利用Gateway克隆技术大规模克隆拟南芥转录因子

随着越来越多基因组全序列的测定完成,基因组的研究进入了功能研究阶段。功能基因组的研究需要把大量基因连入不同载体,传统的酶切连接构建载体的方法不能满足这种大规模克隆的需要。Gateway技术是一种高效的大规模克隆系统,而且对载体和宿主没有依赖性。本文利用Gateway大规模克隆技术将16个拟南芥转录因子的ORF克隆入植物表达载pPTV和酵母表达载体pYTV中,酵母融合表达实验和West-ern-blot检测证明了该克隆途径的可行性,并且得到的His-Tag融合蛋白,为拟南芥转录因子的大规模蛋白质组学研究奠定了良好的基础,同时基因序列的聚类分析为将来进一步的功能研究提供了有利信息。

基于工艺系统刚度的加工误差分析

在切削加工过程中 ,工件和刀具正确的相对位置是保证零件加工精度的必要条件。工艺系统刚度及精度是影响工件、刀具位置的关键因素。因此研究工艺系统刚度 ,对提高零件的加工精度具有十分重要的意义。文章基于切削加工中工件的准静态受力分析 ,运用经典Hertz接触理论和有限元的方法 ,提出计算工艺系统刚度的新方法。该方法避免了有限元计算中接触单元的使用 ,无需多次非线形迭代计算。给出了基于工艺系统刚度的工件加工误差预报模型。

面向加工误差分析的集成CAD／CAE系统

本文在现有的CAD软件Pro/E和有限元分析软件ANSYS基础上,运用二次开发工具ProToolkit和APDL以及编程工具VC++6.0实现零件加工误差分析模块与CAD系统集成,用于分析壳体类零件的平面铣削工序和镗孔工序的加工误差.

基于POE的城市公园绿地消费特征分析

城市公园绿地对保障城市生态环境可持续发展和维护居民身心健康起着至关重要的作用。深入调查城市绿地消费特征,能有效提高城市公园绿地规划水平,促进城市可持续发展。以沈阳市45个主要公园绿地为样地,以公园绿地消费者为研究对象,采用POE法,对城市公园绿地消费者的年龄、收入、户籍、到访目的、到访频率、交通方式、时间期望等方面进行调查,分析目前城市公园绿地绿地消费特征,为城市绿地系统规划提供重要的决策参考信息。

基于BP算法和单目标攻击的航空弹药需求仿真

航空弹药是未来高技术战争中使用的重要武器装备,战时航空弹药的需求与载机突防能力、目标类型、打击精确度等指标有密切的关系,用传统的累计算法求得的预测结果往往与实际需求有较大的差距,对战前的航空弹药保障供应策略有极大影响。以基于目标打击的航空弹药需求变化为研究对象,通过建立仿真模型,并采用神经网络的BP算法进行仿真计算,得到了航空弹药需求与载机突防能力、目标类型、打击精确度等相关因素的内在映射关系。所得结果反映了航空弹药实际需求与多种外部因素的内在关系,在战时的航空弹药供应决策中具有重要意义。

基于仿真-解析混合方法的弹药生产补充控制模型

以弹药生产补充计划为研究对象,分析了传统方法存在的问题,提出了仿真与解析相结合的混合控制方法。通过实例分析,说明了混合方法能够克服单独使用解析或仿真方法带来的弊端。

论金融机构在数据挖掘中的个人信息保护义务

金融机构利用数据挖掘获取具有经济价值的信息,会产生消费者收益被剥夺、个人隐私权被侵犯、消费者个人信息泄露等个人信息安全隐患,导致数据流通秩序的破坏。金融消费者的信息保护是数据利用的基础,而数据利用与流转是数据经济乃至金融机构的“血液”,两者均不可偏废。保护义务的构建,需要完善数据交易市场的数据相关权属,共享数据挖掘成果;健全数据挖掘个人信息保护相关法律法规,以是否“加密并无法还原”为标准,设置不同的数据处理规则,最终达到个人数据保护与数据利用流转之间的平衡。

基于灰色关联度的航空弹药质量影响分析

应用灰色关联度分析理论,基于零碎、杂乱的客观数据,考察影响航空弹药质量变化的各种因素,并找出主要因素,为后方军械仓库搞好航空弹药质量管理提供理论依据。

危险驾驶罪不同地域量刑差异实证分析

危险驾驶罪是我国刑法中典型的轻微罪。文章通过对既定判决的实证分析,发现本罪在实践中的发案特点为:第一,造成交通事故比例较大;第二,实践中以醉酒驾驶型为主,其他类型鲜见;同时发现在审判中存在如下问题:第一,不同区域量刑标准不一;第二,审理依据不完善。针对以上问题,我们认为,应严格执法,进一步细化量刑规范。

水稻肉桂酰辅酶A还原酶基因的克隆与表达分析

用现有的OsCCR基因片段筛选水稻核DNA文库,获得了长为3045 bp的核DNA.它包含4个内含子和5个外显子,推测的可读框长为337个氨基酸.OsCCR与其他植物中同类酶在氨基酸水平上有70％的相似性和30％的相同性,含有保守的辅酶Ⅱ(NADP)结合位点及可能为该酶催化位点的特征序列.Northern杂交证实,该基因产物广泛存在于水稻根、茎和叶等各组织中,在茎中表达量较高.组织原位杂交结果表明,OsCCR基因在维管束及新生侧根中有强烈的表达信号,与该基因编码的酶的木质素合成特性相吻合.OsCCR基因的克隆、组织定位及生物化学方面的研究将有助于深入了解木质素形成的分子机理,并为通过遗传工程的手段改善植物的机械性能以获得低木质素纸浆原料打下基础.

拟南芥QRAP2基因的克隆、表达、DNA结合能力及体外转录活性分析

通过对拟南芥ATH1基因芯片数据的分析,从拟南芥中鉴定到一个受干旱胁迫高水平诱导的cDNA片段,并用RACE方法获得了其全长cDNA.PCR及定量实时PCR分析表明,该基因在经干旱、紫外线照射、脱落酸、高盐以及水杨酸等胁迫条件处理后表达量均有显著提高,特别是干旱处理后短时间内表达量迅速提高,3h后即提高到对照样品的430多倍.通过多序列比对和系统进化分析,我们将该基因归于DREB亚家族.由于该基因编码蛋白含有典型的AP2/EREBPDNA结合结构域,并在N端有一段富含谷氨酰氨残基的区域,所以将它命名为QRAP2(Glutamine-richAP2).凝胶阻滞实验结果显示,QRAP2蛋白能够特异结合DRE顺式元件序列但不能与mDRE和GCC等非相关元件结合.酵母单杂交实验表明,QRAP2蛋白全长序列或其N端112个氨基酸与GAL4DNA结合结构域形成的融合蛋白表现出转录激活功能,而其C端135个氨基酸与GAL4DNA结合结构域的融合蛋白则没有表现出转录激活活性.现有资料的分析表明,QRAP2是AP2/EREBP转录因子家族的新成员,可能在干旱胁迫条件下参与激活相关下游基因的表达.

RNA结合蛋白MOV10在阿尔茨海默病人脑组织及细胞中的表达及意义

目的探讨RNA结合蛋白MOV10在阿尔茨海默病人脑组织及Aβ处理的人脑微血管内皮细胞和神经元中的表达变化。方法应用real-time PCR和Western blot检测MOV10的表达变化。结果 RNA结合蛋白MOV10在阿尔茨海默病人脑组织中,在Aβ处理的人脑微血管内皮细胞和神经元中高表达。结论 RNA结合蛋白MOV10可能参与调控阿尔茨海默病的病理过程。

各国生物类似药技术指南体系的比对研究及完善我国生物类似药技术指南体系框架的建议

生物类似药研发的总体目标是证明与原研药的相似性、不存在具有临床意义的差异。为有效指导生物类似药的研发,各国均制定了技术指南体系。对美欧日韩等国家、WHO及我国的生物类似药技术指南体系,包括药学研究、非临床研究、临床研究等进行对比研究,提炼构建技术指南体系的关键要素,结合问卷调研及专家研讨,提出完善我国生物类似药技术指南体系框架的建议。