国产PD-1抑制剂在妇科肿瘤中的研究现状

妇科肿瘤是威胁女性生命的恶性疾病,其中最常见的是宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌,其发病率逐年上升。妇科肿瘤治疗的基础是手术、放疗和化疗的联合治疗,但综合治疗后仍有患者因耐药或复发而死亡。目前PD-1/PD-L1免疫抑制剂应用于妇科恶性肿瘤已初见成效,有望成为未来最有潜力攻克妇科恶性肿瘤的药物。本文主要对当前国产PD-1免疫治疗在妇科肿瘤中的临床研究结果作一综述,以期概括国内妇科肿瘤免疫治疗思路,寻找合适的免疫治疗策略,延长晚期患者的生存期。

靶向EBV阳性鼻咽癌小环质粒的构建及表达

目的构建表达人IFNγ的靶向小环质粒及其对照质粒,并观察其在EBV阳性鼻咽癌细胞中的靶向表达。方法采用分子克隆的方法构建中间靶向质粒p SP72-ori P-IFNγ-poly A(p SP72-ori P-IFNγ)和对照质粒p SP72-CMV-IFNγ-poly A(p SP72-CMV-IFNγ)。对其分别做双酶切,定向克隆于母环质粒p2ФC31中,构建成p2ФC31-ori P–IFNγ和p2ФC31-CMV-IFNγ质粒。转化TOP10细菌后,通过介导分子内重组,降解原核骨架,获取只含目的基因表达盒的靶向小环质粒mc-ori P-IFNγ和对照质粒mc-CMV-IFNγ。将小环质粒分别转染EBV阴性细胞和EBV阳性细胞,采用ELISA方法定量检测小环质粒介导目的基因的靶向表达。结果构建了靶向性母环质粒p2ФC31-ori P–IFNγ及其对照质粒p2ФC31-CMVIFNγ,并诱导纯化出相应的靶向性小环质粒mc-ori P-IFNγ及其对照质粒mc-CMV-IFNγ,通过转染真核细胞,检测出靶向性小环质粒能够介导IFNγ在EBV阳性鼻咽癌细胞中特异表达。结论成功构建了靶向性小环质粒mc-ori P-IFNγ,并证明其能够特异性地介导目的基因在EBV阳性鼻咽癌细胞中表达,而在EBV阴性鼻咽癌细胞及正常细胞中不表达。

TPF诱导化疗或PF诱导化疗联合同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床观察

背景与目的:TPF(多西他赛+顺铂+氟尿嘧啶)诱导化疗加同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效尚不清楚。该研究旨在比较TPF诱导化疗或PF(顺铂+氟尿嘧啶)诱导化疗联合同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效和耐受性。方法:将局部晚期鼻咽癌患者随机分为两组。TPF组116例接受TPF诱导化疗(多西他赛60 mg/m^2,第1天+顺铂60 mg/m^2,第1天+氟尿嘧啶750 mg/m^2,持续静脉滴注120 h),每3周重复,共3个疗程。PF组116例接受PF诱导化疗(顺铂80 mg/m^2,第1天+氟尿嘧啶750 mg/m^2,持续静脉滴注120 h),每3周重复,共3个疗程。诱导化疗结束后行同期放化疗,放疗采用调强适形放疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT)技术,大体肿瘤靶区(gross tumor volume,GTV)6 810 c Gy/30次,5次/周,共6周,同期化疗用顺铂80 mg/m^2,第1、22天。评价完全缓解(complete response,CR)、部分缓解(partial response,PR)和有效缓解率(response rate,RR),RR=CR+PR。评价两组患者的近期疗效及不良反应,并随访比较5年无进展生存(progression-free survival,PFS)和5年总生存(overall survival,OS)。结果:诱导化疗结束后和治疗结束后13周TPF组的有效缓解率都高于PF组,两组差异有统计学意义(P=0.001,P=0.002);TPF组中位复发时间为2.98年,5年的PFS为84.48%,PF组中位复发时间为2.32年,5年的PFS为82.75%,差异无统计学意义(P=0.458);TPF组5年的OS为87.06%,PF组5年的OS为85.34%,差异无统计学意义(P=0.274)。TPF组在中性粒细胞下降、血小板下降、肝功能和肾功能损伤、腹泻以及黏膜坏死的发生上均明显高于PF组,差异有统计学意义(P<0.001),TPF组发生Ⅲ度和Ⅳ度不良反应较PF组明显增高,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:TPF方案诱导化疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床疗效并不优于PF方案诱导化疗治疗局部晚期鼻咽癌,且TPF方案诱导化疗的不良反应较PF方案明显,临床上不适合推广。

用于基因传输及磁共振显像的聚乙烯亚胺-g-聚己内酯共聚物的合成与表征

采用可生物降解的聚己内酯改性聚乙烯亚胺,得到两亲性的接枝共聚物(PEI-g-PCL).该共聚物通过溶剂挥发法在水中自组装形成纳米粒子,其内部负载有超顺磁性四氧化三铁纳米粒子(SPIO)及质粒DNA(pDNA).研究表明,PEI-g-PCL聚合物自组装形成的颗粒为胶束状,无论是否负载SPIO纳米粒子都可以有效地负载pDNA,并对293细胞具有较高的转染效率.此类载体有望在基因转染的过程中利用磁共振手段进行实时、无创观测.

生血宝合剂治疗癌因性疲乏的临床研究

目的评价生血宝合剂治疗癌因性疲乏的临床疗效。方法将60例患者随机分为观察组30例和对照组30例。两组相同病种肿瘤采用相同的化疗方案,观察组在化疗后给予生血宝合剂治疗。观察两组患者治疗前后疲乏状况、化疗毒副反应和生活质量的变化情况。结果两组疲乏状况比较,观察组疲乏状况有明显改善,对照组无变化,观察组优于对照组(P<0.05)。两组毒副反应比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组生活质量的比较,观察组的KPS评分与对照组相比有显著改善(P<0.05)。结论生血宝合剂具有提高机体免疫能力,改善患者全身症状及疲乏状况,提高生存质量。

基因治疗的进展与临床应用

在过去的40多年间.基因治疗已从临床前试验研究过渡到了临床试验阶段.并应用于多种疾病治疗中.从单基因隐性遗传的血友病到与多因素相关的疾病如癌症、心血管疾病以及人类免疫缺陷病。迄今为止.在近30个国家范围内.包括已经完成或正在进行或已经获得批准在内的基因治疗临床试验超过了1650项。在这些临床试验中.绝大多数是用于肿瘤的治疗。从20世纪60年代初提出基因治疗的理论到90年代初第一例基因治疗临床试验的开展再到当前基因治疗的广泛应用.可以说基因治疗经历了一个曲折的过程。尽管这个领域至今为止还没有成熟.但是基因治疗仍然有潜力能够为肿瘤患者减轻病痛。本文主要从基因治疗的策略和载体系统的研究两大方面对该领域的进展简单综述。

氯硝柳胺对肺癌细胞株顺铂敏感性的影响

目的研究氯硝柳胺对肺癌细胞株顺铂敏感性的影响。方法氯硝柳胺和(或)顺铂处理人肺癌细胞株A549及顺铂耐药细胞株A549/DDP,用CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡变化。结果氯硝柳胺呈剂量依赖性抑制A549、A549/DDP细胞增殖,24 h IC50分别为(2.607±0.06)、(1.135±0.09)μmol/L。氯硝柳胺联合顺铂明显增加A549/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率(P<0.05)。结论氯硝柳胺可抑制肺癌细胞生长和增加顺铂耐药细胞的敏感性。

人卵巢癌组织中BRCA1、PRP13、TUBB3及ERCC1基因表达及其与化疗耐药的关系

目的分析乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)、富脯氨酸多肽(proline-rich polypeptide 13,PRP13)、β-微管蛋白Ⅲ型(classⅢbeta-tubulin,TUBB3)及核苷酸切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementation 1,ERCC1)在人卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌化疗耐药的关系。方法选取80例卵巢上皮癌组织,其中23例原发性卵巢上皮癌组织,57例复发性卵巢上皮癌组织。57例复发性卵巢上皮癌患者中32例初次复发为铂类敏感型复发,25例为铂类耐药型复发。采用荧光定量PCR技术检测所有癌组织标本中BRCA1、PRP13、TUBB3及ERCC1基因的表达水平,并根据结果分析卵巢癌化疗耐药机制。结果原发性和复发性卵巢上皮癌组织间BRCA1、PRP13、TUBB3及ERCC1耐药基因相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。敏感型与耐药型复发性卵巢上皮癌患者组织中BRCA1和ERCC1相对表达量比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05),PRP13和TUBB3的表达水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 BRCA1、PRP13、TUBB3及ERCC1基因在原发性和复发性人卵巢癌组织中的表达水平差异不大,但BRCA1和ERCC1的表达水平与复发性卵巢上皮癌患者耐药性产生相关。

艾迪注射液治疗妇科恶性肿瘤化疗患者抑郁的临床效果

目的:探讨妇科恶性肿瘤患者抑郁状况及化疗对患者抑郁、生活质量的影响,观察艾迪注射液治疗妇科恶性肿瘤化疗患者抑郁的临床效果。方法:60例纳入研究的妇科恶性肿瘤患者随机分为治疗组和对照组,两组均进行化疗,治疗组在化疗期间加用艾迪注射液治疗,化疗前后采用抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)和欧洲癌症和治疗组织编制的肿瘤生存质量调查表(European organization for research and treatment of cancer,EORTC)的核心量表(QLQ-C30)进行抑郁和生活质量的评价。结果:化疗前,妇科恶性肿瘤患者抑郁的发生率为71.7%,SDS评分与病理类型和肿瘤的分期有关。治疗组和对照组患者抑郁程度、抑郁发生率和SDS评分无显著差异。化疗后,治疗组患者抑郁发生率和SDS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组的抑郁发生率和SDS评分均较治疗前降低,对照组抑郁发生率和SDS评分均较治疗前增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。化疗前,治疗组和对照组患者的EORTC QLQ-C30评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。化疗后,治疗组的躯体功能、角色功能、总健康状况、疲乏、失眠和食欲减退较前改善,优于同期的对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:艾迪注射液可改善妇科恶性肿瘤化疗患者的抑郁状态和生活质量。

基于TCGA数据库建立胆管癌自噬相关基因预后预测模型及其应用

目的利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库构建胆管癌自噬相关基因(ARGs)预后预测模型。方法通过人类自噬数据库和分子特征数据库获得531个胆管癌ARGs。从TCGA数据库中选择CHOL队列的转录组和临床数据进行下载,包含胆管癌组织36例、正常胆管组织9例。采用Perl软件将原始测序数据进行合并,提取所有ARGs的表达数据;利用R软件对胆管癌组织和正常胆管组织中的ARGs进行差异表达分析,筛选出胆管癌组织中表达失调的ARGs,并进行GO功能富集和KEGG信号通路分析。利用单因素Cox及Lasso回归模型筛选关键ARGs,多因素Cox回归模型建立预后预测模型,根据关键ARGs的mRNA表达水平和风险系数计算每个患者的风险评分,按其中位数将胆管癌患者分为高风险组和低风险组,绘制生存曲线,比较两组的生存期。绘制预后预测模型的ROC曲线,评价其预测预后的敏感度和特异性。最后利用R软件构建基于关键ARGs的列线图,绘制校准曲线评估实际生存和预测生存的一致性。结果与正常胆管组织比较,胆管癌组织中有324个表达失调的ARGs。这些ARGs主要涉及自噬、利用自噬机制的过程、大自噬、自噬的调节、凋亡等生物学过程和信号通路。经过单因素Cox和Lasso回归分析,筛选出5个关键ARGs,即VPS11、EVA1A、BNIP3、GABARAP、VPS4B。以这5个关键ARGs建立预测胆管癌患者预后的风险模型,风险评分=(-3.739×VPS11)+(1.691×EVA1A)+(1.734×BNIP3)+(5.776×GABARAP)+(-1.310×VPS4B)。生存分析显示,高风险组的总生存时间低于低风险组,预测1年、2年、3年生存率的ROC曲线下面积均大于0.9。构建了基于5个ARGs的列线图(C指数为0.822,95%CI为0.721~0.924),另外,绘制预测1年、2年、3年生存率的校准曲线几乎都落在了45°的对角线上,提示该模型的准确性和区分能力较好。结论成功构建了基于VPS11、EVA1A、BNIP3、GABARAP、VPS4B共5个关键ARGs表达的胆管癌预后风险预测模型,该模型可有效预测胆管癌患者的预后。

奈达铂、顺铂在局部晚期宫颈癌同步放化疗疗效及不良反应分析

目的探究奈达铂、顺铂在局部晚期宫颈癌患者同步放化疗治疗中的应用效果以及安全性。方法 98例局部晚期宫颈癌患者,均接受同步放化疗治疗。根据化疗药物不同分成奈达铂组(48例)和顺铂组(50例)。同期化疗:顺铂组患者于放疗第1天给予患者顺铂静脉滴注。奈达铂组于放疗第1天给予患者奈达铂静脉滴注。对比两组治疗效果及不良反应发生率。结果顺铂组治疗有效率为82.0%,奈达铂组治疗有效率为83.3%,两组患者治疗有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组放射性直肠炎发生率和肝肾功能异常发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);顺铂组胃肠道不适发生率(32.0%)明显高于奈达铂组(8.3%)(P<0.05);顺铂组白细胞减少、血小板减少和骨髓抑制发生率均低于奈达铂组(P<0.05)。结论局部晚期宫颈癌的同步放化疗治疗中顺铂和奈达铂均具有较好的疗效,安全性无明显区别,但奈达铂的胃肠道反应较少,有助于提高患者对同步放化疗的耐受性和依从性。

Amorphigenin联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞的协同抗肿瘤作用

背景与目的 Amorphigenin是从紫穗槐属植物的种子中分离提取的鱼藤酮类化合物,研究发现amorphigenin对多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用。本研究拟探讨amorphigenin对人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的抗肿瘤作用及其可能的分子机制。方法采用CCK-8法测定A549/DDP细胞的增殖;克隆形成实验测定A549/DDP细胞的克隆形成;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot技术检测caspase-3、PARP和LRP蛋白的表达。结果 Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞的增殖48 h[半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))]为(2.19±0.92)μmol/L、抑制克隆形成及诱导细胞凋亡。此外,Amorphigenin与顺铂联合可协同地抑制A549/DDP细胞生长和促进凋亡;降低耐药蛋白LRP蛋白的表达。结论 Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞增殖和促进细胞凋亡;amorphigenin可能是通过抑制耐药蛋白LRP蛋白表达,进而与顺铂对A549/DDP细胞产生协同抑制作用。

苦参碱对非小细胞肺癌的放射增敏作用

目的探讨苦参碱对非小细胞肺癌(NSCLC)放射增敏作用机制。方法人NSCLC细胞株H1299、A549分为对照组、苦参碱组、放疗组、苦参碱+放疗组,分别用CCK-8、流式细胞术、平板克隆形成、蛋白印迹检测细胞增殖、凋亡、放射增敏、γ-H2AX表达。结果 0.25~8 g/L苦参碱处理明显抑制NSCLC细胞存活(P<0.01)。苦参碱+放疗组中细胞凋亡、γ-H2AX蛋白表达明显高于苦参碱组、放疗组,而细胞克隆数明显降低(P<0.01或0.05);H1299和A549细胞的放射增敏比分别为1.22和2.02。结论苦参碱联合放疗可能通过增加NSCLC细胞DNA损伤、诱导细胞凋亡,进而发挥放射增敏作用。

宫颈癌术后调强放射治疗髂骨骨髓受照与血液学毒性关系

目的探讨宫颈癌术后调强放射治疗(IMRT)髂骨骨髓受照剂量、体积与血液学毒性的关系。方法此次研究选取宫颈癌患者76例,研究时间为2016年7月—2018年6月,均行IMRT治疗,治疗过程中检查血常规,并分级评估血小板计数、血红蛋白、中立性细胞绝对值、中白细胞最低值,合并分析血液毒性,采用回归模型对骨髓受照射剂量、体积与血液毒性之间的相关性。结果比对不同化疗周期的血液学毒性,周期为3-4个明显高于周期为1-2个,组间差异有统计学意义(P <0.05),表示统计学意义存在。血液学毒性的阳性发生率与V30、V40存在相关性(P <0.05)。结论宫颈癌患者术后行IMRT治疗时,髂骨骨髓V30、V40与血液学毒性阳性率存在相关性,合理限制有助于髂骨骨髓的功能保护作用,此外,化疗周期累加也为血液学毒性发作影响因素。

G蛋白信号通路调节蛋白5抑制肺癌细胞生长和增强X射线照射作用及其分子机制

目的 观察G蛋白信号通路调节蛋白5（RGS5）对人肺癌细胞的作用并探索其可能的分子机制.方法 采用MTT法检测过表达RGS5对人肺癌细胞系A549及Calu-3生长的影响;采用克隆形成法检测过表达RGS5及联合X射线照射对人肺癌细胞系A549及Calu-3的存活的影响;采用Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达.结果 过表达RGS5可显著地降低人肺癌细胞系A549及Calu-3的生长,pTriEX-RGS5组在受照后48和72 h时A549、Calu-3细胞的生长抑制率分别为44.4％（F=29.18,P＜0.05）和39.27％ （F =23.04,P＜0.05）、54.3％（F=103.45,P＜0.05）和44.7％（F=108.02,P＜0.05）.RGS5可诱导肺癌细胞的凋亡,对照组、pTRiEX组及pTRiEX-RGS5组处理36 h后,A549、Calu-3细胞的凋亡率分别为（1.3±0.2）％、（3.4±0.6）％、（19.6±2.3）％（F=86.62,P＜0.05）和（3.2±0.8）％、（3.0±0.9）％、（12.8±1.8）％ （F=28.80,P＜0.05）.此外,过表达RGS5与X射线照射联合,可以显著地增强抑制肺癌细胞的存活能力.结论 RGS5可显著地抑制人肺癌细胞的生长,并且过表达RGS5可增强X射线照射对肺癌细胞的杀伤作用.

色素上皮衍生因子通过诱导肺癌血管正常化增强照射作用实验研究

目的 观察色素上皮衍生因子（PEDF）对肺癌血管正常化的作用及PEDF与X射线照射不同联合模式对肺癌的抑制作用.方法 采用免疫荧光的方法观测PEDF对肺癌血管正常化的作用并确定其正常化时间窗.建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠移植瘤模型,采用区组法随机分成4组,分别给予对照、PEDF、照射和照射联合PEDF处理,观察不同处理对小鼠移植瘤生长的作用.结果 PEDF可降低肺癌移植瘤的血管密度、降低血管的基底膜厚度、增加血管的周细胞覆盖率及降低移植瘤的乏氧比例.PEDF治疗后的第3～7天,肿瘤乏氧细胞的比例较对照组下降,其中以第3天下降最明显达20.79％,而对照组为33.73％.PEDF诱导肺癌血管正常化的时间窗为第3～7天.肿瘤生长抑制实验发现在PEDF处理后的第5天给予照射可以取得比单纯照射组及在PEDF处理后的第1天给予照射组更强的抑瘤作用.结论 PEDF可促进肺癌血管正常化并增强照射的抗肺癌生长作用.