稀有血型血液的迫切需求,保障输血安全。

IgG-Di^a抗体致新生儿溶血病1例

目的对1例由IgG-Di!a抗体引起的新生儿溶血病进行分析探讨。方法检测患儿及父母的ABO、Rh血型及Diego血型;对患儿进行新生儿溶血病三项实验,并检测患儿母亲血清与患儿红细胞是否反应;对患儿母亲血清及患儿红细胞放散液进行不规则抗体筛查和鉴定,同时测定不规则抗体的效价。结果患儿血型为O型C-c+D+E+e-、Di(a+),患儿母亲为O型C-c+D+E+e-、Di(a-),患儿父亲为O型C-c+D+E+e+、Di(a+);患儿新生儿溶血病检测直抗、游离、释放试验、患儿母亲血清与患儿红细胞反应均阳性,证实患儿患有新生儿溶血病;患儿母亲血清及患儿红细胞放散液中均检出IgG-Di!a抗体,患儿母亲血清中IgG-Di!a抗体效价为16。结论中国人群Di(a+)抗原的频率低,在选择对新生儿溶血病检测实验中所使用的ABO细胞、谱细胞以及不规则抗体筛查使用的筛查细胞时,应注意IgG-Di!a等低频抗体是否会存在漏检。

Diego血型基因分型方法的建立及西安地区多态性分布研究

目的建立降落PCR技术检测Diego血型基因的方法,并对西安地区献血者Diego血型基因多态性分布进行分析研究,同时建立Diego稀有血型库。方法建立了降落PCR检测Diego血型基因的方法,并采用抗-Dia和商品化基因分型试剂盒进行验证,以及基因测序做进一步确认。对西安地区1068名献血者提取基因组DNA,进行Diego血型基因分型。结果建立了检测Diego血型基因的降落PCR方法,用此方法共检测到Di(a+b-)1例,Di(a+b+)52例,Di(a-b+)1 015例,未检测到Di(a-b-)样本。献血者中Dia抗原的表达频率为0.049 63,Dib抗原的表达频率为0.999 06。结论本研究成功建立了降落PCR技术检测Diego血型基因的方法,并对西安地区献血者的Diego血型进行筛查和分析,获得其多态性分布数据。

不相容性输血的免疫控制策略

目的探讨建立解决临床上不相容性输血的免疫控制策略。方法血清学检测2名拟输血的患者(分别为丙肝肝硬化及妊娠期高血压患者)ABO、Rh、Kidd、Lewis、Duffy血型;同时对其做不规则抗体的筛查与鉴定;采用基因分型的方法检测患者稀有血型抗原;通过采取不同的免疫控制策略,即主动免疫控制(为患者提供配血试验相合以及抗原相同的血液)及被动免疫控制(提供最低不相合的血液),为患者选择合适的血液输注。结果患者1血型为O、RhC-c+D+E+e-、Jk(a-b+)、Le(a+b-)、Fy(a+b+),存在IgG抗-Ce、IgG抗-Jk^a;患者2为B、RhC+c+D+E-e+、Jk(a+b-)、Le(a+b-)、Fy(a+b+),基因分型Kp(a-b+),Lu(a-b+),Di(a-b+),Wr(a-b+),Yt(a+b-),Co(a+b-),Kn(a+b-),Do(a-b+),除了有IgM抗-E、IgG抗-E外,还存在特异性不明的抗高频抗原抗体;采取免疫控制策略制定不同的输血方案,取得了良好的输血治疗效果。结论当临床遇到交叉配血不相合但需紧急输血的患者时,采取不同的免疫控制措施后输注相应的血液,可以在提高输血疗效的同时降低输血不良反应的发生,达到及时、安全、有效的输血目标。

特殊自身抗体的鉴定及相关输血分析

目的探讨特殊自身抗体在临床疑难配血中的鉴定及输血策略。方法血清学检测2名患者ABO、Rh、Kidd、Lewis血型;同时对其进行不规则抗体的筛查与鉴定;对患者2的ABO基因启动子、外显子6、外显子7及FUT1基因序列进行扩增并测序;依最低不相合原则选择合适的血液交叉配血。结果患者1血型为B型C＋c-D＋E-e＋、Jk（a-b＋）、Le（a＋b-）,存在类IgG-C同种特异性自身抗体;患者2为AB型C＋c＋D＋E-e＋、Jk（a＋b-）、Le（a＋b-）,可能存在IgM-H抗体,基因分型为A102/B101,ABO基因启动子、外显子6、外显子7、FUT1基因的外显子4 DNA序列测定,均未发现突变位点。结论存在特殊自身抗体的患者在交叉配血选择血液时,选择ABO、Rh血型同患者的最低不相合血液,可以在提高输血疗效的同时降低输血不良反应的发生,达到及时、安全、有效的输血目标。

三种ABO血型定型试剂检测能力的评价

目的对3种厂家血型定型试剂在ABO血型鉴定中的检测能力进行评价。方法各厂家试剂与A、B、O、AB 4种血型表型红细胞在不同条件下反应评价抗A、抗B定型试剂的特异性;通过定型试剂与A1/B细胞的反应效价、凝集时间及凝集强度评价试剂的亲和力;3种厂家试剂同时对30例正反定型不符的标本进行检测,评价其对弱抗原的检出能力。结果特异性评价中,试剂2、3存在交叉反应性;3种试剂的亲合力实验结果符合相关标准要求;试剂2在吸收放散试验中的特异性较差但亲和力较高。对弱抗原的检出能力实验中,试剂3漏检较多,其次为试剂2,试剂1检出最多,显示试剂1对弱抗原的检出能力最强。结论3个厂家出品的ABO血型定型试剂各有优缺点,在日常血型鉴定试验中应在评价后,按照工作需要选择合适的厂家试剂作为常用定型试剂,确保血型的准确定型,保障临床输血的安全性。

两例D--个体的血清学鉴定和基因分析

目的分析研究2例D--表型患者的血清学和基因型的特征。方法采用盐水法鉴定2位患者的ABO、Rh血型;采用盐水法和抗球蛋白法对样本进行抗体筛查和抗体鉴定;测序分析样本的RHCE、RHD及RHAG的外显子序列。结果2位患者血型均为B型D--,抗体筛查阳性,血清中存在抗-Hro。患者1的RHCE基因型为RHCE-D(3-7)-CE,患者2的RHCE基因型为RHCE-D(3-8)-CE。结论2例D--表型形成的分子机制与RHCE基因和RHD基因之间的基因重组有关;D--表型易产生抗-Hro。

急性髓细胞白血病患者红细胞ABO血型抗原表达的研究

目的研究急性髓细胞白血病患者红细胞ABO血型抗原表达量变化的规律和原因,探讨在临床应用方面的可能性。方法采用RT-PCR方法检测急性髓细胞白血病患者和健康人ABO血型糖基转移酶基因mRNA的表达量,用流式细胞术检测和对比急性髓细胞白血病患者和健康人红细胞ABO血型抗原的相对量。结果RT-PCR方法检测结果显示,与健康人相比,急性髓细胞白血病患者的A/B血型糖基转移酶基因的mRNA表达量明显降低;流式细胞术结果显示,急性髓细胞白血病患者红细胞表面A/B抗原数量也明显下降,而H抗原的数量没有明显的变化。

B新等位基因c.737A>G突变与B抗原弱表达的研究——附1例报告

目的 对检测中遇到的1例ABO正反定型不符的献血者标本进行血清学和分子生物学鉴定并对其机制进行分析。方法 采用常规血型血清学检测以确定其血型;测定血浆B糖基转移酶活性;采用试剂盒PCR-SSP、PCR扩增直接测序和克隆测序分析其基因型。结果 血清学结果为B弱,存在抗-B(IgM);PCR-SSP结果为O1vB;直接测序和克隆测序结果为ABO~*B.01(c.737A>G)/O.01.02。结论 ABO~*B.01等位基因新增c.737A>G突变引起编码的氨基酸发生改变,从而使B糖基转移酶活性减弱,最终导致B抗原的弱表达。

凝聚胺漏检抗-Le^a致溶血性输血反应1例

Lewis血型抗体以IgM型抗体为主，且多数Lewis抗体在37℃无活性，因此在临床上不能引起足够重视，我们就最近遇到的1例凝聚胺漏检IgG型Lea抗体致严重溶血性输血反应的案例予以报道。

弱D15型D抗原同种免疫的分析研究

目的对弱D15型标本产生抗-D的原因进行探讨。方法对产生抗-D的Rh阴性标本鉴定其RHD合子型,对发现的弱D15型进行RHD基因10个外显子的测序;应用11种单克隆抗体通过流式细胞术进行弱D15型标本D抗原表位测定。结果 2例弱D15型标本,合子型显示为弱D15/d杂合,基因测序显示除了第6外显子存在845位碱基G>A的突变外,未发现其它突变;对其红细胞的D抗原表位分析显示存在抗原表位缺失。结论弱D15型存在抗原表位缺失,对D抗原会发生同种免疫,提示RhD抗原性的改变可能与空间结构改变有关。

2493例RhD阴性献血者的基因分析及4个新RHD等位基因的鉴定

目的研究中国汉族人群RHD等位基因多态性和分子机制。方法2008年1月-2011年9月，对2493例初筛为RH阴性的无偿献血者，采用单克隆抗体鉴定RhD／C／c／E／＇e抗原，D抗原鉴定同时采用间接抗球蛋白法；采用PCR·SSP方法测出d／d、D／d、DEL／d型，再用商用RHD基因检测试剂盒鉴定D／d型的样本中的弱D—15、RHD．CE（2-9）-D、DVI-Ⅲ和Dva型；对于排除前述基因型的样本，对其RHD基因10个外显子序列进行测序比对分析。结果2493例中，有1686名为R／／D基因完全缺失（0／O），占67．6％，其它808名检出有RHD基因：其中20．7％（516／2493）为DEL型（RHD1227G〉A／a），RHD—CE（2-9）-D／d为最常见的融合基因型，占6．5％（163／2493），其次为DⅥ·nl（RHD—CE（3-6）-D／d），占1．2％（31／2493），弱D15型为常见的弱D型，共检出62例（2．5％）；发现的4个新等位基因，分别是RHO78delC／d、RHD520G〉A＋1080dellO／dRHD、438G〉C／d和RHD101A〉G／d。结论汉族人群RHD等位基因多态性与高加索人群存在差异，有丰富的类型和不同分子机制。

献血者含不规则抗体血液的处置及临床应用研究

目的探讨将含不规则抗体血液制备成洗涤红细胞或者冰冻解冻去甘油红细胞(以下简称冰冻红细胞)使用的可行性,为制定献血者含不规则抗体血液处置原则、节约血液资源、减少血液浪费提供依据。方法献血者血液检出不规则抗体时,确定其类型、效价,将血浆报废,对应的悬浮红细胞按照标准化洗涤方案制备处置,观察不同效价、类型抗体血液的洗涤效果,并追踪临床应用情况。结果 2017年5月~2019年7月,本中心共筛查出45例含不规则抗体血液,经制备处置后,总体合格率为91.1%。IgM类合格率100%(25/25);IgG类合格率80.0%(16/20),其中不合格的4例均为IgG-D,效价在8~16,加洗1~2次后均符合要求。其中23例应用于临床,未发生输血反应。结论含不规则抗体的血液经制备处置后应用于临床是可行的,可大大节约血液资源;不规则抗体为IgG-D且效价较高时,应增加洗涤次数或洗涤后留样检测,无残留抗体时,方能发往临床。

RHAG 236G>A突变致Rh_(mod)的分子背景研究及家系调查

目的对1例Rhmod标本,进行血清学方法和基因分析及家系调查,研究其相关分子机制和遗传方式。方法血清学方法鉴定标本的ABO血型和Rh C/c/E/e抗原。鉴定RHD基因的合子型和扩增RHD和RHAG 10个外显子并测序。对先证者的亲属进行家系调查。结果先证者为AB型,Rh血型为D-c-E-,C、e弱阳性。先证者RHD合子型为D/D型,先证者RHD外显子测序结果未发现有碱基的突变,在先证者的RHAG等位基因上发现236G>A的杂和突变。家系调查显示在先证者哥哥的RHAG等位基因上也存在236G>A的杂和突变。结论本研究中发现的Rhmod标本是由RHAG基因236G>A导致,能够稳定遗传突变。

IgG-Jk^a联合IgG-cE、IgG-Fy^b抗体鉴定及输血策略分析

目的鉴定1例有复杂不规则抗体的标本,并探讨鉴定此类复杂不规则抗体的思路和方法及输血方案。方法对标本鉴定ABO、Rh、Duffy和Kidd等血型,采用盐水方法和间接抗球蛋白方法进行抗体筛选及鉴定抗体类型,采用盐水法、凝聚胺法和间接抗球蛋白方法进行交叉配血。结果患者血型血清学结果为O,CCDee,Jk(a±b+), Fy(a+b-);基因型结果为Jk(a-b+)和Fy(a+b-)。抗体鉴定结合交叉配血试验共检出血清中存在IgG-c、IgG-E、IgG-Fyb、IgG-Jk^a抗体,筛选以上4种抗原均为阴性的供血者与患者进行交叉配血相合后输注。结论对于复杂不规则抗体的鉴定,应当明确鉴定的思路,将多种实验技术和方法进行组合和分析,有效提高实验室解决疑难问题的能力,为临床提供相合血液,保障输血安全。

O新等位基因与B抗原弱表达的研究

目的对检测中遇到的1例ABO正反定型不符的献血者标本进行血清学和分子生物学鉴定并对其机制进行分析。方法常规血清学检测;PCR扩增直接测序和克隆测序分析其单体型。结果血清学结果为B弱;直接测序和克隆测序结果为O01/O05,O01 IVS6-25 A>G突变。结论第一次证实了O等位基因血清学可以表现为B型,对其机制仍需深入研究。

输血患者Diego血型不规则抗体的检测及临床分析

目的探讨临床输血患者中Diego血型不规则抗体产生的阳性率及分布特征。方法采用柱凝集法对本省68 918例临床申请输血的患者筛查不规则抗体;对409例初筛阳性患者采用试管低离子盐溶液-抗球蛋白试验(LISS-IAT)法进行不规则抗体种类及特异性的鉴定;对19例Diego血型不规则抗体阳性的患者采用试管法进行ABO、Rh以及Diego血型鉴定。结果 19例Diego血型不规则抗体中,女性患者13例(68.42%),男性患者6例(31.58%);所检出的抗体均为IgG-Di^a抗体,占所有不规则抗体阳性患者的4.65%,阳性率为0.03%。疾病分类:肝胆系统疾病6例(31.58%),妇产科疾病6例(31.58%),血液系统疾病5例(26.32%),肾脏系统疾病1例(5.26%),心血管系统疾病1例(5.26%);ABO血型中,A型8例(42.11%)、B型5例(26.32%)、O型4例(21.05%)、AB型2例(10.52%);Rh血型系统中,DCCee 7例(36.84%)、DCcEe 5例(26.32%)、DCcee 4例(21.05%)、DccEE 3例(15.79%)。结论对临床申请输血的患者(尤其是妇产科患者)进行不规则抗体的筛查以及抗体特异性的鉴定,可有效预防新生儿溶血病的发生以及减少输血不良反应。