面向服务的Web异构数据集成体系结构研究

目前利用传统的中间件技术进行异构数据集成研究,已经取得了很大成果,但是还存在几方面的问题:(1)对系统同构性的要求;(2)不能顺利穿越防火墙;(3)不同组件模型之间的互操作。引入Web service技术,提出利用Web serv-ice进行异构数据集成的方法,最后给出一个面向服务的Web异构数据集成体系结构,能较好地解决传统中间件技术在上述三方面的问题。

His-细胞外调节蛋白激酶8融合蛋白的表达与纯化

目的:对细胞外调节蛋白激酶(ERK)8进行表达、纯化及活性鉴定。方法:PCR扩增目的基因ERK8,进行Bam HⅠ和HindⅢ双酶切,与经Bam HⅠ和HindⅢ表达载体p ET-28a进行连接,转化大肠杆菌BL21,以不同浓度(0.2、0.4、0.8、1.0mmol/L)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和不同温度(15、20、25、37℃)对重组质粒进行诱导表达,并用Western blot技术鉴定表达的融合蛋白;用Ni2+金属螯合亲和层析柱法对融合蛋白进行纯化。结果:成功构建p ET-28a-ERK8重组质粒,并获得纯化的有活性的His-ERK8融合蛋白,且IPTG终浓度为0.2 mmol/L,温度37℃,时间5 h下,该融合蛋白的表达量最大。结论:通过对p ET-28a-ERK8的构建和ERK8蛋白表达与纯化,为进一步研究ERK8蛋白的结构和功能奠定实验基础。

核转录因子及其突变基因的克隆与GST融合蛋白的表达纯化及磷酸化活性的检测

目的:原核表达IκBα及IκBα(S32,36A)基因,纯化获得GST-IκBα及GST-IκBα(S32,36A)融合蛋白。方法:利用PCR扩增含有酶切位点EcoRⅠ及NotⅠ的IκBα基因,将其装入pGEX-5X-1原核表达载体中。通过点突变获得pGEX-5X-1-IκBα(S32,36A)质粒。将正确的重组载体转入大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,再用Glutathione Sepharose 4B beads纯化GST融合蛋白,最后通过Western Blot鉴定纯化后的融合蛋白。结果:成功构建了pGEX-5X-1-IκBα及pGEX-5X-1-IκBα(S32,36A)原核表达载体。在37℃条件下,0.1mmol/L的IPTG能够诱导表达大量可溶性GST-IκBα与GST-IκBα(S32,36A)蛋白;纯化的融合蛋白可被抗IκBα的单克隆抗体特异性识别。最后通过体外激酶试验验证了IκBα能被HeLa细胞中存在的上游激酶所磷酸化,而第32,36位丝氨酸突变后IκBα不具有磷酸化活性。结论:纯化的GST-IκBα/IκBα(S32,36A)蛋白具有生物学活性,可用于后续的生物学研究。

HeLa细胞中ERK8突变基因的发现

目的:检测HeLa细胞中ERK8基因的表达并对其进行序列分析。方法:Westernblot检测HeLa细胞中ERK8蛋白的表达。提取HeLa细胞中的RNA,用RT-PCR方法得到ERK8基因片段,克隆后进行序列测定和分析。结果:首次发现HeLa细胞中存在ERK8基因突变:ERK8 S192P。结论:ERK8基因在HeLa细胞中的表达及其突变的发现,为进一步研究ERK8突变体在HeLa细胞中的功能研究奠定基础。

重组人源MAPK15基因稳定表达细胞系的构建及其对肺癌细胞迁移的影响

目的:研究MAPK15基因对人肺癌H1299细胞迁移作用的影响。方法:将人源MAPK15克隆到真核表达系统中并通过脂质体法转染H1299;用含有Zeocin抗性的培养基进行筛选,挑取抗性细胞克隆扩大培养;Western blot检测MAPK15蛋白表达;通过划痕和Transwell实验研究MAPK15在H1299中细胞迁移率变化。结果:Western blot表明,挑取的抗性细胞克隆稳定表达MAPK15;划痕和Transwell实验结果显示,有MAPK15高表达的H1299中细胞迁移明显快于对照组。结论:在人肺癌H1299中,MAPK15高表达能促进细胞迁移,这为进一步阐明MAPK15在肺癌发生过程中所起的作用提供了一定的参考依据。

改良鸟巢体位护理模式联合音乐在早产儿中的应用

目的探讨改良鸟巢体位护理模式联合音乐在早产儿中的应用效果。方法选取2019年4月~2021年3月于我院出生的78例早产儿,依据随机数字表法分成对照组和观察组各39例。对照组采用常规护理,观察组在对照组基础上采用改良鸟巢体位护理联合音乐干预护理,两组均干预2周。比较两组早产儿干预前、干预2周的生长发育情况(身高、头围以及体重)以及干预期间奶量增加、体温波动及出保温箱时间。结果干预2周,两组早产儿身高、头围以及体重比干预前高,且观察组高于对照组(P<0.05);观察组早产儿奶量增加高于对照组,体温波动低于对照组,出保温箱时间短于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论改良鸟巢体位护理模式联合音乐干预可促进早产儿生长发育,增加奶量,减少体温波动及缩短出保温箱的时间。

沐舒坦静脉滴注联合雾化吸入治疗新生儿肺炎的效果及对患儿外周血相关指标的影响

目的 探讨不同给药途径的沐舒坦治疗新生儿肺炎感染的临床价值。方法 选取2018年6月—2019年10月就诊于该院的肺炎感染患儿90例为研究对象,所有患儿均使用沐舒坦治疗,根据给药途径不同将90例患儿随机分为静脉滴注治疗组30例、雾化吸入治疗组30例和静脉滴注加雾化吸入治疗组30例,探讨3种不同给药途径沐舒坦治疗效果。结果 静脉滴注加雾化组治疗优良率略高于雾化吸入组,但差异无统计学意义(P>0.05);雾化吸入组与静脉滴注加雾化组治疗优良率显著高于静脉滴注组,差异有统计学意义(P<0.05)。静脉滴注加雾化组患儿咳嗽、气促及肺啰音等临床症状消失时间短于雾化吸入组和静脉滴注组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前3组患儿二氧化碳分压(PaCO_(2))、动脉氧分压(PaO_(2))检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后3组患儿PaCO_(2)、PaO_(2)较治疗前均有明显改善,且静脉滴注加雾化组患儿改善情况显著优于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前3组患儿外周血白细胞(WBC)、降钙素原(PCT)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后各项指标较治疗前明显降低,且静脉滴注加雾化组降低幅度明显大于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 静脉滴注联合雾化吸入沐舒坦治疗新生儿肺炎感染效果显著,能快速缓解患儿临床症状,药物不良反应少,可作为新生儿肺炎感染治疗的首选治疗方法,值得推广。