急性非洲猪瘟的实验病理学研究

旨在通过对非洲猪瘟临床病理学和组织病理学的研究,探讨病理学变化与疾病发生发展的内在关系及其病理机制。选用体重20 kg左右的长白猪13头,肌内注射非洲猪瘟病毒毒株Pig/HLJ/18,剂量10^(2)HAD_(50)·mL^(-1)。试验期间的死亡猪,全部进行系统剖检和取材,制备石蜡切片,苏木素伊红染色。建立病理学评价标准,病变(无序分类变量)用频率和百分比表示,病变程度(有序分类变量)按各组织器官的不同病变进行分级和评分。结果表明,发病猪符合非洲猪瘟急性、热性、高传染性等临床特征,发病率100%,病死率100%。病死猪表现败血症典型特征,尸体易腐败,血凝不良或溶血,尸僵不全。主要病理损伤为出血性坏死性淋巴结炎、急性炎性脾肿(败血脾)、脑水肿、肺水肿和肺实变等。脾和淋巴结是非洲猪瘟病毒攻击的靶器官,病变最为显著,出现时间最早,持续时间最长,发生频率最高。病理变化以血液循环障碍尤为突出,包括水肿、充血、淤血、出血、梗死和弥散性血管内凝血等多种病理表现,出血性病变为其最主要的特征。非洲猪瘟病毒引发的以淋巴细胞渗出为主的炎症反应贯穿始终,在病程的中后期表现更为明显。结果提示,急性非洲猪瘟的主要病理过程为典型的免疫/炎症级联反应和严重的全身血液循环障碍,共同导致急性非洲猪瘟的高发病率和高死亡率。

罗氏沼虾3个养殖群体形态差异分析

为了探讨罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)不同养殖群体之间的形态差异,应用聚类分析、主成分分析、判别分析等方法比较广东、广西、海南的3个罗氏沼虾养殖群体的全长/体长、剑额长/体长、头胸甲长/体长等15个性状比例参数。各性状的变异系数均在15.000%以上;单因素方差分析结果显示,15个性状比例中,仅第二步足指节长/第二步足长在3个养殖群体中均无显著差异;聚类分析结果显示,广东与海南养殖群体形态差异最小,广西与海南养殖群体形态差异最大,其次是广东与广西养殖群体;经主成分分析得到5个主成分,累计贡献率为75.563%,3个养殖群体的形态学分化主要集中在头胸腹部、体长、第二步足、尾柄的特征上;判别分析得到9个性状比例的判别函数系数,可构建区分3个养殖群体的判别函数,综合判别率达75.900%。以上结果表明,单因素方差分析、聚类分析、主成分分析和判别分析结果基本一致,3个养殖群体间存在较大差异。

黄芪多糖脂质体的制备及表征研究

为了优选黄芪多糖脂质体的最佳工艺并对其进行表征验证,采用逆向蒸发法制备黄芪多糖脂质体,以膜材比、脂药比和超声时间为考察因素,包封率为评价指标,采用L9(3^4)正交试验设计优选制备条件,以超速离心法测定包封率,纳米颗粒分析仪和透射电镜测定其粒径大小与形态。结果显示,制备黄芪多糖脂质体的最佳工艺为膜材比8∶1,脂药比4∶1,超声时间90 s,包封率93.77%,24 h累积释放率62.67%,平均粒径557 nm。表明制备的黄芪多糖脂质体具有较高的包封率与良好的缓释作用,粒径和形态较均匀,重现性好。

玉屏风多糖脂质体的制备及表征研究

优选玉屏风多糖脂质体的最佳工艺并对其进行表征验证。采用逆向蒸发法制备玉屏风多糖脂质体,以膜材比、脂药比和超声时间为考察因素,包封率为评价指标,采用L9(34)正交试验设计优选制备条件,以超速离心法测定包封率,体外释药试验验证,纳米颗粒分析仪和透射电镜测定其粒径大小与形态。制备玉屏风多糖脂质体的最佳工艺为膜材比8∶1,脂药比4∶1,超声时间90s,包封率88.38%,24h累积释放率73.45%,平均粒径132.65nm。制备的玉屏风多糖脂质体具有较高的包封率与良好的缓释作用,粒径和形态较均匀,重现性好。

玉屏风多糖脂质体对雏鸡外周血集落刺激因子以及T淋巴细胞亚群和B淋巴细胞亚群的影响

为了探讨玉屏风多糖脂质体(YPF-PL)对雏鸡外周血集落刺激因子及T、B淋巴细胞亚群的影响,将150只13日龄麻黄雏鸡随机分为5组,分别为YPF-PL高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg)、YPF-P组(200 mg/kg)和对照组,试验1~7 d和14~21 d将药物混于饲料给药,并在试验开始后第4天和第17天各组均免疫接种禽流感H5灭活疫苗。每周检测禽流感的抗体效价,在试验第14天和第28天利用ELISA试剂盒检测外周血GM-CSF、G-CSF和M-CSF的质量浓度和流式细胞仪检测外周血CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例和Bu-1^+B淋巴细胞比例。结果显示:YPF-PL高剂量组在试验第35天抗体效价升至最高,但与对照组相比,差异不显著(P>0.05);试验第14天,YPF-PL高剂量组各集落刺激因子水平均显著高于对照组(P<0.05),YPF-PL中、高剂量组CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例极显著高于对照组和YPF-P组(P<0.01),YPF-PL中剂量组Bu-1^+B淋巴细胞比例极显著高于其余各组(P<0.01);试验第28天,YPF-PL中剂量组各集落刺激因子水平均极显著高于对照组、YPF-P组和YPF-PL低剂量组(P<0.01),YPF-PL高剂量组CD4^+和CD8^+T淋巴细胞比例显著或极显著高于对照组和YPF-P组(P<0.05,P<0.01),YPF-PL高剂量组Bu-1^+B淋巴细胞比例极显著高于其余各组(P<0.01)。试验结果表明,中、高剂量的YPF-PL能提高雏鸡外周血GM-CSF、G-CSF和M-CSF水平以及CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例和Bu-1^+B淋巴细胞比例,并优于YPF-P。

玉屏风多糖脂质体在雏鸡小肠的吸收特性

为了研究玉屏风多糖脂质体(YPF-PL)在雏鸡小肠的吸收特性,取12只45日龄SPF雏鸡,建立雏鸡在体小肠循环灌流模型,采用柱前衍生化HPLC分析方法,检测循环回路中不同时间点的药物含量,分别考察雏鸡小肠全肠段、十二指肠、空肠和回肠对YPF-PL和玉屏风多糖(YPF-P)灌流4 h的吸收情况,并通过计算比较药物的累计吸收量及吸收动力学参数:吸收速率常数(Ka)、吸收转化率(A)、吸收半衰期(T_(1/2))及表观渗透系数(P_(app))。结果显示,在小肠全肠段考察中,雏鸡对YPF-PL的吸收总量显著高于传统剂型的YPF-P(P<0.05);雏鸡小肠对YPF-PL的吸收速率常数、转化率和表观渗透系数比YPF-P分别提高了35%,26%,20%,且均显著高于YPF-P(P<0.05);雏鸡小肠对YPF-PL的吸收半衰期比YPF-P缩短了26%,且显著低于YPF-P(P<0.05);在不同肠段考察中,YPF-PL和YPF-P吸收速率常数(Ka)和吸收转化率的大小顺序均为空肠>回肠>十二指肠;与YPF-P相比,YPF-PL在十二指肠、空肠、回肠的吸收速率常数(Ka)分别提高了17%,28%,12%,吸收转化率分别提高了15%,23%,19%,且均极显著高于YPF-P(P<0.01)。结果表明,YPF-PL和YPF-P在雏鸡十二指肠、空肠和回肠都有不同程度的吸收,吸收速率和单位吸收量大小顺序均为空肠>回肠>十二指肠,且与YPF-P相比YPF-PL能提高雏鸡小肠对YPF-P的吸收速率和单位吸收量,进而提高生物利用度,增强疗效。