基于气津理论探讨黄芪增液汤治疗结肠慢传输型便秘作用机制

目的探讨黄芪增液汤治疗结肠慢传输型便秘(slow transit constation,STC)的作用机制。方法40只SD大鼠,分为空白组、模型组、中药组和西药组,除空白组,其余3组均建立便秘模型,模型组不用药物干预,中药组予以黄芪增液汤、西药组予以枸橼酸莫沙必利,连续治疗7 d后,通过腹主动脉采集各组大鼠血液,同时分离约8~10 mm的近端结肠备检。通过ELISA、RT-qPCR、WesternBlot等实验方法,提取P物质(Substance P,SP)、血管活性肠肽(VIP)、胃动素(MLT)、胃泌素(GAS)、蛋白激酶A(PKA)、水通道蛋白9(AQP9)等相关指标数据进行统计分析。结果模型组首次排便时间延长,造模第7 d,模型组粪便含水率较空白组低,差异具有统计学意义(P<0.01),说明造模成功。血清中的GAS、MTL和SP的含量,在模型组出现不同程度的下降,与空白组比较差异非常显著,说明便秘与非便秘大鼠体内存在相关因子的差异性。通过药物的干预,中药组与西药组均有不同程度上调,中药组与模型组、西药组比较具有显著性差异(P<0.01及P<0.05)。说明药物干预有效,且中药组较西药组更明显。RT-qPCR、WB实验结果表明,模型组大鼠结肠组织中PKA-α、PKA-β、AQP9mRNA、PKA、VIP、AQP9含量较空白组显著降低(P<0.01)。中药组、西药组分别与模型组比较,显示出不同程度的治疗效果,且有显著性差异(P<0.01和P<0.05),说明中药的治疗效果比西药更明显。结论黄芪增液汤可以通过上调SP、VIP、MLT、GAS等胃肠动力因子实现其益气助运作用,上调PKA、AQP9等因子实现其滋阴增液作用。

基于网络药理学探讨黄芪增液汤治疗慢传输型便秘的作用机制

目的基于网络药理学的方法探讨黄芪增液汤治疗慢传输型便秘(STC)的药效作用机制。方法利用中药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)数据库查询8味中药活性化学成分及相关靶点信息,Uniprot数据库使靶蛋白信息标准化,Cytoscape3.7.2软件构建中药-成分-靶点网络图,GeneCards数据库找到STC相关治疗靶点,Venny平台查找交集靶点,STRING数据库获得蛋白相互作用关系并进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析;应用DAVID数据库进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,通过R软件对富集结果进行生物功能的可视化分析。结果黄芪增液汤筛选得到60个活性化学成分,靶点蛋白846个,与STC相关靶点蛋白111个,构建核心网络2个;通过GO富集分析发现,P<0.01的共211条,黄芪增液汤治疗STC涉及的靶点通路包括RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、细胞质膜、蛋白结合等;KEGG富集分析结果发现83个富集条目,黄芪增液汤治疗STC的机制可能与癌症通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路、神经活性配体-受体相互作用、肿瘤坏死因子信号通路、丙型肝炎、环磷酸腺苷(cAMP)信号通路等相关通路条目有关。分子对接结果表明,3种核心化合物与STC相关靶点转录后基因沉默(PTGS)蛋白具有较好的结合活性。结论黄芪增液汤中有效活性成分3β-乙酰氧基苍术酮、β-谷甾醇、花生四烯酸、木犀草素等可能是通过cAMP、PI3K/AKT、肿瘤坏死因子等信号通路而发挥治疗STC的作用。

基于网络药理学研究风骨痛消方治疗类风湿关节炎的作用机制

目的基于网络药理学研究风骨痛消方治疗类风湿关节炎(RA)的潜在有效成分及体内作用机制,为后续相关研究提供参考。方法通过中药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)筛选风骨痛消方组方中6味中药的活性成分及相关靶点;采用GeneCards数据库检索相关的基因,并通过STRING11.0数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;于DAVID、Metascape平台进行基因本体论(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析;通过Cytoscape3.8.0构建并分析“药物-成分-靶点”网络图;以Discovery Studio软件进行分子对接。结果筛选出风骨痛消方41个活性成分、21个对应治疗靶点,分别涉及RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性、蛋白质同源二聚活性、前列腺素内过氧化物合酶活性等过程,以及钙信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路、核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(NF-κB)信号通路等通路。结论风骨痛消方通过多成分、多靶点、多通路协同作用发挥治疗RA的效果,且表现出很强的活性,为后续实验研究奠定了理论基础及方向。

倒卵叶五加多糖功能饮料配方的优化及其抗氧化活性

目的优化倒卵叶五加Acanathopanax obovatus Hoo多糖功能饮料配方,并评价其抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以感官(色泽、气味、组织状态、口感)评分为评价指标,多糖、柠檬酸、蜂蜜加入量为影响因素,响应面试验优化配方,再采用DPPH法测定抗氧化活性。结果最佳配方为倒卵叶五加多糖0.05%、蜂蜜6%、柠檬酸0.15%、苯甲酸钠0.1%,感官评分7.68。所得功能饮料色泽风味理想,组织状态均匀,透明度高,稳定性好,对DPPH自由基的清除率最高达36.80%。结论倒卵叶五加多糖功能饮料具有一定抗氧化活性,是值得开发的新型产品。

化香树果序多酚膜分离的动力学研究

本研究以化香树果序为原料药材,采用陶瓷膜分离设备结合乙醇回流法提取化香树果序多酚成分,提取温度77℃,溶剂浓度55%,液料比14 m L/g,提取次数为3次,提取率为3. 02%。通过考察样品浓度、膜孔径及压力,以透过率为指标,得到最大透过率为37. 2%,最佳分离条件为浓度1 g/L,压力0. 8 MPa,膜孔径300KD。在多酚超滤过程中,控制温度24℃,压力0. 8 MPa的情况下,其传质系数k为12. 93 mm/h;膜面平衡浓度Cg为1. 84 g/L;多酚超滤膜阻力Rm为0. 016 1(h·MPa)/mm;浓度极化阻力为0. 005 7·Δp;且多酚超滤膜通量(Jv)与超滤压差(Δp)服从:Jv=Δp/0. 016 1+0. 005 7;超滤膜面浓度(Cm)与Δp服从:Cm=Cbexp12. 93/1(Δp/0. 016 1+0. 033Δp)。结果表明采用陶瓷膜分离多酚成分,透过率高,且膜分离过程符合传质动力学方程,为后续试验工作提供了有效的理论依据。

响应面法优化水蒸气蒸馏提取羌活挥发油

目的:通过响应面优化羌活中α-蒎烯水蒸气蒸馏法的提取条件。方法:采用响应面Box-Behnken设计三因素水平的提取条件进行提取。气相色谱条件:检测器为FID,温度为300℃,进样量为1μL。结果:在浸泡时间80 min,提取时间7 h,液固体积比为10的条件下水蒸气蒸馏法的提取效果最好。结论:响应面设计的方法简便快捷,通过其设计的实验得到结果后处理可以得出科学的结论。

穿龙薯蓣皂苷纳米混悬剂含量测定及体外释放评价

目的：研究薯蓣皂苷纳米混悬剂体外释药规律及含量测定方法。方法：建立高效液相法测定薯蓣皂苷纳米混悬剂的含量,色谱柱为Angent-C18柱,流动相为乙腈-水溶液（55∶45,V∶V）,检测波长为203 nm,柱温为25℃,流速为1 m L/min。采用正、反向动态膜透析法进行体外释放度实验,并建立不同模型对薯蓣皂苷体外释放度进行拟合,揭示药物的体外释放特性规律。结果：薯蓣皂苷浓度在2.5~4720μg·m L^-1范围内呈良好的线性相关性（r=0.9991）,日内和日间RSD分别为0.15%和0.72%,平均回收率为102.63%。采用反向透析法测得的药物释放速率显著高于正向透析法（96.19%vs 61.03%）。且采用Zero-order kinetics、First-order kinetics、Higuchi及Peppas对结果进行拟合,原料药Raw、物理混合物PM在溶出介质中体外释药过程可用一级动力学方程来描述,r≥0.980;DioNS符合Higuchi模型,在Peppas方程中,其n值为0.3683〈0.45,说明Dio-NS的释放为Fick＇s扩散,其释放机制以扩散为主。结论：反相动态膜透析法评价Dio-NS的体外释放能较好的模拟人体内释放的情况,且制得的薯蓣皂苷纳米混悬剂符合Higuchi模型,其体外释放主要以扩散为主。

蒲公英炮制前后总黄酮含量差异研究

目的采用紫外分光光度计法测定蒲公英炮制前后总黄酮的含量的变化,为临床上采用蒲公英及蒲公英炭治疗胃炎、胃溃疡的效果提供科学依据。方法以乙醇浓度,超声时间,超声温度,超声功率为影响因素,设计正交试验L9(34)对蒲公英及蒲公英炭中的黄酮进行提取;用紫外分光光度计测定总黄酮含量并确定最优超声方法;并比较蒲公英及蒲公英炭的总黄酮含量。结果在提取溶剂为65%乙醇,超声功率为462 W,超声时间为35 min,超声温度为60Ⅰ的条件下,蒲公英与蒲公英炭提取率最高,分别为3.9%和2.9%;蒲公英及蒲公英炭中芦丁在0.017 2~0.062 7 mg/mL具有良好的线性关系,回归方程为C=0.091A-0.001,r=0.997 5;蒲公英供试品溶液与蒲公英炭供试品溶液的稳定性RSD分别为0.42%和0.60%;重复性RSD分别为0.85%和0.70%,精密度为1.04%,表明该工艺稳定可行,准确性高。结论蒲公英炮制后其总黄酮的含量明显小于蒲公英原药材,就总黄酮含量这一指标来说,临床上治疗胃炎、胃溃疡应优先考虑选用蒲公英原药材。

基于网络药理学的宣白清肺解毒汤治疗新型冠状病毒肺炎作用机制研究与初证

目的:基于网络药理学的方法探讨宣白清肺解毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的药效作用机制。方法:利用TCMSP数据库查询13味中药活性化合物及对应的靶标信息,通过Uniprot数据库得到关键靶点的基因名,采用Cytoscape 3.7.2软件构建化合物疾病靶点网络图,利用GeneCards数据库检索与COVID-19相关的基因,采用Venny平台筛选与COVID-19交集靶标,利用STRING数据库构建化合物靶点PPI网络图,通过DAVID数据库对靶点相关通路进行GO和KEGG富集分析,使用R软件对富集结果进行生物功能的可视化分析。结果:宣白清肺解毒汤共筛选出活性化学成分122种,靶标638个,筛选核心靶标35个;通过GO富集分析,获得P<0.01的生物学过程共138个,包括缺乏配体的外源性凋亡信号通路、药物反应、脂多糖介导信号通路等;KEGG富集分析共得到(P<0.01)的通路有35个,共8类,其中与疾病相关的条目有结核病、乙型肝炎、美洲锥虫病等;相关的通路有癌症通路、PI3K-Akt信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等条目。分子对接结果显示所含活性化合物与COVID-19相关靶标(ACE2)的结合能均小于-5 kJ/mol,结合活性较高。结论:该研究揭示了宣白清肺解毒汤治疗COVID-19潜在的活性化学成分及可能的药效作用机制。

基于网络药理学的杜仲-山茱萸配伍治疗糖尿病的作用机制

为探讨杜仲-山茱萸治疗糖尿病的作用机制。研究利用网络药理学的方法,首先通过中药系统药理学数据库筛选出杜仲和山茱萸的活性成分和相关靶点,再利用DisGeNET、DrugBank等数据库筛选出糖尿病的潜在靶点。以STRING数据库对活性靶点构建蛋白互作网络(PPI)分析,采用Cytoscape3.7.0软件绘制其“成分-靶点-通路”的相互作用网络,通过CludterProfiler对靶蛋白进行生物过程、细胞组分及分子功能分析;京都基因与基因组(KEGG)的代谢通路分析。实验结果筛选得到杜仲-山茱萸有效成分30个,其中槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇等成分对PTGS2、DPP4、ADRB2、PPARG等相关靶点通过IL-17信号通路、钙信号通路、脂肪细胞脂解的调控等参与氮化合物代谢过程、血液循环、脂肪细胞分化和血压调节等过程。综上,杜仲-山茱萸配伍治疗糖尿病存在多成分和多重药理作用机制,为进一步研究其治疗糖尿病药理实验提供了参考,也为其他中药的相关研究提供借鉴和参考。

穿山龙提取液不同纯化方法的比较

目的比较穿山龙提取液不同纯化方法。方法通过水提醇沉、大孔树脂(D101、AB-8)、陶瓷膜(0.2、0.8μm)对提取液进行分离纯化,测定理化常数(黏度、p H、电导率、浊度)和薯蓣皂苷含有量,并进行单因素方差分析。结果提取液经0.2μm陶瓷膜纯化后,黏度为1.39 c P、电导率为98μS/cm、浊度为0.85 NTU、薯蓣皂苷含有量为29.3 mg/m L,与水提醇沉、大孔树脂纯化后相比,黏度和浊度明显降低,电导率明显提高(P<0.05),薯蓣皂苷含有量也显著增加。结论 0.2μm陶瓷膜最适合纯化穿山龙提取液。

化香树果序没食子酸和鞣花酸含量测定及HPLC指纹图谱研究

目的采用HPLC方法同时测定化香树果序没食子酸和鞣花酸并对12批化香树果序药材进行指纹图谱研究。方法采用Acclaim TM 120A C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.3%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,进样量10μL,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版"对指纹图谱进行相似度评价。结果建立了化香树果序药材HPLC指纹图谱,所建立的化香树果序指纹图谱测定方法精密度、稳定性、重复性良好;通过12批样品指纹图谱的比较,确定了15个共有峰,指认了2个峰;样品中没食子酸和鞣花酸的含量较高,四川广元产地化香树果序没食子酸和鞣花酸含量最高。结论首次建立了化香树果序药材HPLC指纹图谱,为化香树果序药材的鉴定、含量测定、质量标准的建立提供参考依据。

沙棘、红枣、山楂复合功能饮料的研制

目的:制备沙棘、红枣、山楂复合功能饮料,优化其配方并测定抗氧化活性。方法:采用正交试验确定沙棘汁、红枣汁、山楂汁的复合配比,并在单因素试验基础上,以感官(色泽、气味、组织状态、口感)评分为评价指标,白砂糖、食盐、柠檬酸、羧甲基纤维素钠加入量为影响因素确定响应面试验优化配方,最后测定该复合功能饮料的抗氧化性。结果:沙棘红枣山楂复合饮料的复合配比(沙棘汁∶红枣汁∶山楂汁)为20∶10∶4(V∶V∶V),白砂糖添加量为5%、食盐添加量为0.06%、柠檬酸添加量为0.03%、羧甲基纤维素钠添加量为0.05%,感官评价为8.9分,在以上条件下,复合功能饮料色泽气味理想,口感良好,组织状态均匀,透明度高,对DPPH自由基的清除能力高达92.60%。结论:沙棘红枣山楂复合饮料具有强抗氧化活性功能,是值得开发的饮料产品。

响应面法优化化香树果序壳聚糖微球的制备

目的:采用乳化化学交联技术制备化香树果序提取物壳聚糖微球,并采用响应面法对提取工艺进行优化。方法:在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken试验设计法对化香树果序提取物鼻黏膜用微球的制备工艺进行设计并优化。结果:最佳制备工艺:醋酸浓度为4.99%、span-80量为3.50 mL,油相与水相比为2.971。考虑到实际条件,将以上条件分别调整为:醋酸浓度5%、span-80量3.50 mL、油相与水相比31。采用以上最佳工艺制备微球,测定载药量和包封率分别为28.9%、43.8%。结论:优化后得到稳定的制备工艺,包封率和载药量较高,适于鼻黏膜用化香树果序提取物壳聚糖微球的制备。

温肾宣痹汤治疗骨质疏松症患者疗效及对骨代谢指标及血清IL-4、IL-6水平及凝血功能的影响

目的探讨温肾宣痹汤治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者疗效及对骨代谢指标及血清IL-4、IL-6水平的影响。方法选择我院收治骨质疏松症患者96例,随机分为观察组和对照组各48例,两组患者入组后根据情况给予基础治疗,对照组口服碳酸钙D 3咀嚼片,观察组在此基础上使用温肾宣痹汤,实施为期3个月。观察治疗前后血清护骨素(Osteoprotegrin,OPG)、骨碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphatase,BALP)水平、腰椎L2-4及双髋部骨密度值、血清白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)及白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平、纤维蛋白原(Fbg)、纤维蛋白降解产物(FDP)及D二聚体(D-D)水平、Oswestry功能障碍指数评定量表(Oswestry disability index,ODI)及日常生活自理能力评定表量表(Activities of daily living,ADL)评分,并记录药物不良反应。结果观察组治疗后OPG、BALP水平均低于对照组(P<0.05);观察组治疗后腰椎L2-4及双髋部骨密度水平均高于对照组(P<0.05);观察组治疗后血清IL-4、IL-6水平均明显低于对照组(P<0.05);观察组治疗后ODI量表评分均明显低于对照组(P<0.05);观察组治疗后,观察组Fbg、FDP、D-D水平均低于对照组(P<0.05);观察组治疗后ADL量表评分明显高于对照组(P<0.05)。结论温肾宣痹汤治疗骨质疏松症能有效改善骨代谢指标,提高骨密度水平,改善凝血功能,减轻炎症反应。

基于响应面法优化的倒卵叶五加多糖的超声波提取工艺研究

目的:采用超声波对倒卵叶五加多糖进行提取,并利用响应面法对提取工艺进行优化。方法:在单因素实验基础上,以Box-Behnken响应面实验设计法,优化倒卵叶五加多糖的提取工艺。结果:影响倒卵叶五加多糖提取率的因素大小顺序为:料液比>超声温度>超声时间。响应面法确定的最佳工艺:料液比1∶50 g·m L-1,超声时间为60 min,超声温度为60℃,多糖得率为1. 68%。结论:利用超声波提取倒卵叶五加多糖,提取率约为传统提取的4倍,表明该工艺对倒卵叶五加多糖的提取效果显著。

基于响应面优化的穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂的制备工艺研究

目的:制备穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂并优化工艺及其处方,为其肺部给药系统的设计提供理论基础。方法:以反溶剂沉淀法制备纳米混悬剂,喷雾干燥法制备微粉,分别测定收率、吸湿率、多分散指数和平均粒径,以总评"归一值"为评价指标,采用星点设计考察进口温度、大豆卵磷脂在辅料总量中的比例以及待喷液浓度3因素对制备工艺的影响,对结果分别进行多元线性和二项式方程拟合,效应面法优选最佳条件并进行预测分析。结果:从相关系数(R2=0.9312,P=0.0001)上看,总评"归一值(OD)"用二项式方程拟合较好,根据优化条件(进口温度140℃,大豆卵磷脂在辅料总量中的比例1∶3.3和待喷液浓度4%,此时归一值最大为0.5908)制备的薯蓣皂苷吸入粉雾剂的收率为94.84%,吸湿率4.03%,平均粒径3.998μm,多分散指数0.492,与预测值相比,误差均小于0.3%。结论:星点设计可用于优化制备工艺和处方,优选的穿山龙薯蓣皂苷吸入粉雾剂制备工艺稳定可行,微粉粒径大小适宜,可满足肺部吸入给药的要求。

葛根中有效成分葛根素膜分离工艺研究

目的优选陶瓷膜分离葛根中有效成分葛根素的工艺条件。方法采用响应面法用指标成分透过率作为评价,分别将过膜压力(MPa)、膜孔大小(KD)、过膜浓度(mg·mL^-1)三种因素作为实验指标,研究其对膜分离葛根中有效成分葛根素的影响,在单因素实验的基础上根据Box-Behnken的中心组合实验设计原理,利用design-expert软件对数据进行回归分析。结果陶瓷膜分离葛根中有效成分葛根素的优化条件为:过膜浓度0.25 mg·mL^-1,过膜压力1.6 MPa,膜孔大小300 KD。在此条件下葛根素的膜透过率平均为47.546%,二项式拟合复相关系数R2=0.9559。结论该工艺简单,容易操作且指标成分透过率较高,相比传统工艺,用醇量较少,生产周期较短,具有可操作性,可用于葛根中有效成分葛根素的分离。

穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的制备构建及评价研究

该文建立了热高压均质法制备穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的工艺方法,并对星点设计-响应面法优化其工艺处方进行了体外制剂学评价。结果显示按照星点设计-响应面法优化后的最佳工艺处方制备的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体为类球形,粒径为(90.9±0.6)nm,多分散系数为(0.253±0.07),粒度分布均匀,Zeta电位为(-45.7±0.5)m V,包封率为(90.2±0.5)%,载药量为(23.30±0.10)%。结果表明热高压均质法制备的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体具有良好的理化性质。

穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的大鼠在体肠吸收特性研究

目的:研究穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体的大鼠在体肠吸收特性。方法:采用高效液相色谱法测定穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体中穿山龙薯蓣皂苷含量;大鼠在体单向灌流法研究吸收部位,药物浓度对穿山龙薯蓣皂苷肠吸收的影响;比较穿山龙提取物和纳米制剂在体肠吸收特性。结果:穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体在大鼠全肠段均有吸收,其在不同肠段的吸收速率常数(absorption rate constant,Ka)和表观吸收系数(apparent absorption coefficient,Papp)从大到小依次为:回肠>空肠>十二指肠>结肠;不同质量浓度(30,60和120μg·m L^-1)的穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体,其Ka和Papp没有显著性差异,提示在实验浓度范围内,穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体在大鼠全肠段的吸收没有浓度依赖性,吸收机制可能属于被动扩散;穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体组和薯蓣皂苷提取物组比较,Ka和Papp有显著性差异(P <0. 05),且纳米制剂在空肠的吸收系数是薯蓣皂苷提取物的1. 28倍。结论:穿山龙薯蓣皂苷纳米结构脂质载体在空肠和回肠肠段吸收良好且吸收速率不受药物浓度的影响,制备成纳米结构脂质载体后能够增加药物的生物利用度,具有良好的应用前景。