一种对抗植物病原真菌的工程化多结构域抗真菌多肽(英文)

真菌病原体已成为危害人类健康和农业的主要难题。作为一类真核细胞,真菌某些重要的生物特性与哺乳类动物的细胞雷同,以致现有的抗真菌抗生素往往不能区分真菌细胞和哺乳类动物细胞,导致严重的毒副作用。因此急需开发既有效、又安全的新型抗真菌药物。E1族大肠菌素是大肠杆菌产生的一种可形成离子通道的细菌素,它们只能杀伤大肠杆菌及亲缘关系接近的某些细菌。我们应用生物工程技术将白色念珠菌α交配信息素连接在大肠菌素Ia通道结构域上,即构成一种新型融合蛋白——信息菌素-CA(PMC-CA)。间接荧光标记数据显示该信息菌素可结合在真菌细胞上,实验室/田间实验数据证实信息菌素可抑制真菌生长。按分子量标化,田间实验数据证实信息菌素对稻瘟病的保护率显著高于三唑类、三环唑和稻瘟灵等现用抗稻瘟病药物的保护率。上述结果提示该融合蛋白具有发展成为农业抗真菌药物的价值。

抗破伤风杆菌信息菌素Ph-CT的构建及其抗菌活性的初步研究

目的构建和纯化抗破伤风杆菌信息菌素(Ph-CT),并初步检测其抗菌活性。方法从分泌针对破伤风杆菌表面抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增出抗体可变区基因序列,利用双联寡核苷酸点突变技术将抗体模拟物与大肠菌素Ia融合构建Ph-CT,经离子交换柱纯化后,通过菌落培养加入不同剂量信息菌素Ph-CT(终浓度2、4、8、16μg/mL),观察Ph-CT的体外抗菌活性。通过培养液中接种破伤风杆菌,并加入不同剂量的Ph-CT(终浓度4、16μg/mL),厌氧培养16h后取滤液及菌液行小鼠腹腔注射,观察Ph-CT的体内抗菌活性。结果成功构建抗破伤风杆菌Ph-CT。体外实验结果显示,涂布加入Ph-CT 2、4μg/mL孵育菌液的固体培养基上仍见破伤风菌落生长,而涂布加入Ph-CT 8、16μg/mL孵育菌液的培养基上均无菌落生长;体内实验结果显示,滤液和菌液组中对照组小鼠1d内均全部死亡,滤液组Ph-CT 4、16μg/mL组小鼠3d内全部存活,菌液组中Ph-CT 4μg/mL组小鼠3d内存活3只(50%),Ph-CT 16μg/mL组小鼠3d内全部存活。结论构建的Ph-CT在体内和体外都表现出对破伤风杆菌有抗菌活性,为临床治疗破伤风提供了新思路和新途径,具有应用于临床的潜在价值。