甘南地区青贮牧草耐低温乳酸菌的筛选与鉴定

为筛选出适宜高寒地区低温青贮的优良乳酸菌菌株,本试验从箭筈豌豆(Vicia sativa)、小黑麦(Triticosecale wittmack)和燕麦(Avena sativa)3种牧草青贮饲料中分离乳酸菌菌株并通过低温控制培养及产酸试验进行筛选,对菌株进行形态、生理生化鉴定及16S rDNA同源性分析。结果表明,从3种牧草青贮牧草分离纯化得到42株乳酸菌,筛选得到具有较强低温生长能力和产酸能力的10株耐低温乳酸菌,其中7株为同型发酵乳酸菌,3株为异型发酵乳酸菌,10株菌株都具有较好的耐酸性、耐盐性和耐温性,经同源性测序分析菌株GN1,GN3和GN10为植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum),菌株GN2,GN4和GN7为短乳杆菌(Levilactobacillus brevis),菌株GN5和GN6为弯曲乳杆菌(Latilactobacillus curvatus),菌株GN8和GN9为清酒乳杆菌(Latilactobacillus sakei subsp.)。结合耐低温乳酸菌产酸能力、低温生长能力和生理生化特性等多种结果综合考虑,植物乳杆菌GN1,GN3和GN10及短乳杆菌GN7适宜作为高原地区低温青贮发酵的备选菌株。

抑制黄曲霉乳酸菌的筛选与鉴定

黄曲霉是玉米(Zea mays L.)青贮过程的主要污染物之一,本研究旨在从玉米青贮饲料中分离筛选出能够抑制黄曲霉菌生长的乳酸菌,为改善和提高青贮饲料品质提供优良菌种。本试验采用双层平板法,从玉米青贮饲料中筛选抑制黄曲霉的菌株,并对其进行生理生化鉴定及同源性分析,构建系统发育树,明确各菌株的分类地位。结果表明:从青贮发酵不同阶段筛选得到50株乳酸菌,其中有7株乳酸菌对黄曲霉有明显抑制作用(P<0.05),抑菌圈直径均大于3.60 cm,均为革兰氏阳性同型发酵乳酸菌,7株乳酸菌中Q39(49.40%)和Q40(49.60%)抑菌效果最好,抑菌圈直径为4.15 cm和4.17 cm,显著高于其他5株乳酸菌(P<0.05);菌株Q11,Q28,Q40,Q44与22种碳水化合物作用均呈阳性,菌株Q39和Q49与鼠李糖作用呈阴性,与松三糖反应呈弱阳性,菌株Q13相较于其他6株菌株对于碳源的利用情况较弱;经16S rDNA鉴定确定菌株Q39和Q49为植物乳杆菌,Q11,Q13,Q29,Q40,Q44为戊糖乳杆菌。菌株Q39和Q40可作为全株玉米青贮发酵的备选添加菌株。

青贮玉米有氧暴露过程中营养品质及细菌群落多样性

青贮饲料营养品质的优劣很大程度上由其微生物组成决定,有氧暴露会引起微生物群落多样性发生变化。为探明有氧暴露后青贮玉米细菌多样性分布及其对青贮品质的影响,本试验对有氧暴露后0 h,1 h,8 h,24 h,36 h,48 h,72 h,96 h,120 h青贮玉米(Zea mays L.)的营养品质和细菌群落结构测定与分析。结果表明:青贮玉米在有氧暴露过程中可溶性糖、粗蛋白和干物质含量降低,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量上升,钙和磷含量变化不明显;有氧暴露过程中细菌多样性呈先升高后降低的趋势,在有氧暴露36 h时细菌多样性最高;有氧暴露不同时间,优势细菌门分别是厚壁菌门和放线菌门,优势细菌属为乳酸菌属;有氧暴露过程中厚壁菌门与可溶性糖和蛋白质含量呈极显著正相关关系,与中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量呈极显著负相关关系;变形菌门和酸杆菌门细菌与可溶性糖含量呈负相关关系。综上所述,与生产实践相结合青贮玉米应该在有氧暴露8 h内完成饲喂。